何首乌与白首乌的鉴别实验研究
2016-09-20魁学刚马孝龙喇凤英
魁学刚 马孝龙 喇凤英
何首乌与白首乌的鉴别实验研究
魁学刚马孝龙喇凤英
何首乌和白首乌均为常用的抗衰老滋补强壮类中药。由于功效、名称相近,药材市场上经常会发生相互混淆的现象。为确保用药的安全有效,需要对其进行鉴别研究。本实验就对药材市场上收集的何首乌和白首乌样品,建立性状、显微以及理化的鉴别方法。
何首乌;白首乌;鉴别;来源;性状
何首乌始载于《开宝本草》,谓“何首乌……根大如拳,有赤、白两种”。可见何首乌有赤、白两种。白首乌与何首乌为不同科属来源的两种植物性药材,其功效、应用也不尽相同。本研究对何首乌和白首乌的来源、药材性状、显微特征及理化性质进行了比较鉴别。现报告如下:
1 材料与方法
1.1实验材料在中药材专家的指导下从临夏州中药材商会处获得何首乌(Polygonum multiflonum Thunb)与白首乌(Cynanchum auriculatum Royle ex Wight)[1]的干燥块根各2块,共计2630g。
1.2性状鉴别观察二者的形、色、表面、质地、断面、味道等性状,并记录结果。
1.3显微鉴别选取药材适当部位,经软化后切成10~20μm的薄片,甘油醋酸试液(北京华科盛精细化工产品贸易有限公司)处理后在显微镜(CX31,奥林巴斯)下观察。
1.4理化试验各取两种药材500g,分别用RT-02高速粉碎机粉碎,过四号筛,备理化检验用。微量升华:取金属片,置具圆孔(直径2cm)的石棉板上,金属片上放一小金属圈(高度约0.8cm),对准石棉板上的圆孔,圈内加入药材粉末一薄层,圈上放一载玻片。在石棉板下圆孔下用酒精灯徐徐加热(火焰距板约4cm)数分钟,至粉末开始变焦,去火待冷,则有结晶状升华物附着玻片。将玻片取下反转,在显微镜下观察结晶形状。Borntrager反应(蒽醌类化合物反应):取药材粉末少许,置小试管中,加水1~2ml,加浓H2SO42~3滴,置水浴中加热10分钟,冷却,加乙醚1~2ml振摇。用吸管吸取醚液(黄色)于另一洁净试管中,加入NaOH试液1ml振摇,则醚层应褪为无色,碱层(下层)为红色,示有蒽醌类成分存在。与金属离子反应:取何首乌与白首乌粉末0.5g,加乙醇2ml冷浸1h,取滤液2滴滴在滤纸上,加三氯化锑氯仿饱和液1滴,干后紫外灯下365nm处观察。薄层分析(TLC):①供试液制备:取何首乌、白首乌各约2g置于试管,分别加甲醇20ml,冷浸过夜,滤过,滤液置水浴上蒸干,残渣加5%氢氧化钠溶液5 ml使溶解,移入分液漏斗中,加盐酸酸化,用醋酸乙酯10ml提取,分取醋酸乙酯层,作为供试品溶液;②对照液制备:另取大黄素甲醚,大黄素对照品,加甲醇制成每1ml各含1mg的混合溶液,作为对照品溶液。③薄层板:硅胶G加0.5%氢氧化钠溶液自制板;厚度300μm;④点样:供试品溶液与对照液分别点样5ul;⑤展开剂:甲苯一醋酸乙酯-甲酸(15:2:1)。⑥展开方式:展开箱用展开剂预平衡15分钟;上行展开:展距:7cm。⑦显色:置紫外光灯(365nm)下检视:再置氨蒸气中熏数分钟后,日光下检视。⑧色谱识别:供试品色谱中,存与对照药材色谱相应的位置上,显相同的橙红色荧光斑点(下,大黄素)及橙黄色斑点(上,大黄素甲醚);氨熏后,斑点日光下变为红色[2]。
作者单位:731605甘肃 临夏,永靖县三塬镇中心卫生院药剂科(魁学刚);731100甘肃 临夏,临夏州疾控中心药剂科(马孝龙);731100甘肃 临夏,临夏州药检中心药剂科(喇凤英)
2 结果
2.1性状鉴别何首乌、白首乌形色、表面、质地、断面、味具体差异见表1。
