VEGF、EGFR在非小细胞肺癌中的表达及其对GP方案化疗疗效影响

于　波（齐鲁医院桓台分院/桓台县人民医院肿瘤科，山东淄博256400）

VEGF、EGFR在非小细胞肺癌中的表达及其对GP方案化疗疗效影响

于波
（齐鲁医院桓台分院/桓台县人民医院肿瘤科，山东淄博256400）

目的观察吉西他滨、顺铂联用（GP方案）在血管内皮生长因子（VEGF）、表皮生长因子受体（EGFR）表达不同的非小细胞肺癌（NSCLC）患者中疗效差异，为临床上晚期肺癌的化疗药物筛选及预后判断提供依据。方法选取该院2010年4月至2014年4月收治74例NSCLC患者接受GP方案［吉西他滨（1 000 mg/m2）、顺铂（75 mg/m2）］治疗，21 d为1个周期，每2周期评价疗效。免疫组织化学检测NSCLC患者肿瘤组织中VEGF、EGFR的表达。结果GP方案化疗对NSCLC患者总体有效率为32.4%（24/74）。VEGF阴性与阳性患者化疗有效率比较，差异无统计学意义（P＞0.05）；EGFR阳性患者化疗有效率（18.0%）显著低于EGFR阴性患者（62.5%），差异有统计学意义（P＜0.05）。logistic回归显示，EGFR是化疗疗效显著的影响因素（OR=0.249，P＜0.01）。结论EGFR的表达情况对NSCLC患者GP方案化疗疗效有一定的预测价值。

血管内皮生长因子类；受体，表皮生长因子；癌，非小细胞肺；抗肿瘤联合化疗方案；免疫组织化学

肺癌是最常见的恶性肿瘤，其中，非小细胞肺癌（NSCLC）占肺癌的75%～80%。大多数肺癌患者确诊时已处于中晚期阶段，全身化疗是主要治疗方法。以吉西他滨（gemcitabine）等为代表的第三代化疗药物联合铂类药物化疗方案（GP方案）已成为晚期NSCLC标准一线治疗方法。GP方案在晚期NSCLC患者中的运用使其1年生存率达35%，2年生存率也接近15%～20%。但仍有较高比例的患者对GP方案敏感性低，这提示该方案仅适用于一部分NSCLC患者，分期临床治疗应遵循“循证医学”原则，即根据患者的个体差异选择用药。相应肿瘤标志物的检测对临床医生进行肺癌个体化防治具有重要的参考价值。

肺癌的发生、发展、转移和预后与其血管生成有着密切的关系。血管内皮生长因子（VEGF）是诱导血管生成的关键因子，其可改变内皮细胞基因的活化形成，诱导内皮细胞产生蛋白水解酶、间质胶原酶和组织因子，从而诱导血管的形成［1］。

表皮生长因子受体（EGFR）是一种具有酪氨酸蛋白激酶活性的细胞表面受体，是原癌基因C-erbB-1的表达产物，具有酪氨酸激酶活性，当与其配体表皮生长因子（EGF）、转化生长因子-α（TGF-α）结合，通过激活酪氨酸蛋白激酶途径，促进细胞生长，DNA合成，以及癌基因表达。EGFR的过度表达与肿瘤发生、发展及预后关系密切［2］。

为了解VEGF、EGFR在NSCLC患者中的表达情况及其对GP化疗方案敏感性的影响，本研究采用免疫组织化学（免疫组化）法检测了VEGF、EGFR在NSCLC组织中的表达，探讨其在NSCLC中的作用及与预后的关系。

1　资料与方法

1.1一般资料选择该院2010年4月至2014年4月收治的晚期NSCLC患者74例，均为初治患者，经纤维支气管镜活检、肺部肿物穿刺活检、颈部淋巴结切除活检或其他转移部位穿刺/切除活检，有明确病理诊断，X射线、CT等检查可测量转移灶。所有患者均为不能接受手术的Ⅲb期或Ⅳ期病理。74例患者中男44例，女30例；年龄35～76岁，中位年龄56岁；肺鳞癌38例，肺腺癌36例。以上患者均无化疗禁忌指征。所有患者Karnofsky评分大于60分，血常规，肝、肾功能，心电图正常。

