刺叶锦鸡儿根与地上部分化学成分初步研究

贾月梅， 潘　兰， 贾新岳， 力瓦衣丁·买合苏提， 石明辉， 贾晓光

(新疆维吾尔自治区中药民族药研究所， 乌鲁木齐　830002)



刺叶锦鸡儿根与地上部分化学成分初步研究

贾月梅， 潘兰， 贾新岳， 力瓦衣丁·买合苏提， 石明辉， 贾晓光

(新疆维吾尔自治区中药民族药研究所， 乌鲁木齐830002)

目的分析和比较刺叶锦鸡儿根及地上部分的化学成分，探索地上部分代替根部的可能性。方法采用系统预试法，对刺叶锦鸡儿水提液、醇提液、石油醚提取液进行初步研究，并对其根与地上部分总黄酮含量进行定量分析。结果刺叶锦鸡儿根及地上部分均含有氨基酸、糖、多糖、酚类、鞣质、有机酸、黄酮类、生物碱、甾体和三萜类、香豆素、内酯和挥发油等化学成分。刺叶锦鸡儿根部总黄酮含量为0.46%，地上部分总黄酮含量为1.4%。结论刺叶锦鸡儿根与地上部分具有相似的化学成分，研究为刺叶锦鸡儿地上部分能否代替根入药提供了依据。

刺叶锦鸡儿； 根； 地上部分； 化学成分

刺叶锦鸡儿(Caragana acanthophylla Kom.)为豆科锦鸡儿属植物，主要生长在干山坡、荒漠、沙地，为落叶灌木，耐干旱，根系发达，有丰富的根瘤菌，具有良好的防风固沙、保持水土、提高土壤肥力和改善土壤物理性状的作用[1-3]，而且还具有薪炭、饲用、绿肥、蜜源等资源价值[4-6]。刺叶锦鸡儿的根在民间常作为抗风湿性关节炎的药物，具有活血、止痛、利尿、强壮的功效[7]。然而，鉴于刺叶锦鸡儿的根系非常发达且具有良好的保持水土特性，如果对其进行过度采挖，势必造成严重的生态破坏。本课题组前期研究[3]采用Ⅱ型胶原蛋白诱导的类风湿性关节炎(Rheumatoid arthritis，RA)大鼠模型，考察刺叶锦鸡儿根与地上部分乙醇提取物的体内抗RA活性。结果显示，刺叶锦鸡儿根与地上部分提取物均可降低RA大鼠关节炎指数，抑制踝关节肿胀程度；下调大鼠血清中炎性细胞因子IL-1β、IL-6、TNF-α和C反应蛋白水平，上调IL-10水平；病理切片显示，刺叶锦鸡儿根与地上部分可显著减少滑膜增生及炎性细胞浸润。刺叶锦鸡儿根与地上部分均具有抗RA活性，且地上部分的抗RA活性优于根，说明刺叶锦鸡儿地上部分有代替根入药的可能。为了进一步证明刺叶锦鸡儿地上部分能代替根入药，本研究对刺叶锦鸡儿的地上部分及根进行化学成分比较研究，以探索刺叶锦鸡儿地上部分能否代替根入药，也为进一步研究提供试验依据。

1　材料与方法

1.1试药、试剂及仪器刺叶锦鸡儿采集于新疆乌鲁木齐市红雁池，经贾晓光研究员鉴定为刺叶锦鸡儿(Caragana acanthophylla Kom)。试剂(茚三酮试剂、双缩脲试剂、Fehling试剂、氯化钠明胶试剂、1%FeCl3试剂、α-萘酚、溴酚蓝、三氯化铝试剂、乙酸镁试剂、铁氰化钾、异羟肟酸铁试剂、硝酸银、碱性碘化铋钾试剂、苦味酸试剂、硅钨酸试剂等)自制，石油醚、乙醇、三氯甲烷等试剂为分析纯。多用粉碎机(9FZ-25，四川简阳市大地机械厂)，电子天平(FA1104N，上海民桥精密科学仪器有限公司)，数显恒温水浴锅(HH-S2，金坛市医疗仪器厂)，三用紫外仪(ZF-2C型，上海市安亭电子仪器厂)。

