多重耐药鲍曼不动杆菌对不同成分手消毒剂敏感性研究

2016-09-10吴菲

护理研究 2016年20期

吴　菲

吴菲

[目的]探讨多重耐药鲍曼不动杆菌对成品手消毒剂的敏感性，为临床使用提供依据。[方法]采用消毒剂对细菌杀菌效果及最低抑菌浓度(MIC)的检测方法，评估多重耐药鲍曼不动杆菌对3种成品手消毒剂的敏感性。[结果]3种手消毒剂对多重耐药鲍曼不动杆菌杀菌效果为100%。对多重耐药鲍曼不动杆菌的有效稀释比从高到低依次是：正丙醇和乙醇成分、氯己定和乙醇成分、季铵盐类成分其MIC分别为：0.17%和1.02%，0.03%和2.35%，0.03%。[结论]3种手消毒剂可以控制多重耐药菌株的传播，但抑菌作用以正丙醇和乙醇成分的手消毒剂最好。

鲍曼不动杆菌；多重耐药；手消毒剂；敏感性

鲍曼不动杆菌(Acinetobacter baumannii，Ab)是非发酵、需氧的革兰阴性杆菌，它广泛分布于医院环境中，是医院重要的致病菌。近年来，院内抗生素的大量使用，鲍曼不动杆菌出现了耐药、多重耐药情况。迟细俤等[1]曾报道住院病人鲍曼不动杆菌感染者中多重耐药菌株感染分离率为31.36%，重症监护室和神经外科的分离率则高达60%。耐药菌株在临床检出率逐年增加，大量使用抗生素增加了多重耐药鲍曼不动杆菌(MDR-Ab)定植。抵抗力弱或有创伤的病人可通过医护人员的手或消毒不彻底的医疗器械获得感染[2]。鲍曼不动杆菌的院内传播主要是医护人员手的传播，加强手卫生管理成为减少院内感染的必要手段。有文献报道， MDR-Ab对湿热、紫外线及化学消毒剂表现出更强的抵抗力。目前，控制接触传播的有效消毒制剂之一为手消毒剂，其产品检验常规为院内常见的化脓性球菌、肠道致病菌和致病性酵母菌等的杀菌效果测定[3]。针对成品手消毒剂MDR-Ab的消毒效果评价未见报道。为探求MDR-Ab是否存在对成品手消毒剂耐药而产生院内传播的问题，现取市场上常见的3种手消毒剂进行试验。

1　材料与方法

1.1材料

1.1.1菌株来源试验菌株为2014年3月—2015年2月从本院南、北、东3个院区住院病人尿液、痰液、脓液标本中分离所得。同一病人同一部位多次分离的菌株未重复计入，共计30例。试验标准菌株：金黄色葡萄球菌ATCC25923、大肠埃希菌ATCC25922、鲍曼不动杆菌ATCC19606、铜绿假单胞杆菌ATCC27853。

1.1.2仪器及试剂自动细菌测定仪(西门子walkaway96)、生化鉴定试剂、中和剂、手消毒剂等。手消毒剂：①季铵盐成分(安立久牌手部皮肤消毒液)。有效成分为单、双烷基甲基复合季铵盐，浓度为0.14%～0.17%。上海九誉生物科技有限公司第一分公司生产，批号:20140516。②正丙醇和乙醇成分(洁芙柔消毒凝胶)。有效成分为正丙醇9%～11%，乙醇54%～66%。上海利康消毒高科技有限公司生产，批号：20140221。③氯己定和乙醇成分(卫华汉德福消毒液)。有效成分为醋酸氯己定0.48%～0.58%，乙醇30%～40%。辽宁卫华医药有限公司生产，批号：20130101。中和剂的选择：根据《医疗机构消毒技术规范》[4]WS/T367-2012中要求选用0.3%吐温80，0.3%卵磷脂，普通肉汤进行中和。

1.2方法最低抑菌浓度(MIC)测定：MIC测定方法参照文献[5]，将消毒剂用标准硬水稀释成各试验浓度，从37 ℃培养24 h的新鲜平板中挑取单个菌落，取0.1 mL含菌量为106cfu/mL～108cfu/mL菌悬液，分别加入不同稀释浓度5.0 mL消毒剂中振荡混匀，各取0.5 mL分别加入平皿中，作用1 min，加入15 mL营养琼脂溶液，置37 ℃温箱培养48 h，结果以无菌生长的营养琼脂平皿中消毒剂最高稀释度为MIC。

