黏菌素药敏试验综述

黏菌素药敏试验综述

由于黏菌素的聚阳离子特性导致其对有机和无机材料都有不同程度的黏附性，因而在药敏试验过程中游离黏菌素浓度减低。吐温-80（P-80）是一种应用于微量板的表面活性剂，能够影响游离的黏菌素浓度从而降低黏菌素的MIC值。

本研究评估不同微量板及添加吐温-80对测定黏菌素MIC的影响。受试菌株共146株，包括56株铜绿假单胞菌、 29株不动杆菌属细菌和61株肠杆菌科细菌。MIC测定采用两种聚苯乙烯的96孔微量板（MTTs），一种是未包被的V型底MTTs （NMTTs；costar 3896； Corning， NY， USA）， 另一种是经过包被用于组织培养的U型底MTTs （TCMTTs； costar 3799； Corning）。药敏方法采用CLSI推荐的肉汤稀释法，黏菌素为其硫酸盐，肉汤中接种后菌液浓度为5×105CFU/mL，添加吐温-80后终浓度为0.002%，所有试验均进行3次，质控菌株为铜绿假单胞菌ATCC 27853，质控结果均在CLSI列出的参考范围中。

表1　黏菌素对146株临床分离株的MIC值的分布

表1中列出了两种微量板添加和不加吐温-80所得MIC结果，取几何平均值后进行统计分析，未包被的NMTTs测得的MIC（0.54±0.58） mg/L较包被过的TCMTTs测得的MIC（2.84±1.93）mg/L明显偏低，差异有统计学意义（P＜0.000 1；95%CI为-2.5～-2.1）。TCMTTs内表面带负电荷，会吸附黏菌素，使得游离的黏菌素浓度降低，从而导致测得的MIC比使用NMTTs时高5.3倍，对铜绿假单胞菌、肠杆菌科细菌、鲍曼不动杆菌的MIC值分别各升高3.2、5.4和9.4倍。添加吐温-80后NMTTs所测得MIC（0.09±0.09 mg/L）降低，差异有统计学意义（P＜0.000 1；95%CI为0.4～0.5）。添加吐温-80后TCMTTs所测得MIC （2.3±1.5）mg/L降低了1.24倍，差异也有统计学意义（P＜0.001；95% CI为 -0.31～-0.75）。加吐温-80后TCMTTs比NMTTs所测得的MIC高出25.6倍，未加吐温-80前仅增加5倍，加吐温-80后两者差异更为显著，并具有统计学意义（P ＜0.000 1；95% CI为-2.35～-2.1）。

由此可见，黏菌素的MIC受微量板特性的影响很大，添加吐温-80也可以显著降低各种微量板所测得的MIC。 最近一项研究使用微量稀释法、E试验法、琼脂稀释法测定黏菌素对50株多重耐药革兰阴性杆菌的MIC，结果发现添加吐温-80使得MIC值变异很大。当前在细菌耐药性越来越严峻的形势下，黏菌素势必会更广泛地被应用于临床。可以预见其耐药性也会随之上升。回顾黏菌素的MIC测定方法很有必要。

ALBUR M， NOEL A， BOWKER K， et al. Colistin susceptibility testing： time for a review. J Antimicrob Chemother， 2014，69（5）：1432-1434.

杨 洋摘译 朱德妹审校

Colistin susceptibility testing: time for a review

2015-04-29