1.2方法

1.2.1样品供试液制备[8-11]水提液的制备：称取实验品粗粉适量，置具塞锥形瓶中，加入蒸馏水10倍量，不时振摇，浸泡24 h，过滤，取滤液，供糖、多糖及苷类、多肽、氨基酸等成分的检识。醇提液的制备：取样品适量，加入8倍量的乙醇，回流提取1 h，滤过。滤液回收至无醇味，取一半的浓缩液，加10 mL乙醇溶解，供检识有机酸、鞣质、蒽醌、黄酮、甾体和三萜类化合物。另一半浓缩液加5%盐酸10 mL，充分搅拌，滤过，滤液供生物碱类化合物的检识。不溶部分，加乙酸乙酯10 mL溶解，再用5%氢氧化钠溶液振摇洗涤2次，获得的乙酸乙酯溶液，水浴上蒸干，残留物用乙醇15 mL溶解，供内酯、香豆素、强心苷类化合物的检识。石油醚提取液的制备：取实验品粗粉适量，置烧杯中，加入石油醚(60～90℃) 10倍量，密闭，室温放置2 h后滤过，滤液置于蒸发皿中浓缩后即得。

1.2.2总黄酮含量测定1.2.2.1标准曲线绘制采用 Al(NO3)3-NaNO2比色法。精密称取芦丁对照品适量，置于25 mL容量瓶中，加入70%乙醇定容至刻度，使其浓度为160 μg/mL对照品溶液。分别精密吸取0、0.5、1、2、3、4、5 mL芦丁对照品溶液置于25 mL容量瓶，加70%乙醇至5 mL，先加5%亚硝酸钠1 mL，摇匀，放置6 min，再加入10%硝酸铝溶液1 mL，摇匀，放置6 min，加10%NaOH试液10 mL，再加70%乙醇至刻度，摇匀，放置15 min，以试剂做空白参比液测500 nm处的吸光度。以吸光度做线性回归，得芦丁含量与吸光度的回归方程Y=0.016X+0.012，r=0.999 5。

1.2.2.2样品总黄酮含量测定称取刺叶锦鸡儿根、地上部分粗粉各10 g，分别置于圆底烧瓶中，加150 mL70%乙醇,水浴回流提取2 h，连续提取3次，合并滤液，减压浓缩，干燥，获得浸膏。将各部位浸膏用70%乙醇溶解，定容至25 mL，取1 mL置于25 mL容量瓶中，加入70%乙醇定容至刻度，作为供试品溶液。取供试品溶液2 mL，于500 nm处按“1.2.2.1”项下方法测吸光度。根据标准曲线，计算刺叶锦鸡儿不同部位的总黄酮含量。

2　结果与分析

2.1刺叶锦鸡儿根及地上部分不同提取液化学成分检测结果刺叶锦鸡儿根及地上部分氨基酸、黄酮、酚类、有机酸、生物碱等化学成分的检测结果见表1～3。由表1结果知，刺叶锦鸡儿根可能含有糖、多糖、氨基酸、酚类、鞣质、生物碱、有机酸、黄酮类、甾体和三萜类、内酯、香豆素和挥发油等成分。地上部分可能含糖、多糖、氨基酸、鞣质、酚类、有机酸、黄酮类、生物碱、甾体和三萜类、香豆素、内酯和挥发油等化学成分。

2.2总黄酮含量测定结果定量分析结果表明，刺叶锦鸡儿根部黄酮含量为0.46%，地上部分总黄酮含量为1.40%。

表1　刺叶锦鸡儿根及地上部分水提取液检测结果

注：“+”表示反应呈阳性；“-”表示反应呈阴性。

3　讨论

目前从锦鸡儿属植物中共分离出200余种化合物，包括黄酮类、二苯乙烯类、萜类、甾醇类、苯丙素类、有机酸、内酯、香豆素、生物碱等化合物，含量最大的是黄酮类化合物和二苯乙烯类化合物，分别占锦鸡儿属化合物总量的30%和20%左右[12-15]。本研究结果也符合文献中报道的化学成分种类范围。在后续工作中，本课题组将对刺叶锦鸡儿根及地上部分进行系统研究，以深入比较其化学成分的具体差异。