2.2显微鉴别何首乌根横切面,在显微镜下主要特征是韧皮部较宽,有异常维管束,中央维管束形成层呈环状,而白首乌无此特征。
2.3理化鉴别①微量升华:何首乌得黄色柱状或针状结晶,遇碱液显红色,而白首乌无升华物。②Borntrager反应:何首乌醚层显黄色,白首乌不显黄色。乙醚层加氨试液后,何首乌氨液层显红色,白首乌不显红色。③与金属离子反应:在紫外灯下365nm处观察,何首乌呈亮紫色荧光,白首乌呈灰绿色荧光。④薄层分析:日光下,何首乌呈现三个斑点,从上至下颜色分别为淡黄,淡黄,蓝绿;白首乌呈现四个斑点,从上至下颜色均为墨绿色。喷以香草醛-浓硫酸显色试剂,加热显色后,何首乌呈现三个斑点,从上至下颜色分别为淡黄,淡黄,红色;白首乌呈现五个斑点,从上至下颜色分别为淡黄,墨绿,墨绿,墨绿,淡黄。见表2。
表1 何首乌与白首乌药材性状鉴别比较
3 讨论
表2 何首乌与白首乌的理化鉴别比较
何首乌与白首乌在来源、性状、显微、理化等方面各有不同,所以在性能、功效方面也存在显著差别。通过四个理化实验,证实何首乌中含有蒽醌成分,是何首乌抗衰老、增强免疫力、抗菌、调血脂等药理作用的主要有效成分之一[1,2],而白首乌不含蒽醌。通过薄层色谱分析可得:何首乌主含蒽醌衍生物,为大黄酚、大黄素,大黄酸、大黄素甲醚、大黄酚蒽酮,此外,尚含二苯乙烯苷,卵磷脂。因其含蒽醌类,所以可以遇碱蒽醌的共轭结构会显色,与白首乌区别。在实验过程中我们发现,在做薄层色谱的预试验时,我们尝试了各种展开剂显色剂,均因斑点拖尾而失败。当展开剂为氯仿-甲醇(4∶1)显色剂为磷钼酸时,白首乌只展开两个点,何首乌有四个点,但是有拖尾。当展开剂为正丁醇-乙醇-水(6.5∶1.5∶2),显色剂为磷钼酸时,何首乌白首乌均没有展开,只在原点有一个点,证明展开剂的极性还是不够,还需加大极性。当展开剂为氯仿-甲醇-水(7∶3∶0.5),显色剂为香草醛时,何首乌有四个红色斑点,其中三个连在一起,拖尾;白首乌三个斑点,两个拖尾在一起。还需调节展开剂极性,以观察结果。当提取液用氯仿萃取后,氯仿-甲醇(10∶1)展开,香草醛显色,结果为,何首乌三个点,有拖尾,白首乌两个点,分离的很开,说明10∶1的展开剂对白首乌很合适,但可能还有些成分叠在一起,没分开,结合何首乌的情况来看,用氯仿萃取效果并不是很好。
总之,何首乌与白首乌是分属两科的两种不同植物的块根,其在形状与功效主治上具有很大的相似性,但在临床应用时应当区分开来,它们在疾病的治疗中各具特色,何首乌无法完全取代白首乌的地位。白首乌仍具有极大的应用价值,许多新的功效具有很大的研究潜力和非常广阔的应用前景[3]。
[1]Li J B,Lin M.Studies on the chemical constituents of Polygonum multiflorum Thunb[J].Chin Tradit Herb Drugs,1993,23(5):115-118.
[2]Wei P F,Jiao C L,Chen D D.The advance of the pharmacological research on Polygonum multiflorum Thunb[J].Mod Tradit Chin Med,2004,15(1):57-58.
[3]王军强,吴波,王军牙.何首乌、赤首乌与白首乌的鉴别[J].长春中医学院学报,2004,20(1):24-25.
A
1004-2725(2016)03-0228-03
魁学刚,E-mail:945174350@qq.com