不同PCR方法对猪伪狂犬病原检出率的比较

2016-10-09陈光丽河南省新乡市动物疫病预防控制中心453003

当代畜禽养殖业 2016年9期

陈光丽　河南省新乡市动物疫病预防控制中心　453003

陈光丽河南省新乡市动物疫病预防控制中心453003

猪伪狂犬病是影响猪群健康的重要疾病，在猪群中的发病率很高。该病可引起妊娠母猪流产、死胎和公猪的繁殖障碍，仔猪神经症状及高死亡率。伪狂犬病毒的实验室诊断有普通PCR、实时荧光PCR及ELISA等。本文就普通PCR和实时荧光PCR在伪狂犬病原检测中的检出率做一比较论述。

1　材料与方法

（1）伪狂犬疑似病料。豫北某猪场11月初产房的多群2～3日龄仔猪出现腹泻症状，病仔猪皮肤发红，体温升高，精神不振，呕吐，逐渐消瘦，部分病猪有神经症状，出现发抖，后肢走路不稳，共济失调。使用抗生素治疗无效，病死率高达100％。采集病猪不同脏器、脑组织和肠内容物等，共10头份进行检测。

（2）主要试剂。伪狂犬病毒PCR检测试剂盒，购自北京世纪元亨动物防疫技术有限公司；伪狂犬病毒荧光PCR检测试剂盒，购自广州维伯鑫生物科技有限公司。

（3）方法。对病料的处理以及PCR扩增，参照试剂盒说明书进行。

2　结果

应用北京世纪元亨动物防疫技术有限公司伪狂犬病毒PCR检测试剂盒，对采集的病料进行病原学检测，结果见图1。

应用广州维伯鑫生物科技有限公司伪狂犬病毒荧光PCR检测试剂盒，对采集病料进行病原学检测，结果见图2。

3　结论

同批样品采用普通PCR检测伪狂犬病毒，10份样品中有3份阳性，阳性率为30％；采用荧光PCR检测，10份样品全为阳性，阳性率为100％。对比发现，荧光PCR方法较普通PCR有更高的灵敏性和准确性，而且操作更为简单快速，但是对实验要求也较高，容易污染，造成假阳性的发生，价格也较为昂贵。普通PCR则更为准确，而且PCR扩增产物可进行回收用于下一步研究分析。两种方法各有优缺点，在兽医临床中应配合使用，相得益彰。