糖尿病酮症酸中毒患儿外周血调节性T细胞及胰岛B细胞功能改变的观察

王鸿武+林丽敏+林广裕

【摘要】 目的 探讨糖尿病酮症酸中毒（DKA）患儿外周血调节性T细胞（Treg）和胰岛B细胞功能的变化情况及两者的关系。方法 34例1型糖尿病患儿， 根据有无并发DKA分为DKA组（24例）、非DKA组（10例）， 20例正常健康儿童作为正常对照组。采用流式细胞术检测外周血CD4+CD25+ Treg百分率， 化学发光法检测血清空腹C肽（FC-P）、胰岛素及糖化血红蛋白（HbA1c）水平。结果 DKA组和非DKA组外周血CD4+CD25+ Treg百分率、胰岛素、FC-P低于正常对照组， HbA1c高于正常对照组（P<0.05）；DKA组外周血CD4+CD25+ Treg百分率、胰岛素和FC-P低于非DKA组， HbA1c高于非DKA组（P<0.05）。相关分析显示， CD4+CD25+ Treg百分率与胰岛素、FC-P呈正相关（r=0.627、0.532， P<0.05）， 与HbA1c水平呈负相关（r=-0.708， P<0.05）。结论 DKA患儿外周血CD4+CD25+ Treg百分率减低， 可能参与了儿童DKA的发生和发展， 与胰岛B细胞功能相关。

【关键词】 糖尿病酮症酸中毒；CD4+CD25+调节性T细胞；胰岛B细胞；功能改变

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2016.20.031

CD4+CD25+调节性T细胞（regulatory T cells， Treg）是一类具有免疫调节功能的T淋巴细胞， 在维持机体免疫自稳、调控免疫应答方面起重要作用[1]。糖尿病酮症酸中毒（diabetic ketoacidosis， DKA）是儿童1型糖尿病最常见的严重并发症之一， Treg数量减少、功能障碍可能导致糖尿病及DKA的发生[2]。本研究通过检测DKA患儿外周血Treg水平， 探讨其在1型糖尿病及并发DKA中的机制及与胰岛功能的相关性， 为DKA的防治提供理论依据， 现报告如下。

1 资料与方法

1. 1 一般资料 选择2010年1月～2015年12月本院收治的34例1型糖尿病患儿， 男16例， 女18例， 年龄 0.5～14.7岁， 平均年龄（7.7±2.2）岁， 排除发热、急性感染、应激等并发症。根据有无并发DKA分为DKA组（24例）[符合儿童DKA诊疗指南（2009年版） 诊断标准[3]]及非DKA组（10例）；选择同期在本院健康体检儿童20例作为正常对照组， 男10例， 女10例， 年龄2～15岁， 平均年龄（8.2±3.7）岁， 无糖尿病家族史。1型糖尿病患儿和正常儿童一般资料比较， 差异无统计学意义（P>0.05）， 具有可比性。

1. 2 方法

1. 2. 1 CD4+CD25+ Treg百分率测定 所有入选者均于夜间禁食12 h后清晨抽空腹血2 ml， EDTA抗凝， 并送流式细胞室进行检测， 所有步骤均严格按照标准操作程序进行。结果以CD4+CD25+ Treg占CD4+ 的百分率（CD4+CD25+/CD4+）%表示。

1. 2. 2 血清FC-P、HbA1c、胰岛素的检测 均在医院检验科检测， 检测时所有步骤均严格按照标准操作程序进行。

1. 3 统计学方法 采用SPSS16.0统计学软件对数据进行统计分析。计量资料以均数±标准差（ x-±s）表示， 采用t检验；计数资料以率（%）表示， 采用χ2检验；相关分析采用Spearman相关分析。P<0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

2. 1 三组胰岛功能比较 DKA组和非DKA组血胰岛素、FC-P低于正常对照组， HbA1c高于正常对照组 （P<0.05）；DKA组血胰岛素和FC-P低于非DKA组， HbA1c高于非DKA组 （P<0.05）。见表1。

2. 2 三组CD4+、CD4+CD25+ Treg比较 DKA组和非DKA组外周血CD4+、CD4+CD25+ Treg百分率低于正常对照组 （P<0.05）；DKA组低于非DKA组 （P<0.05）。见表2。

2. 3 DKA患儿外周血CD4+CD25+ Treg百分率与FC-P含量、HbA1c、胰岛素的相关性分析 Spearman相关分析显示， CD4+CD25+ Treg百分率与胰岛素、FC-P呈正相关（r=0.627、0.532， P<0.05）， 与HbA1c水平呈负相关（r=-0.708， P<0.05）。

3 讨论

1 型糖尿病是一种由T细胞介导的胰腺B细胞进行性损伤的自身免疫性疾病， Treg在免疫稳态的维持中有重要作用， Treg数量或功能的下降均可促进自身免疫性疾病包括1型糖尿病的发生[4， 5]。Treg具有免疫负调节作用， CD4+CD25+ Treg作为一个独立调节性T细胞亚群， 在抑制自身免疫反应中起重要作用， 与疾病的进展相关[6， 7]。

本次作者对糖尿病患儿和正常对照组外周血Treg的检测结果显示糖尿病患儿外周血Treg百分率显著低于正常对照组， DKA组外周血Treg百分率低于非DKA组， 提示糖尿病患儿外周血Treg百分率进一步减少， 可能导致对效应T细胞的抑制能力持续降低， 进而机体发生免疫功能紊乱， 同时检测到胰岛素、FC-P降低， HbA1c明显升高， 提示胰岛B细胞功能下降， 而引起酮症酸中毒。相关分析发现糖尿病患儿外周血Treg百分率与胰岛素、FC-P呈正相关， 与HbA1c呈负相关， 推测Treg数量的减少， 可致使自身免疫反应性T、B细胞活化、增殖， 胰岛B细胞功能受损， 是导致1型糖尿病并发酮症酸中毒的可能机制。

综上所述， DKA患儿外周血Treg百分率减低与胰岛B细胞功能密切相关， 可能参与了DKA的发生和发展。

参考文献

[1] Bettini M， Vignali DA. Regulatory T cells and inhibitory cytokines in autoimmunity. Curr Opin Immunol， 2009， 21（6）：612-618.

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[3] 中华医学会儿科学分会内分泌遗传代谢学组. 儿童糖尿病酮症酸中毒诊疗指南（2009年版）. 中华儿科杂志， 2009， 47（6）：421-425.

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[7] 王秀敏， 周小芸， 梁黎， 等. 儿童1型糖尿病酮症酸中毒血清电解质变化与疗效的关系. 中华急诊医学杂志， 2006， 15（7）：633-635.

[收稿日期：2016-04-08]