南海区5 988例女性患者宫颈HPV感染的现状研究

袁晓文,赵学峰,罗子源,邱　铨

(广东省佛山市南海区人民医院检验科　528200)



·临床研究·

南海区5 988例女性患者宫颈HPV感染的现状研究

袁晓文,赵学峰,罗子源,邱铨

(广东省佛山市南海区人民医院检验科528200)

目的研究妇科患者人乳头瘤病毒(HPV)感染的基因型、多重感染以及不同年龄段感染情况，为当地HPV感染流行病学研究和宫颈癌早期防治提供理论依据。方法运用凯普分子杂交基因芯片技术对5 988例女性患者宫颈脱落细胞进行HPV基因分型检测。结果5 988例标本中，HPV感染率13.63%，其中高危型感染率11.25%，低危型感染率1.04%，多重感染17.13%。不同年龄分组中，小于30岁组HPV感染率最高。结论年轻女性HPV的筛查对发现宫颈癌及癌前病变很有价值。

人乳头瘤病毒；基因分型；宫颈癌

宫颈癌是1种严重损害广大妇女健康和生命而且高发的恶性肿瘤，根据世界卫生组织统计分析，全世界每年确诊的新发病例约47万，死亡病例约21万。特别是发展中国家，其宫颈癌的发病率约占全球的80%，并且呈上升和年轻化趋势[1]。目前，筛查是防控宫颈癌的主要途径。近年来研究发现，人乳头瘤病毒(HPV)感染是导致宫颈癌及宫颈上皮内瘤变发生的重要因素，约99.7%的宫颈癌患者中存在HPV感染。近年来宫颈癌的防治研究中认为，高危型HPV持续感染是宫颈癌发生的必要条件[2-3]。因此，HPV检测也成为宫颈癌筛查的有效手段。目前已经分离出130多种HPV亚型，HPV是1种经性传播的病毒，流行病学资料显示，感染型别存在地区性差异。本研究通过对佛山市南海区5 988例女性宫颈脱落细胞进行HPV基因分型检测，了解南海区HPV亚型的分布，为该地区HPV感染的诊治和宫颈癌早期防治提供理论依据。

1　资料与方法

1.1一般资料收集2013年1月至2015年12月在本院妇科门诊就诊的女性患者5 988例为研究对象，年龄15～94岁，所有患者没有做过子宫切除手术，3 d内不使用阴道内药物或对阴道进行冲洗，24 h内不应有性行为。标本采集时不处于月经周期，除去复查患者。全部标本采集均由医生征得患者同意并承诺保护患者隐私。

1.2仪器与试剂核酸分子快速杂交基因分型检测系统，包括ABI7000核酸扩增仪由美国ABI公司生产，医用核酸分子快速杂交仪由凯普生物科技有限公司生产，HPV-DNA提取试剂盒、聚合酶链反应(PCR)扩增试剂盒及杂交试剂盒购自凯普生物科技有限公司。

1.3方法

1.3.1标本采集与处理所有患者均由妇产科医生以窥阴器或阴道扩张器暴露宫颈，用凯普公司配套专用宫颈刷至宫颈口，轻轻搓动宫颈刷，使其顺时针旋转5圈获得足够的上皮细胞，慢慢取出宫颈刷，将其放入标有患者编号的装有专用细胞保存液的取样管中，拧紧瓶盖，立即送检，如不能马上送检，请于4 ℃存放，并在2周内完成检测，应避免反复冻融。

1.3.2检测方法采用凯普生物科技有限公司生产的检测试剂盒进行样品DNA的提取、扩增和分型检测。凯普21种HPV分型检测包括高危亚型13种，即HPV16、HPV18、HPV31、HPV33、HPV35、HPV39、HPV45、HPV51、HPV52、HPV56、HPV58、HPV59、HPV68；中国人常见亚型3种，即HPV53、HPV66、CP8304；低危亚型5种，即HPV6、HPV11、HPV44、HPV42、HPV43；中国人常见亚型3种，即HPV53、HPV66、CP8304。所有操作严格按照仪器和试剂盒说明书进行，同时对结果进行判断。如出现2种或2种类型以上属多重感染，对多重感染者，各亚型阳性率重复计算。

1.4统计学处理所有数据采用Mirosoft Excel2003及SPSS18.0统计软件进行统计学分析，计数资料以例数或百分率表示，组间比较采用χ2检验，检验水准α=0.05，P<0.05为差异有统计学意义。

2　结　　果

2.15 988例女性宫颈细胞HPV感染率和基因型分布本研究的5 988例患者中，HPV感染数813例，总检出阳性率13.58%。21种HPV亚型均被检出，共检出HPV亚型974次，多重感染重复计数。高危型感染率13.21%(791/5 988),前5位的高危型由高到低依次为HPV16、HPV52、HPV58、HPV18、HPV39，分别占25.95%、21.40%、10.82%、7.50%、6.52%；低危型感染率为1.04%(62/5 988)，前3位低危型由高到低为HPV6、HPV11、HPV42，分别占2.58%、2.46%、1.48%。中国人常见型中，HPV53、HPV66和CP8304分别占5.78%、1.97%、9.59%。各种基因型分布见表1。

