SYSMEX CA-510全自动血凝分析仪性能验证及评价

卢　昊，樊　军，王　庆，吴芳洁，杨文祥△

(1.湖北省疾病预防控制中心，武汉 430079；2.湖北省应用毒理学重点实验室，武汉 430074)



·临床研究·

SYSMEX CA-510全自动血凝分析仪性能验证及评价

卢昊1,2，樊军1,2，王庆1,2，吴芳洁1,2，杨文祥1,2△

(1.湖北省疾病预防控制中心，武汉 430079；2.湖北省应用毒理学重点实验室，武汉 430074)

目的对日本SYSMEX公司CA-510型全自动凝血分析仪进行性能评价。方法按照临床和实验室标准化委员会的文件，对该仪器的凝血酶原时间、活化部分凝血活酶时间、纤维蛋白原及凝血活酶时间正确度、精密度、线性及携带污染率等项目进行性能验证。结果该仪器的准确度、精密度、线性范围、携带污染率等性能指标评价良好。结论CA-510分析仪性能良好，可用于标本的检测。

CA-510；全自动凝血分析仪；性能验证

CA-510 全自动凝血分析仪是由日本SYSMEX公司推出的1款血凝分析仪器，它的检测原理是散射光比浊法和百分比终点法，可以测定凝血酶原时间、活化部分凝血活酶时间、纤维蛋白原、凝血酶时间等多项凝血相关指标，具有高效率、大样本分析能力，可为临床提供凝血、抗凝、纤溶系统各项指标的分析检测，测试结果可用于出血与血栓性疾病的诊断、抗凝药剂量监测及预后分析[1]。

根据美国临床实验室改进方案(CLIA′88)和我国国家食品药品监督管理总局(CFDA)对GLP实验室的相关要求，实验室引进新的仪器设备时，必须遵循标准化程序和质量管理的要求建立新的分析系统并定期进行性能评价，以确保仪器的功能良好或产生的试验数据准确可靠[2-3]。为了保证检验结果的准确性，为临床提供准确、可靠的检测结果，按照CNAS制订的《医学实验室——质量和能力的专用要求》和卫计委《医疗机构临床实验室管理办法》对医学实验室的要求，本研究对CA-510 全自动凝血分析仪的准确性验证、精密度验证、项目定标、线性验证以及血浆样本携带污染率验证进行了评价，现将评价结果报道如下。

1　材料与方法

1.1仪器与试剂仪器：采用SYSMEX CA-510全自动血凝分析仪。试剂：凝血酶原时间(Thromborel-S，批号545354)；活化部分凝血活酶时间(Actin-APTT，批号537487)；Calcium Chloride Solution(批号536898)；Thrombin Reagent(批号537985)；Owren′s Veronal Buffer pH7.35(批号527699)；Test Thrombin Reagent(批号525478)；Standard Human Plasma(批号503219A)；Clean I(批号A108A)；Ci-Trol 1(批号548116)；Ci-Trol 1(批号528223A)。

1.2方法

1.2.1检测项目及方法凝血酶原时间、活化部分凝血活酶时间、凝血酶时间均采用凝固法；纤维蛋白原采用Clauss法。

1.2.3精密度验证[6](1)批内精密度：选取正常参考值范围内(西门子定值质控血浆1)、异常血浆(西门子定值质控血浆2)各1份，用自动进样方式分别连续检测各20次，计算各组数据的均值、标准差和变异系数(CV%)。其中，凝血酶原时间、活化部分凝血活酶时间、纤维蛋白原、凝血酶时间的CV%必须符合CLIA′88规定的允许误差的1/4。(2)日间精密度：选取正常参考值内(西门子定植质控血浆1)、异常血浆(西门子定植质控血浆2)各1份，分别分装成6份，冻存于-80 ℃冰箱内。每天取出2个水平的标本各1份，分别测试2次，每天测定2次，共3 d。计算出CV%，其中凝血酶原时间、活化部分凝血活酶时间、纤维蛋白原、凝血酶时间的CV%，必须符合CLIA′88规定允许误差的1/3。

1.2.4线性验证[7]选取1份接近预期上限的高值全血样本(H)，分别按100%、80%、60%、40%、20%、10%的比例进行稀释，每个稀释度重复测定2次，计算均值。将实测值与理论值作比较(偏离应小于10%)，计算Y=aX+b，验证线性范围。其中a值应在1±0.05范围内，相关系数r≥0.975，认为符合要求。