表2　刺叶锦鸡儿根及地上部分醇提取液检测结果

注：“+”表示反应呈阳性；“-”表示反应呈阴性。

表3　刺叶锦鸡儿根及地上部分石油醚提取液检测结果

注：“+”表示反应呈阳性；“-”表示反应呈阴性。

现代药理研究表明锦鸡儿具有抗炎镇痛、抗骨质疏松、抗肿瘤、抗氧化、防治心血管类疾病、抗菌等作用[16-19]。黄酮类化合物是锦鸡儿属植物中一类重要的活性成分，通过对刺叶锦鸡儿不同药用部位总黄酮含量进行定量分析，发现刺叶锦鸡儿地上部分的黄酮类化合物含量高于其根部，为刺叶锦鸡儿地上部分利用提供了依据。

[1]姚彦臣.我国锦鸡儿属灌丛草地类型的基本特点及其经济评价[J].中国草地,1992,14(2):55,60.

[2]曹成有,蒋德明,阿拉木萨.小叶锦鸡儿人工固沙区植被恢复生态过程的研究[J].应用生态学报,2000,l1(3):349-350.

[3]潘兰,贾新岳,石明辉,等.新疆产四种锦鸡儿的民族植物学调查[J].中国现代中药,2013,15(7):578-579.

[4]刘增文,李雅素.黄土丘陵区柠条林地养分状况及其循环规律[J].生态学杂志,1997,16(6):27-29.

[5]刘晶,魏绍成,李世钢.柠条饲料生产的开发[J].草业科学,2003,20(6):32-35.

[6]刘国谦,张俊宝,刘东庆.柠条的开发利用及草粉加工饲喂技术[J].草业科学,2003,20(27):26-32.

[7]贾敏如,李星炜.中国民族药志要[M].北京:中国医药科技出版社,2005:131-132.

[8]潘兰,李晓瑾,贾晓光,等.瘤果黑种草化学成分的初步研究[J].新疆农业科学,2010,47(2):300-302.

[9]周琴,贾新岳,潘兰,等.哈萨克民间药用角果藜化学成分初步研究[J].新疆农业科学,2012,49(5):891-894.

[10]邱黛玉.中药化学实验指导[M].兰州:甘肃农业大学农学院, 2007:21-28.

[11]侯小涛,邓家刚,戴 航,等.银合欢种子化学成分预实验[J].时珍国医国药,2009,20(1):62-63.

[12]宋萍,马欢,田娅.藏药鬼箭锦鸡儿化学成分及药理作用的研究进展[J].中国药物与临床, 2009,9(12):1149-1151.

[13]杨中铎,李涛,杨明俊,等.锦鸡儿属植物化学成分及生物活性研究进展[J].中成药,2008,30(11):1678-1681.

[14]Luo HF, Zhang LP, Hu CQ．Five novel oligostilbenes from the roots of Caragana sinica[J]. Tetrahedron, 2001, 57(23):4849-4854.

[15]孙慧玲,张倩,李东,等.固相微萃取/气相色谱/质谱法分析锦鸡儿茎挥发性成分[J].中国实验方剂学杂志,2010,16(10):63-64.

[16]孙智华.中间锦鸡儿倍半萜类化合物的分离及活性研究[D].上海:复旦大学,2004:3-6.

[17]陈龙，张一冰，顾海鹏，等.锦鸡儿脂溶性成分GC-MS分析[J].中国实验方剂学杂志，2012,18(7):123-125.

[18]金桂林.柠条籽化学成分及生物活性研究[D].上海:第二军医大学,2008:13-36.

[19]高海峰,郑兵兵,王蓟花,等.白皮锦鸡儿黄酮醇类化合物及其抗菌和抗氧化活性[J].天然产物研究与开发,2011,23(23):853-856,930.

