荧光定量PCR检测淋球菌、沙眼衣原体和解脲脲原体结果分析

张欠欠，仵恒立，胡军婷，成俊珍，任　勇，杨　晗，马　莹



荧光定量PCR检测淋球菌、沙眼衣原体和解脲脲原体结果分析

张欠欠1，仵恒立1，胡军婷1，成俊珍2，任勇2，杨晗1，马莹1

1.延安大学医学院，延安716000；2.延安大学附属医院，延安716000

摘要：目的了解延安市皮肤性病科门诊患者泌尿生殖道淋球菌(NG)、沙眼衣原体(CT)及解脲脲原体(UU)的感染现状及其特点，为临床提供依据。方法采用实时荧光聚合酶链式反应技术( FQ-PCR)对784例患者的泌尿生殖道分泌物的NG、CT和UU核酸进行检测。结果784例患者中，NG、CT和UU的阳性检出率分别为15.43%、34.69%和30.87%，女性UU感染率明显高于男性(P<0.01)，男性CT感染率明显高于女性(P<0.05)，NG感染率男性虽高于女性，但无性别差异(P>0.05)。混合感染检出率为19.64%，其中CT+UU双重感染的阳性检出率最高，为10.20%。不同年龄感染情况显示，感染率以21～40岁年龄段最高。结论泌尿生殖道感染患者NG、CT和UU阳性检出率不尽相同，阳性患者大多年龄在青壮年时期, 应作为性传播疾病防治工作中的重点对象。混合感染较为常见，临床应进行3种病原体的检测。

关键词：淋球菌；沙眼衣原体；解脲脲原体；实时荧光聚合酶链式反应

Supported by the Scientific Research Project of Henan Education Department (No. 14JK1836), the Yan’an University Youth Special Fund to Support the Project (UTI) Pathogens Detection (No. YDQ2013-03), and the 2015 Shaanxi Province College Students’ Innovation and Entrepreneurship Training Program (No. 1415)

淋球菌(Neisseria gonorrhoeae,NG)、沙眼衣原体(Chlamydozoa trachomatis,CT)和解脲脲原体(Ureaplasma urealyticum,UU)是目前引起性传播疾病最常见的3种病原体，可引起尿道炎、附睾炎、子宫内膜炎、盆腔炎及输卵管炎等，严重的可导致不孕不育[1]。但由于检测方法、检测人群、数量及地区流行性的差异，各研究报告结果存在较大差异。为了解目前延安市皮肤性病科门诊患者泌尿生殖道NG、CT和UU的感染状况，对2013年7月至2014年12月784例泌尿生殖道标本进行了病原体检测并对结果进行了统计分析，现报告如下。

1材料与方法

1.1研究对象选取2013年7月至2014年12月本院皮肤性病科门诊患者784例，其中男480例，女304例，年龄16～71岁，平均年龄34.2±5.1岁。大多数患者有尿频、尿痛、尿道刺痒及分泌物增多等症状，患者在检测前均未服用抗生素治疗。

1.2标本采集所有标本均按无菌操作进行采集，男性取尿道分泌物，用细小无菌男性一次性棉拭子深入尿道约2～4 cm取分泌物，前列腺液由医生按摩后取出；女性用无菌棉签擦净宫颈分泌物，再用无菌棉拭子插入宫颈内，停留几秒，旋动棉拭取出。所有采集好的标本立即置入一次性专用试管中加盖密闭备检。

1.3检测方法检测均采用实时荧光定量聚合酶链式反应技术(FQ-PCR)，NG、CT和UU检测试剂盒由中山医科大学安达基因诊断中心提供，有效期内使用，操作及结果判断严格按照说明书进行。仪器为美国ABI公司7700自动荧光PCR检测仪。

1.4统计学处理所有数据采用SPSS16.0软件进行χ2检验。

2结果

2.1NG、CT和UU总的感染情况(见表1)784例患者中，总阳性率为80.99%，男女感染率性别差异有统计学意义(P<0.05)，NG、CT和UU的阳性检出率分别为15.43%、34.69%和30.87%，女性UU感染率明显高于男性(P<0.01)，男性CT感染率明显高于女性(P<0.05)，NG感染率男性虽高于女性，但无性别差异(P>0.05)。

2.2NG、CT和UU分类感染情况和年龄与性别分布(见表2和表3)结果显示，单一感染检出率为39.29%(308/784)，男性以CT检出率最高，为21.25%，男女性别差异有统计学意义(P<0.05)，女性以UU检出率最高，为20.72%，其感染率明显高于男性，差异具有统计学意义(P<0.01)；混合感染检出率为19.64%(154/784)，以CT+UU二重感染最高。不同年龄感染情况显示，感染率以21～40岁年龄段最高。

表1　 NG、CT和UU总的感染情况/n(%)

