气相色谱法测定辛芷滴鼻液中龙脑和异龙脑的含量

魏　莉，刘光斌肃州区疾病预防控制中心，甘肃 酒泉735000；2酒钢医院

气相色谱法测定辛芷滴鼻液中龙脑和异龙脑的含量

魏莉1，刘光斌2△
1肃州区疾病预防控制中心，甘肃 酒泉735000；2酒钢医院

目的：建立辛芷滴鼻液中龙脑和异龙脑的含量测定方法。方法：采用气相色谱法测定，DB-WAX色谱柱（30 m×0.53 mm，1.0μm），载气为氮气，分流比为10∶1，柱温为140℃，进样口温度为180℃，检测器温度为200℃。结果：龙脑和异龙脑分别在17.6～282.0、11.8～188.4μg/mL范围内呈良好的线性关系（r=0.999 9、r=0.999 9，n=6）；平均加样回收率分别为98.91%和99.45%（RSD为1.36%、1.53%，n=9）。结论：本法简便、准确、灵敏度高、重复性好，可用于辛芷滴鼻液的质量控制。

辛芷滴鼻液；气相色谱法；龙脑；异龙脑；含量测定

辛芷滴鼻液由辛夷、苍耳子、白芷、冰片、薄荷脑等5味药制成，具有祛风解表、宣通鼻窍、清热解毒和行气通络之功。对慢性鼻-鼻窦炎(Chronic rhinosinusitis，CRS)有良好的疗效［1］。其中冰片中含有的龙脑和异龙脑，均有抗菌和显著抑制大鼠蛋清性足跖肿胀作用；异龙脑对巴豆油耳廓肿胀亦有抑制作用，提示龙脑和异龙脑对液体的渗出和组织水肿等炎症过程有抑制作用［2］。为更好保证制剂质量，本研究采用气相色谱法［3-4］测定辛芷滴鼻液中的龙脑和异龙脑的含量，效果满意，现报道如下：

1　材料

1.1仪器6890型气相色谱仪(美国安捷伦公司，配FID检测器)；AUW120D型电子分析天平(日本岛津)；WP-UP-YJ-30沃特浦实验室专用超纯水机(四川沃特尔水处理设备有限公司)；TG16-W台式高速离心机(长沙维尔康湘鹰离心机有限公司)。

1.2试剂龙脑、异龙脑对照品(中国药品生物制品检定所，批号：110881-200706、111512-200802，供含量测定用)；辛芷滴鼻液和阴性制剂(酒钢医院提供，批号：20150316、20150317、20150318)；试剂均为分析纯；水为超纯水。

2　方法与结果

2.1色谱条件色谱柱：DB-WAX(柱长30m，内径0.53mm，膜厚度1μm)，柱温：140℃；载气流量(N2)：1.0mL/min(分流比：10∶1)；进样口温度：180℃；检测器温度：200℃；进样量为1μL。

2.2内标溶液的制备取水杨酸甲酯适量，精密称定，加环己烷制成每1mL含4mg的溶液，作为内标溶液。

2.3对照品溶液的制备分别称取干燥至恒重的龙脑和异龙脑对照品8mg、4mg，精密称定，置10mL量瓶中，加环己烷使溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取3mL，置25mL量瓶中，精密加入内标溶液1mL，加环己烷至刻度，摇匀，制成每1mL含龙脑96μg和异龙脑48μg的混合对照品溶液。

2.4供试品溶液的制备精密吸取辛芷滴鼻液5mL，置50mL具塞锥形瓶中，精密加入环己烷20mL，称定重量，超声处理10分钟(功率320W，频率40 kHz)，放冷，再称定重量，用环己烷补足减失的重量，摇匀，冷冻离心10分钟(4 000 r/min)，精密量取上清液10mL，置25mL量瓶中，精密加入内标溶液1mL，加环己烷至刻度，摇匀，即得。

2.5阴性样品的制备取辛芷滴鼻液阴性制剂，按“2.4”项下方法制备阴性对照溶液。

2.6系统适应性实验分别吸取阴性样品溶液、对照品溶液、供试品溶液各1μL，注入气相色谱仪。在“2.1”项色谱条件下，供试品中异龙脑和龙脑所对应的峰保留时间与对照品峰保留时间一致(16.4、18.4分钟)，而阴性样品无干扰，各峰与邻近峰达到基线分离，分离度良好(R＞1.5)，见图1。

图1　对照品、供试品及阴性样品色谱图

2.7线性范围分别称取干燥至恒重的龙脑和异龙脑对照品7.05、4.71mg，精密称定，置10mL容量瓶中，加环己烷溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品贮备溶液。精密吸取对照品贮备溶液4.0、2.0、1.5、1.0、0.5、0.25mL，分别置10mL容量瓶中，精密加入内标溶液1mL(浓度为4.012mg/mL)，加环己烷至刻度，摇匀。分别精密吸取上述对照品溶液各1μL，依次注入气相色谱仪中，按“2.1”项下色谱条件测定。以对照品浓度与内标溶液浓度之比(X)为横坐标，对照品峰面积与内标峰面积之比(Y）为纵坐标进行线性回归，得出龙脑回归方程为：Y=3.126 5X+0.012 4，r=0.999 9(n=6)，异龙脑回归方程为：Y=2.871 5X-0.010 6，r=0.999 9(n=6)。结果表明，龙脑和异龙脑分别在17.6～282.0μg/mL 和11.8～188.4μg/mL浓度范围内呈良好的线性关系。