(本文编辑周芳)

Preliminary study of the chemical components on the root and aerial part of Caragana acanthophylla Kom

JIA Yuemei, PAN Lan, JIA Xinyue, Liwayiding Maihesuti, SHI Minghui, JIA Xiaoguang

(XinjiangInstituteofChineseMateriaMedicaandEthnodrug,Urumqi830002,China)

ObjectiveIn order to identify and compare the chemical constituents between the root and aerial part of Caragana acanthophylla Kom, explore the possibility that the ground part can instead of the roots. MethodThe chemical constituents of water extract, petroleum ether extract, and ethanol extract were studied by systemic preparative test. The total flavonoids contents of root and aerial part from C. acanthophylla Kom were determined further. ResultsThe roots and the aerial part of C. acanthophylla Kom. contained amino acids, sugar, polysaccharide, phenols, tannin, organic acids, flavonoids, alkaloids, steroids and triterpene, coumarin, lactones and volatile oil. The contents of total flavonoids from C. acanthophylla Kom were 0.46% (root) and 1.4% (aerial part). ConclusionThere was no significant differences between the root and aerial part of C. acanthophylla Kom on chemical compositon. These basic information provided theory basis for the aerial part of C. acanthophylla Kom instead of the root of C. acanthophylla Kom.

CaraganaacanthophyllaKom; root; aerial part; chemical constituents

国家自然科学基金-新疆联合基金(U1203202)； 新疆维吾尔自治区重点实验室开放课题(XJDX0201-2013-02)

贾月梅(1987-)，女，在读硕士，研究方向：食品、药品研究。

贾晓光，男，研究员，硕士生导师，研究方向：中药民族药，E-mail:xgjia@vip.sina.com。

新疆锦鸡儿植物研究

R28

A

1009-5551(2016)10-1219-05

10.3969/j.issn.1009-5551.2016.10.001

2016-04-28]

专题研究作者简介：贾晓光，男，研究员，硕士生导师，国务院特贴专家，新疆维吾尔自治区优秀专家，新疆维吾尔自治区人民政府参事，新疆维吾尔自治区专家顾问团成员，2013年度自治区科技进步特等奖获得者。兼任新疆药学会副理事长、新疆中医药学会常务理事、中国民族植物学会理事、中国药用植物保育委员会委员、中国植物学会第四十届理事会药用植物专业委员会委员、新疆植物学会第七、八届理事会常务理事。主持国家科技支撑计划、科技部国际科技合作、联合基金项目、国家中医药管理局第四次中药资源普查(新疆)试点项目、新疆维吾尔自治区“十二五”科技重大专项、新疆维吾尔自治区科技成果转化、新疆维吾尔自治区科研院所改革与发展、自然科学基金、高技术领域服务平台建设、乌鲁木齐市科学技术计划等10余项，科研经费达4 800余万元。先后分别获省部级科技进步特等奖1项、一等奖2项、二等奖6项、三等奖7项及地州级科技进步一、二、三等奖共18项。出版专著11部，主编《紫草》、《新疆常见中草药栽培技术》、《天山雪莲》、《维吾尔药用植物DNA条形码集》、《新疆特色药用资源图谱Ⅰ》、《新疆药用植物名录》。发表论文160余篇，其中SCI收录9篇。申请发明专利21项，已授权17项，已实施5项。起草新疆维吾尔自治区DB165药材栽培标准15项，主持和参加起草产品标准16项。研发治疗白癜风新药“复方卡力孜然酊”和仿制新药12种，开发保健食品并获得批文8个。

锦鸡儿属为豆科植物，全世界约有100余种，我国产62种，新疆有26种，种类约占全国种类的1/2，占全世界的1/3，是中国锦鸡儿属种类多样性最多的地区，也是世界锦鸡儿属种类最集中的地区之一，资源极为丰富。该属植物主要集中分布在草原和荒漠的干旱和半干旱地区，均具有耐干旱、耐贫瘠、抗逆性强的生物学特性优势；锦鸡儿属植物根系较发达，具有防风固沙、保持水土和改善土壤养分的作用，具有饲用、绿肥、薪炭、蜜源、药用等价值。该属植物的根、地上部分、花、木部心材、种子等部位均可入药，在藏药、蒙药、朝药、中药等传统药中广泛应用，享有盛名。在国家自然科学基金-新疆联合基金(U1203202)的资助下，本课题组对锦鸡儿属植物的化学成分及药理活性研究现状进行了综述，在此基础上进行了吐鲁番锦鸡儿化学成分及抗肿瘤活性研究、刺叶锦鸡儿化学成分研究、吐鲁番锦鸡儿等新疆产4种锦鸡儿属植物总黄酮含量及有害元素含量的测定，以期为锦鸡儿属药用植物资源的合理开发及临床的安全性应用提供依据。