2　结果

3种手消毒剂对多重耐药鲍曼不动杆菌的抑菌效果为100%。有效稀释比从高到低依次是：正丙醇和乙醇成分、氯己定和乙醇成分、季铵盐类成分，以手消毒剂无菌生长的最高稀释配比计算MIC。其MIC值分别为：0.17%和1.02%，0.03%和2.35%，0.03%。3种不同种类手消毒剂对多重耐药鲍曼不动杆菌的MIC见表1；3种不同种类手消毒剂对多重耐药鲍曼不动杆菌抑菌率见表2、图1。

表1　3种不同稀释倍数的手消毒剂对多重耐药鲍曼不动杆菌的MIC

表2　3种不同稀释倍数的手消毒剂对多重耐药鲍曼不动杆菌的抑菌率(n=30)　%

图1　3种不同种类手消毒剂对多重耐药鲍曼不动杆菌抑菌率趋势图

3　讨论

目前，如何筛选消毒剂尚无规范的方法，一般采用检测消毒剂对细菌最低杀菌浓度(MBC值)和MIC值来评价[5]。本次试验为成品手消毒剂，成分、浓度稳定，可直接使用于临床，所以采用MIC值来评价。我院实验MDR-Ab，对成品手消毒剂无耐药现象。正丙醇手消毒剂在抑制MDR-Ab中较其他手消毒剂效果好。为减少非药物原因导致的MDR-Ab，需强调医护人员手卫生的重要性，使其掌握正确的手卫生方法，自觉提高手卫生的依从性。MDR-Ab的耐药机制非常复杂，临床治疗比较困难。有报道指出，某些MDR-Ab带有54个耐药基因，其中45个基因位于称为“耐药岛”的耐药区域，表达受抗菌药物选择压力的影响[6]。根据全球性细菌耐药监测表明，不同地区的菌株对抗生素的敏感性存在差异，即使在同一所医院不同科室耐药谱也有不同，这与临床医生抗生素使用模式及环境关系密切。消毒剂对于不同细菌的MIC值监测正如抗菌药物对于不同细菌的MIC测定一样对于控制细菌感染性疾病的流行有一定预警作用[3]。目前，多重耐药鲍曼不动杆菌携带的qacE△1-sul1基因的不动杆菌可以通过主动外排机制将消毒剂排出体外，从而对抗季铵盐、双胍类、碱类消毒剂等，造成消毒剂失活，引起医院内感染的暴发流行[7]。本次试验中也出现季铵盐类手消毒剂对多重耐药菌抑制作用较其他两种手消毒剂差的现象。因此，在控制MDR-Ab传播过程中必要时进行手消毒剂的药物敏感试验，以排除耐药情况。

细菌在反复接触低剂量或亚致死量消毒剂情况下就会受到选择性压力的作用，可能更容易产生抗药性。有研究发现，许多菌株对消毒剂产生了抗药性[8]。因此，临床需加强消毒剂在医院的规范使用，以控制并减少消毒剂耐药现象。本次试验的受试菌株均来自同一所医院，样本例数较少，试验结果有一定局限性。

[1]池细俤，高世华，陈家龙，等.多重耐药鲍曼不动杆菌医院感染危险因素[J].中国感染控制杂志，2014，9(13):534-537.

[2]陈佰义，何礼贤，胡必杰，等.中国鲍曼不动杆菌感染诊治与防控专家共识[J].中华医学杂志，2012，92(2)：76-85.

[3]何晓峰，刘芳，曹晋桂，等.多重耐药革兰氏阴性杆菌消毒剂基因qacE△1-sul1监测[J].中国感染控制杂志，2011，10(2):97-99.

[4]中华人民共和国卫生部. 消毒技术规范[S].2012-04-05.

[5]沈林海，任淑华，孙建荣，等.多重耐药鲍曼不动杆菌对常用消毒剂的敏感性实验[J].中国卫生检验杂志，2008，9(18)：1729-1731.

[6]Foumier PE，Vallenet D，Barbe V，etal.Comparative genomics of multidrug resistance in acinetobacter baumannii[J].PLoS Genet，2006，2(1):62-72.

[7]黄连江，黄仕杰，梁小亮，等.厦门地区ICU多重耐药鲍曼不动杆菌的耐药性及同源性分析[J].广东医学，2013，12(24)：3744-3746.

[8]王震宇.细菌对消毒剂抗性研究进展[J].中国消毒学杂志，2007，24(2)：169-173.

(本文编辑范秋霞)

Study on sensitivity of multi drug resistant Acinetobacter baumannii for different components of hand disinfectants

Wu Fei