逆灸关元、命门穴对力竭运动大鼠糖原、乳酸的影响

李凯歌，孙志芳，王　洋，谭莉华，莫　捷，张露芬，任晓暄，郭孟玮，李晓泓

(北京中医药大学，北京 100029)



逆灸关元、命门穴对力竭运动大鼠糖原、乳酸的影响

李凯歌，孙志芳，王洋，谭莉华，莫捷，张露芬，任晓暄，郭孟玮，李晓泓*

(北京中医药大学，北京 100029)

目的比较逆灸关元和命门穴对大鼠力竭运动时糖原、乳酸的影响，探讨逆灸不同经穴对调节机体能量代谢的作用。方法将大鼠按游泳能力随机分为:空白对照组、逆灸关元组、逆灸命门组、力竭对照组、逆灸关元+力竭组和逆灸命门+力竭组，逆灸组预先进行艾灸，干预20 d后进行力竭游泳，观察力竭时间并采用生化法检测肝糖原、肌糖原、肌乳酸、血乳酸的含量。结果与空白对照组相比，逆灸关元和命门组大鼠肝糖原、肌糖原、肌乳酸、血乳酸含量均无统计学意义(P>0．05)，力竭对照组肝糖原、肌糖原含量下降(P<0．01)，肌乳酸、血乳酸含量上升(P<0．01)；与力竭对照组相比，逆灸关元+力竭组和逆灸命门+力竭组的力竭游泳时间延长(P<0．01)；逆灸关元+力竭组肝糖原含量升高、肌糖原无统计学意义(P<0．01，P>0．05)，肌乳酸、血乳酸含量下降(P<0．05，P<0．01)，逆灸命门+力竭组肝糖原、肌糖原含量升高(P<0．01，P<0．05)，肌乳酸、血乳酸含量下降(P<0．01)，逆灸命门+力竭组的肌乳酸含量较逆灸关元+力竭组下降更明显(P<0．05)。结论逆灸关元和命门穴均可提高大鼠的运动耐力，使大鼠力竭时间延长，其作用可能与其加强能量代谢，提高糖原利用率并降低乳酸堆积有关，逆灸命门穴对肌乳酸的清除力度较关元穴更为明显。

逆灸疗法；力竭运动；糖原；乳酸

力竭运动是机体疲劳时继续运动。在力竭运动后,如何使运动员消除疲劳是医学的研究热点[1]。糖原是为机体运动提供能量的主要来源[2]，而糖原的消耗与机体的有氧代谢能力有关，当有氧代谢不足时，机体会产生乳酸，乳酸是导致运动疲劳的主要物质。逆灸是机体在无病或疾病发生前预先用艾灸的方法使机体产生“良性预应激”，减缓不良刺激对机体伤害的一种方法[3]。关元和命门穴是经典的保健用穴。本实验通过观察预先艾灸关元、命门穴对大鼠力竭时间的影响，以及糖原、乳酸含量的变化，探讨逆灸命门穴和关元穴对运动耐力的影响及能量代谢的部分调节机制。

1　材料与方法

1．1动物及分组清洁级SD雄性大鼠36只，购自北京维通利华实验动物技术有限公司，许可证号:SCXK(京)2006-0009。全部8周龄，体质量180～200 g。大鼠置于清洁柜中，饲养室温度(20±1) ℃，湿度50%左右，予以普通饲料。大鼠适应性饲养1周，期间适应性游泳2次，第8天按随机顺序进行1次力竭游泳，再用随机数字法分为6组，每组6只，分别为:空白对照组、逆灸关元组、逆灸命门组、力竭对照组、逆灸关元+力竭组和逆灸命门+力竭组。组间的力竭游泳时间平均值无统计学意义。

1．2仪器与材料电子秤；计时器；JY99-ⅢB型超声器(宁波新芝科器研究所)；5415R高速离心机(德国Eppendorf公司)；Lambdal P40紫外可见分光光度仪(美国PE公司)。无烟灸条(直径1 cm，长度9 cm，河南南阳市卧龙汉医艾绒厂，批号:20081005)。

1．3处理方法空白对照组与力竭对照组大鼠每天被操作者用手轻按于操作台上，套上特制鼠套，保持10 min，隔日1次，共 10 次，第 21 天直接处死取材。力竭对照组游泳力竭后即刻取材。4个逆灸组，隔天艾灸1次，共10 次。第 21天逆灸关元、命门组直接处死取材，逆灸关元+力竭组与逆灸命门+力竭组游泳力竭后即刻取材。