表2　NG、CT、UU分类感染情况/n(%)

3讨论

STD是目前国际上流行最广的一类传染病，在性病病原体中，NG、CT和UU所致的泌尿生殖系感染，已成为我国各地区主要的性传播病症[2]。常用的检测方法包括涂片法、培养法和免疫法等由于其敏感性差，可靠性低，检测时间长等缺点，无法及时准确地给临床提供依据。而荧光定量PCR操作简便、反应时间短、重复性好、结果准确性和灵敏度高。

本次检测结果显示，784例患者中CT感染率最高(34.69%)，其次是UU(30.87%)和NG(15.43%)，与李百灵等[3]报道的西安地区CT感染率高于UU相一致，有文献[4]报道CT 所致的泌尿生殖系感染是目前世界范围内最为流行的性传播疾病，本文结果与上述观点相符。表2结果显示，单一感染检出率为39.29%，低于国内报道的54.27%[5]；混合感染检出率为19.64%，与史云珍等[6]报道的

表3　784例患者的年龄与性别分布/n(%)

17.5%基本相似，但高于贺望娇[7]的报道(10.59%)，可能是一些GU患者在治疗后出现病情反复、迁延、久治不愈的一大原因。混合感染以CT与UU的二重感染率最高，这与文献报道的CT与UU合并感染在混合感染中占首位相符[7-8]，UU本身并不致病，但当合并感染CT，常引起男性的NGU和女性的宫颈炎。在性别感染率比较中，就诊患者中女性UU感染率明显高于男性(P<0.01)，而男性CT感染率高于女性(P<0.05)。原因可能是:第一，女性生殖系统生理特点造成感染后症状不明显，无特异性，常被忽视而不能及时就诊导致检出率偏低，而男性更容易患无症状UU感染，导致男性UU感染的检出率偏低；第二，女性的生理结构更适合UU生存，也可能与生活习惯及社会角色不同有关，从而导致UU感染高发于女性。

不同年龄感染情况显示，感染率以21～40岁年龄段最高，这与国内外报道的NG、CT和UU感染人群主要集中在青壮年一致[9-10]，说明中青年就诊者泌尿生殖道病原体阳性率高。这是由于该年龄段人群正处于性活跃期、流动性大，是重要传染源和高危人群，可以增加混合感染的机率，因此应作为性传播疾病防治工作中的重点对象。由于NG、CT和UU感染是导致男女不孕不育的重要原因，而生殖道的混合感染比单一感染危害大，建议临床医师在诊治泌尿生殖系疾病过程中，应对3种病原体同时检测，力求早发现、早治疗，提高治愈率。

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DOI:10.3969/j.issn.1002-2694.2016.03.020

通讯作者：张欠欠，Email：zhangqianyd@163.com

中图分类号：R374

文献标识码：C

文章编号：1002-2694(2016)03-0312-03

Corresponding author:Zhang Qian-qian, Email: zhangqianyd@163.com

收稿日期：2015-07-07；修回日期:2015-12-08

Detection and analysis of NG, CT and UU by fluorescence quantitative PCR

ZHANG Qian-qian1,WU Heng-li1,HU Jun-ting1,CHENG Jun-zhen2, REN Yong2,YANG Han1, MA Ying1

(1.MedicalCollege,Yan′anUniversity,Yan’an716000,China;2.Yan’anUniversityAffiliatedHospital,Yan’an716000,China)

Abstract:We investigated the prevalence of Neisseria gonorrhoeae (NG), Chlamydozoa trachomatis (CT) and Ureaplasma urealyticum (UU) infections in Yan′an, China. The genital tract infections in 784 patients were deteeted by using FQ-PCR for providing clinical treatment evidence of NG, CT and UU. The positive rates of NG, CT and UU were 15.43%, 34.69% and 30.87%, respectively. The incidence of Ureaplasma urealyticum (UU) was significantly higher in male group than in female group (P<0.01), while was lower in case of Chlamydozoa trachomatis (CT) infection (P<0.05). Mixed infection was 19.64%, CT and UU mixed infection was dominant in urogenital tract infection (UTI) patients (10.20%). This study also showed that infection rate in age group 21-40 years was higher. There was significant difference in positive rate of NG, CT and UU in Urogenital tract infection (UTI) patients. The most affected age group was young adults, indicating significant sexual transmitted diseases. Mixed infection was common, and more attention should be paid to these three kinds of pathogenic diseases detection clinically.

Keywords:Neisseria gonorrhoeae; Chlamydozoa trachomatis; Ureaplasma urealyticum; fluorescence quantitative PCR

陕西省教育厅科研项目(No.14JK1836),延安大学青年专项基金资助项目(No.YDQ2013-03),陕西省大学生创新创业训练计划项目(No.1415)