2.8精密度实验同一供试品溶液，连续进样6次，1μL/次。测得龙脑和异龙脑含量的RSD分别为0.67%、1.05%，表明该方法精密度良好。

2.9稳定性实验同一供试品溶液，分别于0、3、6、9、12、18、24小时各进样1μL，测得龙脑和异龙脑含量的RSD分别为1.02%、1.45%，表明供试品溶液在24小时内稳定。

2.10重复性实验取同一批号辛芷滴鼻液(批号：20150316)6份，分别按“2.4”项下供试品溶液的制备方法制备；精密吸取上述溶液各1μL，注入气相色谱仪，依法测定；测得供试品中龙脑含量平均值为3.54 mg/mL (RSD=0.66%)，异龙脑含量平均值为2.34mg/mL(RSD=1.12%)，结果表明该方法的重复性较好。

2.11准确度实验以加样回收率考察准确度。精密量取已知含量的辛芷滴鼻液(批号：20150316)9份，每份2mL，分别置于50mL具塞锥形瓶中，分为3组，每组3份。精密量取“2.7”项下对照品贮备溶液8.0、10.0、12.0mL各3份，用氮气吹干仪吹干后分别加入上述3组辛芷滴鼻液样品中，使得低、中、高浓度对照品加入量与所取供试品待测定成分量之比控制在0.8∶1，1∶1，1.2∶1左右［5］，按“2.4”项下供试品溶液的制备方法操作测定，计算加样回收率，结果见表1—2。

表1　龙脑加样回收率实验结果

表2　异龙脑加样回收率实验结果

2.12样品测定取3批辛芷滴鼻液(批号：20150316、20150317、20150318)，按上述含量测定方法测定龙脑和异龙脑含量，结果见表3。

表3　样品的含量测定结果　m g/m L

3　讨论

3.1提取方法的选择由于本品为脂溶性基质，无水乙醇不能将基质分散，导致测定成分无法溶解出，故在无水乙醇溶液中未能检测出龙脑和异龙脑。在实验设计时对提取溶剂环己烷和乙酸乙酯进行了对比，发现环己烷的提取效果明显优于乙酸乙酯，故选择环己烷作为提取溶剂。实验发现，超声处理后，若采用滤过的方式，则由于基质附在滤纸上导致速度极慢。鉴于龙脑和异龙脑的挥发性，故采用冷冻离心的方式比较方便。

3.2色谱柱及进样量的选择考察了极性柱(DB-WAX)的不同固定液膜厚度、不同内径与弱极性柱(DB-17)对样品测定的影响。结果发现弱极性柱(DB-17)在相同柱温条件下色谱峰分离效果欠佳，而极性柱(DB-WAX)的色谱峰峰形良好，分离也能达到要求。故选择极性柱DB-WAX(30m×0.53mm，1.0μm)作为测定用色谱柱。由于本品为油性基质，过多注入气相色谱仪会造成仪器的污染，故选择进样量为1μL，分流比为10∶1。

3.3内标物的选择水杨酸甲酯和萘两种内标物对样品中龙脑和异龙脑峰均无干扰，但考虑到萘具有致畸、致癌、致突变作用，故选用水杨酸甲酯作为内标物。

本实验分别对冰片中2种主要成分进行了分析，结果表明本方法简便、准确、灵敏度高、重复性好，可作为辛芷滴鼻液的质量控制方法。

［1］ 王萍，刘光斌，代得银.辛芷滴鼻液对慢性鼻-鼻窦炎患者的疗效观察［J］.航空航天医学杂志，2015，26（3）：267-269.

［2］ 江光池，杨胜华，冯旭军.龙脑和异龙脑的抗炎作用［J］.华西药学杂志，1990，5（3）：190-191.

［3］ 刘莉莉，秦建平，杨素德，等.GC法测定痛宁凝胶中冰片和薄荷脑的含量［J］.中国药科大学学报，2014，45（1）：76-78.

［4］ 朱静，贾晓斌，郑智音，等.气相色谱法测定透骨灵橡胶膏中樟脑、冰片和薄荷脑的含量［J］.中国医院药学杂志，2012，32（11）：831-833.

［5］ 国家药典委员会.中华人民共和国药典：四部［M］.北京：中国医药科技出版社，2015：375-376.

Determ ination ofBorneoland Isoborneol in XinZhi NasalD ropsby GasChrom atography

WEILi1，LIU Guangbin2△
1 Suzhou District Center for Disease Control and Prevention，Jiuquan 735000，China；2 Jiugang Hospital

Objective：To establish content determ ination method of borneol and isoborneol in XinZhi nasal drops.Methods：Gas chromatography was adopted to detectDB-WAX chromatographic column （30m×0.53mm，1.0μm），carrier gaswas nitrogen，split ratio 10：1，column temperature 140℃，inlet temperature 180℃and detector temperature 200℃.Results：Borneoland isoborneolshowed better linear relationship in the rangesbetween 17.6 and 282.0，11.8 and 188.4μg/m L（r=0.999 9，r=0.999 9，n=6）；average recovery rateswere 98.91%and 99.45%respectively（RSD=1.36%，1.53%，n=9）.Conclusion：Themethod，simple，accurate，high sensitivity and good reproducible，could be used forquality controlof XinZhi nasaldrops.

XinZhi nasaldrops；gaschromatography；borneol；isoborneol；contentdeterm ination

R284.1

A

1004-6852（2016）07-0031-03

2016-02-28

魏莉（1973—），女，主管药师。研究方向：医院制剂。

刘光斌（1970—），男，主任药师。研究方向：医院制剂。