阿奇霉素对大鼠胃排空及胃动素浓度影响的研究

张梅　董湘玉

阿奇霉素对大鼠胃排空及胃动素浓度影响的研究

张梅董湘玉

目的：观察大鼠用不同剂量阿奇霉素灌胃后，胃排空时间及血浆胃动素浓度的变化，探讨阿奇霉素致胃肠道症状的可能机制。方法：80只SD大鼠随机分为10组，对照组、小剂量1 d组、小剂量3d组、小剂量6d组、中剂量1d组、中剂量3d组、中剂量6d组、大剂量1d组、大剂量3d组、大剂量6d组；观察组大鼠用阿奇霉素灌胃，小剂量组、中等剂量组、大剂量组分别为3mg/100g、6mg/100g、12mg/100g。所有大鼠先用SPECT行胃排空检测，试餐为含有99mTc-DTPA的牛奶，用专用软件分析原始数据，得到全胃半排时间（GET1/2）、50min末残留率、胃排空曲线。胃排空检测结束后，经腹主动脉采集动脉血2ml，运用放免法测定血浆胃动素浓度。结果：小剂量组、中剂量组、大剂量组全胃半排时间明显缩短，与正常对照组（64.21±7.24）min比较，差异有统计学意义，P＜0.05。组内不同时间点比较无统计学意义，P＞0.05。观察组血浆胃动素浓度，小剂量组与正常对照组比较无统计学意义，P＞0.05；中剂量组、大剂量组与正常对照组比较明显增高，差异有统计学意义，P＜0.05。结论：阿奇霉素可促进胃排空。阿奇霉素促进胃排空的机制可能为小剂量下仅为胃动素样作用；中剂量、大剂量时除胃动素样作用外，有内源性胃动素参与。

阿奇霉素；大鼠；胃排空；胃动素

阿奇霉素是治疗支原体肺炎的一线用药，因其具有抗菌谱广、组织浓度高、体内分布广、半衰期长、无须皮试等优点在临床上得到了广泛应用，但在使用过程中，患者胃肠道反应强烈，直接影响了该药的继续使用，甚至患者中断用药［1］。研究阿奇霉素致胃肠道反应的机制及防治措施显得尤为重要。已有的资料显示，大环类脂类药物有胃动素样作用，需要研究人员思考的是胃排空的改变是单纯由阿奇霉素引起的、还是因为肠激素参与了这种改变。核素胃排空检测是目前测定胃动力的经典方法；胃动素是胃肠激素中影响胃肠动力的主要因素之一。本研究通过测定服用不同剂量阿奇霉素、不同时间段大鼠核素胃排空、血浆胃动素含量，进一步证实阿奇霉素对胃排空的影响，以及这种影响与胃动素含量改变的关系。

1　材料与方法

1.1动物80只wistar大鼠，体重（180±20）g，雌雄不限，甘肃省中医学院实验动物中心提供，许可证号：SCXK（甘）2011-0001。普通实验室饲养，自由进水、饮食。

1.2药品与试剂99Mo-99mTc发生器（北京原子高科有限公司）、亚锡噴替酸标记药盒（江苏原子能研究所）、胃动素放免试剂盒（上海安研医学试剂有限公司）、阿奇霉素（0.125g）（东北制药集团沈阳第一制药有限公司）。

1.3主要设备单光子发射型计算机断层扫描仪（SPECT）（美国GE公司）、SN-695B型智能放免γ测量仪（上海日环仪器）、TD25-WS多管架自动平衡离心机（湖南长沙湘仪离心机有限公司）、三洋-20℃低温冰箱（日本三洋公司）。

1.4实验模型建立与分组将80只体重为（180±20）g 的wistar大鼠按随机数字表法分为10组：对照组（8只）；小剂量1天组（8只）、小剂量3天组（8只）、小剂量6天组（8只）；中剂量1天组（8只）、中剂量3天组（8只）、中剂量6天组（8只）；大剂量1天组（8只）、大剂量3天组（8只）、大剂量6天组（8只）。所有动物均适应性喂养1周。对照组：适应性喂养1周后行胃排空检测；胃排空检测结束后立即采取动脉血2ml。实验组：所有实验组大鼠均给予阿奇霉素灌胃，采取不同剂量、不同时间段进行相关实验，即先进行胃排空实验，后采取动脉血。

投药量计算［2］：根据人和鼠给药剂量换算公式dB= dA*RB/RA*（WA/WB）*1/3，阿奇霉素人类使用剂量为10mg/kg，换算为大鼠用药剂量为60 mg/kg，即6 mg/100g。实验中AM剂量分别约相当于人抗感染等效剂量的0.5、1、1.5和2.5倍。将不同剂量组的大鼠分别在阿奇霉素灌胃后第1天、第3天、第6天进行实验。