1．4艾灸方法关元穴[4]:位于大鼠两后肢根部连线的中点。命门穴:位于大鼠第2腰椎棘突下[4]。灸法:穴位局部剃毛(直径约1 cm)。采用无烟灸条，固定于特制铁质灸架上。为大鼠套上特制鼠套，使其自然趴伏(灸命门穴)或仰卧(灸关元穴)，待大鼠平静后，挪至灸条下，穴位对准燃烧点，相距2 cm，连续灸10 min。

1．5力竭游泳参数采用直径50 cm、高80 cm塑料桶，每桶2只大鼠同时游泳，水深50 cm，水温(30±1) ℃，大鼠尾部系5%体质量铅坠。游泳时避免大鼠互相抓抱或趴于桶壁休息。力竭标准:大鼠游泳动作明显不协调，然后沉入水中10 s以上不能浮出。从大鼠入水开始计时，大鼠力竭停止计时，记录每只大鼠游泳至力竭的时间。

1．6取材方式大鼠断头处死，取出小块肝右叶、右侧比目鱼肌,直接放入冷冻管,迅速放入液氮冷冻5 min后移入-80 ℃冰箱，待测。

1．7检测指标和方法肝糖原、肌糖原采用生化法测定:严格按照试剂盒说明书操作。糖原生化试剂盒产于南京建成生物工程研究所，批号:20100422。肌乳酸、血乳酸采用生化法测定:严格按照试剂盒说明书操作。乳酸生化试剂盒产于南京建成生物工程研究所，批号:20100417。

2　结果

2．1各组大鼠力竭游泳时间比较见表1。

表1　各组大鼠力竭游泳时间比较　min

注:与力竭对照组比较，##P<0．01

2．2各组大鼠肝糖原、肌糖原含量比较见表2。

表2　各组大鼠肝糖原、肌糖原含量比较　mg/g

注:与空白对照组比较，##P<0．01；与力竭对照组比较，△P<0．05，△△P<0．01

2．3各组大鼠肌乳酸、血乳酸含量比较见表3。

表3　各组大鼠肌乳酸、血乳酸含量比较　mg/g

注:与空白对照组比较，##P<0．01；与力竭对照组比较，△P<0．05，△△P<0．01；与逆灸关元组比较，▲P<0．05

3　讨论

前期研究[5-11]显示，逆灸对机体紊乱状态有预防和纠正的良性调节作用。艾灸可以通过增加肌肉神经组织的能源供应，减少代谢产物的堆积，达到防治疲劳的效果[6，12]。本实验显示:在关元和命门穴预先艾灸后再进行力竭运动的力竭时间长于直接力竭运动的大鼠，说明逆灸可以提高大鼠运动耐力。力竭运动后大鼠的糖原均下降，乳酸均上升，而逆灸对照组的糖原、乳酸含量均无明显变化，推测逆灸并未提前增加机体的糖原储备或者促进乳酸消除来实现大鼠运动耐力增强；逆灸关元后再力竭运动的大鼠肝糖原含量上升，肌糖原含量与直接力竭运动无明显差异，推测可能逆灸关元可加强肝糖原的释放并使肌糖原的利用率提高，为力竭运动提供更多能量。而逆灸命门穴后再力竭运动的大鼠肝糖原与肌糖原含量均升高，可能是因为逆灸命门还能提高机体的糖异生水平,增加大鼠体内糖储备或者增强脂肪向糖的转化等。总之，二穴逆灸均可提高力竭运动所需的能量[13-15]，并能不同程度减轻乳酸的堆积，从而提高大鼠的运动耐力。

[1]顾一煌,金宏柱,任建宁,等.艾灸对力竭运动小鼠肌糖原、肝糖原影响的研究[J].江西中医药,2008,39(11):61.

[2]倪倩,万凤奇,董湘玉,等.高原环境对大鼠肝脏糖异生的影响[J].临床肝胆病杂志,2015,31(9):1477-1480.

[3]罗丽,李晓泓,孙志芳,等.逆灸关元、命门穴对极限耐力运动大鼠NOS、钠-钾-ATP酶活性的影响[J].山东中医药大学学报,2014,38(4):367-369.

[4]林文注,王佩.实验针灸学[M].上海:上海科学技术出版社,1999:289-299.

[5]孙运涛,班博,王一波,等.非诺贝特对梗阻性黄疸大鼠肝细胞凋亡、肝糖原含量的影响[J].临床肝胆病杂志,2011,27(9):947-950.

[6]江红轲.艾灸对运动训练大鼠糖原、血乳酸及运动能力的影响[J].河南大学学报(医学版),2011,30(4):287-290.

[7]孙志芳,李晓泓,王婧,等.逆灸命门穴对力竭大鼠糖原、ghrelin水平的影响[J].中华中医药杂志,2013,28(11):3193-3195.