1.2.5血浆样本携带污染率[8-9](1)高值标本对低值标本的污染：将低值标本(L)置标本架1、3位置，高值标本(H)置2位置，每例标本分别测定3次，记录结果：L1、L2、L3、H1、H2、H3、L4、L5、L6。计算：K1%=[L4-Mean(L1、L2、L3)]/Mean(L1、L2、L3)×100%，K1%≤10%判为符合要求。(2)低值标本对高值标本的污染：将高值标本(H)置标本架1、3位置，低值标本(L)置2位置，每例标本分别测定3次，记录结果：H1、H2、H3、L1、L2、L3、H4、H5、H6。计算：K1%=[H4-Mean(H1、H2、H3)]/Mean(H1、H2、H3)×100%，K1%≤10%判为符合要求。

2　结　　果

2.1准确性凝血酶原时间、活化部分凝血活酶时间、纤维蛋白原和凝血酶时间的检测数据结果均在质控说明书给定的范围内，均符合准确性试验要求。结果见表1。

2.2精密度

2.2.1批内精密度根据NCCLS EP-15A文件，凝血酶原时间、活化部分凝血活酶时间、纤维蛋白原、凝血酶时间的CV%必须符合CLIA′88规定的允许误差的1/4，即分别为≤3.75%、≤3.75%、≤5.00%、≤6.62%。批内精密度测定结果见表2。

注：-表示无数据。

表2　　CA-510全自动血凝分析仪批内精密度测定结果

2.2.2日间精密度根据NCCLS EP-5A文件，凝血酶原时间、活化部分凝血活酶时间、纤维蛋白原、凝血酶时间的CV%必须符合CLIA′88规定的允许误差的1/3，即分别为≤5.00%、≤5.00%、≤6.67%、≤8.83%。日间精密度测定结果见表3。

表3　　CA-510全自动血凝分析仪日间精密度测定结果

2.3线性范围5份不同比例浓度梯度的纤维蛋白原样本，每份样本检测2次，计算均值。检测结果均值与理论值之间的线性回归方程为Y=0.954 6X+0.176 8，r=0.993 3。测定结果表明，纤维蛋白原的线性范围为0.5～4.48 g/L，其中a=0.954 6，r=0.993 3，符合要求。纤维蛋白原线性范围见图1。

图1　　纤维蛋白原线性范围结果

2.4携带污染率选取部分代表项目凝血酶原时间、活化部分凝血活酶时间、纤维蛋白原等指标进行携带污染率评价，其中高值对低值的携带污染率K1分别为0.00%、4.45%、-3.05%；低值对高值的携带污染率K2分别为0.00%、2.13%、-8.49%。结果均低于标准值±10%，符合仪器性能要求。

3　讨　　论

在准确性验证中，本研究采用了西门子公司提供的质控血浆作为标本进行检测，与给定的靶值进行比较。结果表明，把凝血酶原时间、活化部分凝血活酶时间、纤维蛋白原、凝血酶时间等4项指标的测定值与靶值比较，偏倚均在允许范围内，表明仪器测定的准确性良好。

在精密度试验中，为了减少基质效应和标本种类所导致的检测结果差异，本研究在批内精密度试验中采用了临床收集的新鲜血浆作为检测样本，而在日间精密度试验中由于新鲜血浆的稳定性及保存期过短等原因，采用了试剂配套的质控品。研究结果表明，凝血酶原时间、活化部分凝血活酶时间、纤维蛋白原、凝血酶时间等4项指标的批内和日间精密度的变异系数均符合CLIA′88提出的指标质量分析要求，表明仪器具有良好的重复性和稳定性，精密度较小，可以满足实验室检测要求。

在线性范围试验中，本研究对纤维蛋白原的线性范围进行了评价。结果表明，测试项目的线性范围达到了试剂说明书标示的线性范围，各浓度的纤维蛋白原测定值和标准值之间有良好的线性关系，且涵盖了研究对象的测试范围，证明仪器的线性范围能够满足试验的需要。

在携带污染率试验中，本研究选取了凝

血酶原时间、活化部分凝血活酶时间及纤维蛋白原3项指标作为评价仪器携带污染的代表项目。结果表明，上述3项指标的高浓度样本对低浓度样本检测结果的影响均小于行业标准，证明仪器的自洁系统良好。

本研究通过对CA-510全自动凝血分析仪检测系统的各项性能的验证，初步建立了优化适用的CA-510全自动血凝分析系统，该系统具有快速、准确、稳定的检测特点，仪器性能验证过程按照CNAS相关文件要求及本实验室相关标准操作规程进行，符合标准化实验室的质量管理要求。

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[5]Clinical Laboratory Standards Institute.EP15-A3 User verification of precision and estimation of bias; approved guideline[S/OL].3rd ed.USA:CLSI,2014.

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,E-mail：ywx_21@qq.com。

10.3969/j.issn.1673-4130.2016.18.057

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1673-4130(2016)18-2642-03

2016-03-14

2016-05-25)