1.5放射性核素胃排空实验所有实验大鼠在检查前24小时禁食、不禁水，清除垫料。将新鲜的高锝酸盐淋洗液标记的99Tc-DTPA加入牛奶，充分搅匀，实验餐放射性活度为1mci/ml，5ml针管抽取实验餐1ml灌胃，灌胃后立即将大鼠仰卧位固定在特殊装置上，固定完成后将大鼠头朝里置于SPECT检查床上，大鼠在探头中心视野区。分别于0、5、10、15、20、25、30、35、40、45、50min用单光子发射型计算机断层仪行腹部静态平面显像，共11帧。SPECT探头配置低能平行孔准直器，采集条件为：ZOOM 1.5、矩阵128×128、时间30秒。图像采集完成，目测法勾画全胃感兴趣区（region of interesting，ROI），用胃排空专用软件进行数据处理，获得全胃时间—放射性曲线、全胃半排时间（half gastric emptying time，GET1/2）等参数。

1.6放免法测定血浆胃动素同期对照组、实验组大鼠共80只，放射性核素胃排空检测结束后，开腹暴露腹主动脉，5ml针管穿刺腹主动脉，采取动脉血2ml，将动脉血加入含有7.5%EDTA二钠30μl和抑肽酶40μl的聚苯乙烯试管内，混匀，静置2小时后放入离心机管架内，3000转/min，10min，取上清液，将装有上清液的子弹头试管放入-20℃冰箱内备用。实验前24小时将标本放在4℃冰箱冷藏，实验前2小时将标本取出。再次3000转/min，10min，取上清液。采用酶联免疫法测定血浆motilin的含量，严格按照说明书步骤操作。

1.7统计学处理采用SPSS17.0统计软件进行数据处理。P＜0.05为差异有显著性意义。

2　结果

2.1各组大鼠全胃半排时间对照组全胃半排时间是（54.48±12.08）min，小剂量组（小剂量组vs对照组，t=2.910，P＜0.05）、中剂量组（中剂量组vs对照组，t= 2.781，P＜0.05）、大剂量组（大剂量组vs对照组，t= 3.484，P＜0.05）胃排空明显加快，与对照组比较，半排时间缩短，差异有统计学意义；观察组组内不同时间段全胃半排时间比较，差异无统计学意义，P＞0.05。结果提示，阿奇霉素可促进胃排空，促进胃排空能力随剂量增加而增加；在同一剂量下，排空能力未见改变。见表1。

2.250min末胃残留率比较对照组50min末胃残留率为（44.51±7.43）%，小剂量组（小剂量组vs对照组，t= 3.474，P＜0.05）、中剂量组（中剂量组vs对照组，t= 2.327，P＜0.05）、大剂量组（大剂量组vs对照组，t= 2.681，P＜0.05）胃残留率明显降低，与对照组比较，差异有统计学意义；观察组组内不同时间段胃残留率比较，无统计学意义，P＞0.05。见表1。

表1　各组全胃半排时间及50分钟末残留率和胃动素浓度

2.3胃排空曲线胃排空曲线是以时间（min）为横坐标、以不同测定点胃内放射性计数与即可放射性计数百分比为纵坐标。观察时间点放射性计数百分比越低提示胃排空能力更强、排空速度更快。本研究中，除第1次（即刻）采集点外，所有观察组各时间点胃内放射性计数百分比明显低于对照组，直观提示观察组胃排空加快。见图1。

图1　各组胃排空曲线

2.4各组大鼠血浆胃动素比较对照组血浆胃动素为（64.21±7.24）ng/L，小剂量1d、3d、6d胃动素含量分别为（67.84±7.63）ng/L、（60.15±10.28）ng/L、（66.80± 9.05）ng/L，与对照组比较，无统计学意义，P＞0.05；中剂量组（中剂量组vs对照组，t=4.073，P＜0.05）、大剂量组（大剂量组vs对照组，t=3.965，P＜0.05）不同时间段血浆胃动素水平明显增高，与对照组比较，差异有显著性。

2.5全胃半排时间（GET1/2）与血浆胃动素相关性分析全胃半排时间（GET1/2）与血浆胃动素浓度呈负相关，r=-0.785，P＜0.01。即血浆胃动素浓度越高，胃排空越快。结果证实阿奇霉素可通过提高血浆胃动素浓度，加快胃排空。

3　讨论

胃是消化系统的重要组成部分，具有储存食物、消化食物、分泌胃肠激素的功能。目前认为，胃可分为近端胃、胃中间横带、远端胃，不同区域在食物排空的不同阶段发挥着特殊功能［3］。Indireshkumar等［4］提出了“蠕动泵”和“压力泵”的概念，胃排空与平滑肌的收缩力、幽门的阻力以及幽门与十二指肠运动的协调性有紧密关系。在生理状态下，液体通过压力差排空，而固体、半固体主要通过胃窦的蠕动和十二指肠运动的协调性排空。中枢神经系统、胃肠激素、胃动素受体激动剂、食物成分、食物形态及食物颗粒大小均能影响胃排空速度。阿奇霉素为大环内酯类抗生素，研究认为有促胃排空作用，这一作用过程中是否有内源性胃动素参与，是本研究的重点。