1.2方法

1.2.1治疗方法所有NSCLC患者均为初治患者，未接受过肿瘤相关治疗。患者经病理学明确诊断后采用吉西他滨加顺铂化疗：吉西他滨1 000 mg/m2，加入100mL 0.9%氯化钠溶液静脉滴注30 min，第1、8天应用；顺铂75 mg/m2，加入0.9%氯化钠溶液500 mL中避光静脉滴注，总剂量分3 d应用。同时每天给予2 000 mL补液以水化减少肾脏毒性，并应用格拉司琼、甲氧氯普胺（胃复安）预防呕吐。化疗期间常规复查血常规，心电图，肝、肾功能，出现异常给予相应处理。化疗方案为：3周重复1次，每2个周期后全面复查评价疗效，治疗2～4个周期。

1.2.2疗效判定标准化疗中每2周期进行胸部CT、脑MRI、同位素骨扫描、腹部超声等检查，对可测量病灶进行记录，考评疗效并记录每周期的毒性反应。参照实体瘤RECIST疗效评定标准进行评估，分为完全缓解（CR）、部分缓解（PR）、稳定（SD）、进展（PD）。有效率（RR）=（CR例数+PR例数）/总例数×100%；疾病控制率（DCR）=（CR例数+PR例数+SD例数）/总例数×100%；表达一致率=（同时阳性例数+同时阴性例数）/总例数× 100%。在患者接受治疗后同时进行正规随访。

1.2.3VEGF及EGFR免疫组化测定鼠抗人VEGF单克隆抗体（MAB3045）购自美国R&D公司，鼠抗人EGFR单克隆抗体（ab30）购自美国Abcam公司。免疫组化采用链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结法（SP法）。结果由病理科医生在未知患者临床资料的情况下，观察每张切片。VEGF结果以细胞质或细胞膜染色呈棕黄色者为阳性，将VEGF表达分为（-）～（+++）共4级。EGFR免疫组化染色阳性结果分为4个等级：（-）为无显色；（+）为小于15%癌细胞阳性；（++）为15%～50%癌细胞阳性；（+++）为大于50%癌细胞阳性。实验中分别设阴性和阳性对照。

1.3统计学处理应用SPSS 17.0统计软件对数据进行分析。率的比较应用四格表χ2检验。应用logistic回归分析患者生存相关因素，P＜0.05为差异有统计学意义。

2　结　果

2.1肺鳞状细胞癌组与肺腺癌组临床疗效比较所选74例NSCLC患者均完成2个以上周期化疗，鳞状细胞癌组38例患者RR为34.2%，腺癌组36例患者RR为30.6%，总体有效率为32.4%。鳞状细胞癌组、腺癌组DCR分别为76.3%和77.8%，总体疾病控制率为77.0%。鳞状细胞癌组和腺癌组对GP方案化疗RR比较，差异无统计学意义（P＞0.05），见表1。

表1　肺鳞状细胞癌组与肺腺癌组临床疗效比较［n（%）］

2.2VEGF、EGFR在肺鳞状细胞癌和肺腺癌中的表达

细胞染色阳性信号呈棕黄或棕褐色，VEGF及EGFR定位于癌细胞膜或细胞质，细胞核无着色。在38例鳞状细胞癌标本中，20例VEGF表达阳性（52.6%），31例EGFR表达阳性（81.6%）；36例腺癌标本中，11例VEGF表达阳性（30.6%），19例EGFR表达阳性（52.8%）。鳞状细胞癌组VEGF、EGFR表达阳性率均显著高于腺癌组，差异均有统计学意义（P＜0.05）。见表2。

表2　VEGF、EGFR在肺鳞状细胞癌和肺腺癌中的表达（n）

2.3VEGF、EGFR表达与GP方案化疗疗效关系的单因素分析43例VEGF阴性患者中，14例对GP方案化疗有效（32.6%），31例VEGF阳性患者中，化疗有效者10例（32.3%），VEGF阳性患者化疗RR与阴性者比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。EGFR阴性表达患者24例，化疗有效者15例，RR为62.5%；阳性表达者50例，有效者9例，RR为18.0%，EGFR阴性患者GP方案化疗RR显著高于EGFR阳性患者，差异有统计学意义（P＜0.05）。