表1　　5 988例女性宫颈细胞HPV感染率和基因型分布

续表1　　5 988例女性宫颈细胞HPV感染率和基因型分布

2.2不同年龄段女性HPV感染情况将5 988例女性患者分6个年龄段进行分析，<20岁组的HPV感染率远远高于其他组(P<0.05)，感染率30.00%。其他组间两两比较，HPV感染率差异无统计学意义(P>0.05)，见表2。

表2　　不同年龄段女性HPV感染情况

2.3不同年龄段女性HPV亚型单一感染和多重感染状况在813例感染标本中，单一感染标本672例，占82.66%(672/813)；多重感染标本为141例，占17.13%(141/813)，以二重感染为主，共110例，占多重感染的78.57%，详见表3。

表3　　不同年龄段女性HPV亚型单一感染和

3　讨　　论

宫颈癌是全球女性比较常见的妇科恶性肿瘤之一，根据研究发现，我国每年约有13.5万新发宫颈癌病例，占全球1/3以上[4]。近年来，随着对宫颈癌病因学研究的不断发展，研究已证实高危型HPV持续感染是宫颈癌发生的必要条件，约99.7%的宫颈癌患者中存在HPV感染。因此，HPV检测也成为宫颈癌筛查的有效手段。本研究采用凯普导流杂交基因芯片技术对佛山市南海区5 988例女性宫颈HPV感染进行检测，发现HPV感染813例，感染率13.58%，感染率与李毅坚等[5]报道的感染率25.00%(252/1 008)有差异，这可能是由于研究选取的样本量不一致。

岑尧等[6]研究发现，HPV高危型别在我国不同地区及不同人群中的分布存在一定差异。中国HPV高危型分布分别是：HPV16、HPV52、HPV58、HPV33、HPV18型，其中HPV16和HPV52型是南方感染率最高的前2位型别。而北方则以HPV16和HPV58型最为常见，HPV16型是我国最为常见的感染型别。本研究中，HPV 21种亚型均被检出，感染率最高的前10位分别是HPV16(25.95%)、HPV52(21.40%)、HPV58(10.82%)、CP8304(9.59%)、HPV18(7.50%)、HPV39(6.52%)、HPV53(5.78%)、HPV33(5.29%)、HPV51(5.17%)、HPV68(4.43%)。这一结果与本地区的雷金菊[7]报道有一定程度的差异，可能是研究者所选的研究对象、研究标本数量以及研究方法之间存在一定程度的差异导致的。但是以HPV16、HPV52和HPV58为最主要感染亚型，与本地区的其他报道一致。

本研究显示，<20岁组的HPV感染率远远高于其他组，感染率30.00%，这可能和年轻女性性生活状况、生活习惯有关。所以，加强女性特别是年轻女性HPV筛查，以预防宫颈癌和宫颈癌前病的发生具有重要意义。HPV多重感染率在世界范围内的差异很大，本研究中，单一感染标本为672例，占82.66%(672/813)；多重感染患者141例，占17.13%(141/813)。

宫颈癌的发生和发展是1个由量变到质变，渐变到突变的病理过程，所以在癌前病变阶段能早发现、早诊治，是降低宫颈癌发病率和死亡率的有效方法。本研究通过检测初步得知，佛山市南海区女性HPV感染的现状与HPV型别分布状态，HPV感染的高峰是<20岁的人群，所以，要加强对该年龄段女性人群普及HPV感染相关知识，提高早期自我防护意识；同时也要做好HPV易感人群的监测和随访，定期检查，及时发现，及时治疗。

[1]Denny L.Cytological screening for cervical cancer prevention[J].Best Pract Res Clin Obstet Gynaecol,2012,26(2):189-196.

[2]Munoz N,Bosch FX,De Sanjose S,et al.Epidemiologic classification of human papillomavirus types associated with cervical cancer[J].N Engl J Med,2003,348(6):518-527.

[3]Trottier H,Burchell AN.Epidemiology of mucosal human papillomavirus infection and associated diseases[J].Public Health Genomics,2009,12(5/6):291-307.

[4]Michelli E,Téllez L,Mendoza JA,et al.Comparative analysis of three methods for HPV DNA detection in cervical samples[J].Investigación Clínica,2011,52(4):344-357.

[5]李毅坚，王堃成，袁健生，等．佛山市南海区妇女子宫颈人乳头状瘤病毒感染现状及相关因素分析[J]．现代医院，2011，11(12)：20-22．

[6]岑尧，张翠英，张雅丽，等．中国女性人乳头瘤病毒感染状况及高危型别分布的Meta分析[J]．癌症进展，2013，11(1)：75-81．

[7]雷金菊．佛山市1 638例女性HPV基因分型状况分析[J]．国际检验医学杂志，2013，34(3)：370-371．

10.3969/j.issn.1673-4130.2016.18.056

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1673-4130(2016)18-2640-02

2016-04-03

2016-06-29)