本研究中，不同剂量组阿奇霉素均可引起胃排空增快，与对照组比较，差异有显著性（P＜0.05）。与李娟等［5］的研究结果一致，研究人员对大鼠按不同剂量阿奇霉素灌胃，用酚红测定胃排空率，研究发现不同剂量组胃排空均较对照组排空加快。李静等［6］认为阿奇霉素可通过增加胃内压促进胃排空，同时具有剂量依赖性，大剂量作用出现时间早，作用效应更强。阿奇霉素与红霉素同属大环内酯类，其促进胃排空的机理一致。董燕平［7］的研究结果发现，大环内酯类可改变胃电节律，通过提高胃电频率、增高幅值促进胃肠运动，促进作用呈量效关系，小剂量下可诱发IMCⅢ相，剂量增加后可致胃肠平滑肌强烈收缩，引起恶心、呕吐等不适。但胃排空时间的缩短与血浆胃动素的升高并不同步，在本研究中，小剂量下全胃半拍时间较对照组缩短，分别（54.48±12.08）min、（42.54±5.21）min、（41.37±6.43）min、（43.09±8.77）min，差异有统计学意义，P＜0.05；而同期血浆胃动素浓度并未见改变，（64.21±7.24）ng/L、（67.84±7.63）ng/L、（60.15±10.28）ng/ L、（66.80±9.05）ng/L，P＞0.05，差异无统计学意义。中剂量、大剂量组，胃动素变化明显，与对照组比较，差异有显著性，P＜0.05。提示阿奇霉素促进胃排空的作用，在小剂量下仅为胃动素样作用，剂量增大以后，除胃动素样作用外，也有内源性胃动素参与。

胃动素受体激动剂研究显示［8］，胃动素受体激动剂影响了食管、管道下段括约肌及胃动力，增加了胃内压力，大剂量时食管运动功能紊乱，出现低振幅及收缩能力下降。研究［9］显示红霉素可以改善糖尿病胃轻瘫和胃排空障碍，红霉素增加了低位食管压力，抑制了餐后的胃食管反流［10］。胃动素受体激动剂可以明显加速胃排空，胃动素受体激动剂引发的是不规则的强烈的持续时间长的胃窦收缩［11］，这不同于胃窦规律的收缩。

综上所述，阿奇霉素可促进胃排空，促进胃排空的作用与剂量大小有关；中剂量、大剂量阿奇霉素可改变血浆胃动素浓度；阿奇霉素促进胃排空的作用于血浆胃动素浓度的改变不同步，小剂量下仅为胃动素样作用；中剂量、大剂量时，除了胃动素样作用外，可能内源性胃动素的作用更明显。

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Effects of Azithromycin on gastric empting and plasma motilin in rats

Zhang Mei1，Dong Xiangyu2.1.Department of Pediatrics，General Hospital of Lanzhou Petrochemical，Lanzhou 730060，China；2.Department of Pediatrics，the Second Hospital of Lanzhou University，Lanzhou 730030，China

Objective:To investigate the effects of azithromycin on gastric emptying and plasma motilin in rats，thus exploring mechanism of azithromycin to Gastrointestinal Symptom.Methods:There were 10 groups randomly dividing in eighty Sprague-Dawley（SD）rats，i. e，the normal control group，small doses 1 day group，small doses 3 day group，small doses 6 day group，middle doses 1 day group，middle dos-es 3 day group，middle doses 6 day group，large doses 1 day group，large doses 3 day group，large doses 6 day group，8 in each group.The rats of observer groups were gastrogavaged by azithromycin.The dosage were 3mg/100g，6mg/100g and 12mg/100g，respectively.First，gastric emptying was measured in unanesthetized rats by single photon emission computed tomography（SPECT）after gavaged milk loaded with technetium-99m diethylenetriamine pentaacetic acid（（99m）Tc-DTPA），the gastric half-emptying time were calculated.Subsequently，blood was collected from the abdominal aorta to measure plasma motilin.Results:GET1/2 were more significantly decreased in observer groups than in control groups.There was no significant in concentration of motilin in small dose groups compared to control groups.The plasma motilin of latter groups were significantly increased compared to control groups，P＜0.05.Conclution:Azithromycin could promote gastric emptying.Not only motilin-like effection，but also endogenous motilin participation took part in the mechanisms of promoting gastric emptying.

作者单位：730060甘肃 兰州，兰州石化总医院内科（张梅）；730030甘肃 兰州，兰州大学第二医院儿科（董湘玉）

Azithromycin；rats；gastric emptying；motilin

A

1004-2725（2016）03-0165-04

张梅，E-mail:2050141944@qq.com