[8]Jie M,LiliW,Xiaohong L,et al.Effect of lit-moxa stimulation of Guanyuan (CV 4) acupoint on levels of lactic acid and super-oxide dismutase in skeletal muscle of rats[J].Journal of Traditional Chinese Medicine,2015,35(2):234-237.

[9]莫捷,李晓泓,孙志芳,等.艾灸关元穴对大鼠力竭时间、肌乳酸及超氧化物歧化酶的影响[J].中华中医药杂志,2014,29(4):1067-1069.

[10]朱世鹏,李晓泓,孙志芳,等.逆灸命门穴对大鼠力竭游泳时间及血清Cort、下丘脑GnRH、垂体GnRH和血睾酮的影响[J].中医药学报,2013,41(5):44-47.

[11]李晓泓,孙志芳,莫捷,等.逆灸关元、命门穴对极限耐力运动大鼠骨骼肌钠钾ATP,SOD酶活性影响的比较研究[C]//中国针灸学会临床分会全国第19届针灸临床学术研讨会论文集,北京:2011.

[12]许慧倩,张宏如,顾一煌.艾灸防治运动性疲劳的研究进展[J].针刺研究,2014,39(2):169-173.

[13]易受乡,彭艳,彭芬,等.艾灸对脾虚大鼠小肠上皮线粒体超微结构及呼吸链酶含量的影响[J].世界华人消化杂志,2011,19(29):3028-3034.

[14]彭艳,彭芬,易受乡,等.艾灸对脾虚大鼠小肠运动吸收功能及ATP含量的影响[J].中国针灸,2012,32(3):246-250.

[15]邓树泳,张琰,伊丽娜,等.命门穴艾灸对肾阳虚小鼠血清、胸腺和脾脏SOD、MDA的影响[J].时珍国医国药,2012,23(7):1805-1806.

Preventive moxibustion at Guanyuan (CV-4) or mingmen(DU-4)on glycogen and lactic acid of exhaustive exercise rats

LI Kaige,SUN Zhifang,WANG Yang,TAN Lihua,MO Jie,ZHANG Lufen,REN Xiaoxuan,GUO Mengwei,LI Xiaohong*

(Beijing University of Chinese Medicine,Beijing 100029,China)

ObjectiveInfluence of compared moxibustion Guanyuan (CV-4)and Mingmen(DU-4) acupoint on rats of exercise glycogen,lactic acid.In order to explore the effect of pre-moxibustion at different acupoints on role.MethodsDepend on swimming exhausted time,the rats were randomly divide into blank control group,Guanyuan pre-moxibustion group,Mingmen pre-moxibustion group,exhaustive control group,Guan yuan pre-moxibustion exhaustive group,Mingmen pre-moxibustion exhaustive group.Moxibustion group pre-moxibustion intervention after 20 days of exhaustive swimming.Observing the exhaustive swimming time and the biochemical method to detect liver glycogen,muscle glycogen,muscle lactic acid,blood lactic acid content.ResultsCompared with blank control group,pre-moxibustion group on Guanyuan and Mingmen rat liver glycogen and muscle glycogen,muscle lactate,blood lactic acid content were not different (P>0.05),exhaustive control group of liver glycogen and muscle glycogen content was decreased (P<0.01),muscle lactate and blood lactic acid content increased (P<0.01);Compared with exhaustive control group,pre-moxibustion group on Guanyuan and Mingmen swimming time was prolonged (P<0.01);Guan yuan pre-moxibustion exhaustive group of hepatic glycogen increased and muscle glycogen had no difference (P<0.01,P>0.05),muscle lactate and blood lactic acid decreased (P<0.05,P<0.01),Mingmen pre-moxibustion exhaustive group of liver and muscle glycogen increased (P<0.01,P<0.05),muscle lactate,blood lactic acid decreased(P<0.01,P<0.01),Compared Mingmen pre-moxibustion exhaustive group with Guan yuan pre-moxibustion exhaustive group muscle lactic acid decreased (P<0.05).ConclusionPre-moxibustion Guanyuan and Mingmen can improve rats exercise tolerance and prolong its exhaustive time,it may be related to strengthen improve the energy metabolism of glycogen utilization rate and reduce lactic acid accumulation,inverse moxibustion on Mingmen of muscle lactate removal efforts than Guanyuan is more obvious.

pre-moxibustion;exhaustive exercise;glycogen;lactic acid

10.13463/j.cnki.cczyy.2016.04.008

国家自然科学基金课题(90209026)，国家中医药管理局针灸特色疗法评价重点研究室基金。

李凯歌(1989-)，女，硕士研究生，主要从事针灸推拿学研究。

李晓泓,女,医学博士,教授,博士研究生导师,电话-13910919691,电子信箱-xiaohong_li@sina.com

R285.5文献标-志码:A

2095-6258(2016)04-0681-03

2016-02-29)