2.4NSCLC中VEGF、EGFR表达的相关性NSCLC组织中VEGF、EGFR表达同时阳性者为20例，同时阴性者为13例，表达一致率为44.6%，见表3。

表3　NSCLC中VEGF、EGFR表达的相关性（n）

2.5VEGF、EGFR对GP方案化疗疗效预测价值分析将VEGF、EGFR 2种因素作为自变量，化疗疗效作为应变量，量化后进行logistic回归分析，见表4。结果显示，VEGF对GP方案化疗疗效无显著影响，而EGFR可显著影响化疗结果（OR=0.249，P＜0.01）。见表5。

表4　logistic回归个因素量化表

表5　logistic回归分析结果

3　讨　论

肺癌是全世界最常见的恶性肿瘤，其中NSCLC占肺癌总数的75%～80%，由于发现时多数病例属于晚期，故全身化疗为主的综合治疗占有重要地位。吉西他滨是细胞周期特异性抗代谢类药物，主要作用于DNA合成期的肿瘤细胞。目前，以顺铂或卡铂为基础联用吉西他滨的二联用药已成为治疗晚期NSCLC的标准一线方案。有研究报道，GP方案化疗可使NSCLC的RR达到22%～25%，DCR达30%～45%，中位生存期7～9个月［3］。但仍有大部分患者对GP方案表现出耐药性。目前NSCLC患者中EGFR基因突变的NSCLC应用分子靶向药物也是常用的治疗方案，但由于该类药物价格较高，基层医院很难广泛应用，故寻找预测患者对GP方案疗效敏感性指标对制订个体化治疗、判断预后有积极意义。

VEGF是一个相对分子质量为46×103的高度糖基化的碱性蛋白，由2个相对分子质量各为23×103的不同亚基以二硫键连接所组成的二聚体。在肺癌发生、发展中起重要作用：可直接刺激肺血管内皮细胞分化增殖和迁移，加快基底膜降解，提高血管通透性，为肿瘤基质和毛细血管网形成提供基础；促进内皮细胞表达，诱导血管形成。近年来抑制VEGF，减少血管生成，切断肿瘤血供已成为治疗肺癌的研究热点。本研究结果显示，VEGF表达阳性率在肺鳞状细胞癌组显著高于肺腺癌组，但该差异并不能影响NSCLC患者对GP化疗方案的敏感性。故VEGF并不能作为NSCLC患者对GP方案化疗敏感性预测指标。

EGFR属于Ⅰ型生长因子受体家族，具有受体酪氨酸激酶活性。可通过降低黏附分子E-cadherin的表达，增加基质膜降解酶分泌，导致肿瘤细胞侵袭能力的增加。有研究表明，EGFR基因突变的患者对吉非替尼治疗更敏感；另一些学者则从EGFR与化疗疗效关系方面进行研究以寻求治疗策略上的有效性［4-5］。已有研究证实，在食管癌和卵巢癌中，EGFR过度表达的患者化疗缓解率显著降低［6-7］。目前，鲜见EGFR对NSCLC患者化疗疗效影响的报道。作者发现，在应用GP方案化疗时，EGFR阳性的NSCLC患者RR显著低于EGFR阴性患者。logistic回归分析提示，EGFR可作为预测化疗敏感性及预后的一种指标，为临床治疗方案提供参考。

本研究运用免疫组化法对74例NSCLC患者组织中VEGF、EGFR的表达进行检测，结果发现，NSCLC组织中VEGF与EGFR表达一致率为44.6%，这提示EGFR表达升高者，肺癌组织存在更强的诱导血管生成能力，但尚需进一步研究以证实二者发生关系的具体机制。

化疗方案的选择对包括NSCLC在内的多种肿瘤的治愈率、生存率存在巨大影响。部分患者对某些化疗方案不敏感，而化疗结束后发现无效时已为时已晚。在化疗前评估患者对化疗的敏感性，有助于筛选出部分对化疗敏感的患者进行针对性治疗，对化疗敏感性差的患者可采取其他对策，避免不必要的化疗不良反应和延误治疗。本研究提示，EGFR可作为判断NSCLC患者对GP方案化疗敏感性和预后的一项指标，故EFGR检测对临床医生进行肺癌个体化治疗有一定的参考价值。

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［3］陈玲，赵新汉，李旭，等.晚期非小细胞肺癌不同治疗方案疗效的比较［J］.现代肿瘤医学，2007，15（1）：38-40.

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10.3969/j.issn.1009-5519.2016.05.035

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1009-5519（2016）05-0734-03

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2015-12-01）