湖南省湘西州部分规模场牦牛流产衣原体流行情况及风险因素调查

汤国祥，李　晖（. 湖南省益阳市赫山区畜禽良种繁育场，湖南益阳　4003；. 湘西民族职业技术学院，湖南吉首　46000）



湖南省湘西州部分规模场牦牛流产衣原体流行情况及风险因素调查

汤国祥1，李晖2
（1. 湖南省益阳市赫山区畜禽良种繁育场，湖南益阳410013；2. 湘西民族职业技术学院，湖南吉首416000）

摘要：本研究旨在查明湖南省湘西州牦牛流产衣原体感染情况并探讨其可能的风险因素。应用间接血凝试验（IHA）方法检测了该地区的825份牦牛血清，并应用流行病学、统计学方法对牦牛衣原体风险因素进行了评估分析。结果显示，牦牛流产衣原体抗体阳性率为17.2%，季节和性别是牦牛流产衣原体感染的主要风险因素（P＜0.05）。本研究表明湖南省湘西州牦牛流产衣原体感染率较高，应当对本地区的流产衣原体病采取适当的控制措施，以确保人类和动物的健康安全。

关键词：衣原体；流行病学；牦牛；风险因素；评估

衣原体（Chlamydiae）为革兰氏阴性病原体，是一类能通过细菌滤器、在细胞内寄生、有独特发育周期的原核细胞性微生物。其在自然界中分布广泛，可感染人类和多种动物［1］。感染人类的衣原体有许多种，比如沙眼衣原体（Chlamydia trachomatis）、肺炎衣原体（C. pneumoniae）和鹦鹉热衣原体（C. psittaci），常常引起重大的公共卫生问题［2］。马、牛、羊、猪等哺乳动物以及家禽、野禽等禽类均能感染衣原体，引发多种疾病。近年来，家畜衣原体的感染在我国养殖场十分普遍，可引起母畜流产和产死胎等多种疾患，给养殖业带来巨大经济损失［3-6］。

我国是一个牦牛养殖大国，牦牛总数约占世界总数的90%［7-8］。感染牦牛的衣原体有三种：流产嗜性衣原体（C. abortus）、鹦鹉热衣原体（C. psittaci）和反刍动物衣原体（C. pecorum）［9］。感染衣原体的牦牛可发生流产和繁殖障碍，也可发生肺炎、鼻炎、结膜炎、关节炎、尿道炎等症状［1，9-11］。许多研究表明，印度和我国青海地区牦牛衣原体感染较为严重［12-15］，然而未见对湖南省牦牛衣原体感染情况调查的报道。湘西州位于湖南省西部，是湖南省牦牛的主要产区之一。本研究在湖南省湘西州的8个规模牦牛场进行抽样调查，估计牦牛衣原体的个体流行率，并对个体感染的风险因素进行了分析，以期为更好地防治该病提供依据。

1　材料和方法

1.1牦牛血清样品

在2015年春季（n=181）、夏季（n=228）、秋季（n=185）、冬季（n=231）采集湖南省湘西州牦牛血清共825份。每头牦牛采血10 mL。血清样品经4 000×g离心10 min后转移到新的离心管中，存放于-20 ℃待用。牦牛的性别、年龄信息在询问畜主后做了详细记录。采样范围为湘西州7个县（泸溪、凤凰、花垣、保靖、古丈、永顺、龙山）的8个规模化牦牛场，养殖规模都在500～1 500头之间。按照1/10的比例随机采样（每场50～150份）。采样前，对每头牦牛都进行临床检查，以确保牦牛处于健康状态。

1.2间接血凝试验（IHA）检测抗体

衣原体IHA抗原、阳性血清、阴性血清、稀释液，购自中国农科院兰州兽医研究所。按中国农科院兰州兽医研究所提供的检测方法和先前的文献描述进行试验［16-17］。首先在反应板中每孔滴加0.075 mL血清用以铺板，然后取0.025 mL样品滴加于第一孔，再以4倍递呈稀释3孔。最后一孔弃去0.025 mL。加0.025 mL抗原于各孔后，将反应板盖玻璃板后置微型振荡器振荡2 min，于37 ℃下作用2 h后判定结果。每板设阴、阳性及空白对照各两孔。被检血清1：16稀释孔内呈现“澄清”以上凝集者判为阳性。若有可疑孔，则需复检。

1.3数据分析

对所有数据采用统计软件PASW Statistics 18.0 （SPSS Inc、IBM Corporation、Somers、NY）进行分析。采用二元logistic回归分析，研究性别、年龄和季节三个与衣原体感染有关的潜在影响因素，当P＜0.05时具有统计学意义。在二元logistic回归模型中，使用向前条件方法进行分析，结果年龄因素在二元logistic回归分析中没有显著差异（P＞0.05）而被剔除出方程。

2　结果

在本次检测的825份牦牛血清样品中，流产衣原体抗体阳性有142份，阳性率为17.2%。其中母牦牛感染率为19.3%，高于公牦牛感染率（14.6%）。不同的季节分组中，夏季的阳性率最高（24.5%），其次为春季（20.6%）和秋季（12.6%），冬季的阳性率最低（11.4%）。不同年龄分组的衣原体阳性率在9.2%～24.5%之间，其中y≥3的分组阳性率最高（表1）。

表1　湖南省湘西州牦牛衣原体感染的血清阳性率（IHA）

雌性牦牛感染流产衣原体的风险约是雄性牦牛的2.5倍（OR = 2.55，P＜0.01）。牦牛在秋季感染流产衣原体的风险约是冬季的1.5倍（OR = 1.57，P＜0.01），而夏季感染的风险约是冬季的8.7倍（OR = 8.76，P = 0）。冬季感染的风险与秋季感染风险没有显著差异（P＞0.05）（表2）。性别和季节是影响牦牛流产衣原体感染的两个重要风险因素。

表2　牦牛衣原体感染风险因素（性别和季节）的优势比

3　讨论

IHA因其在灵敏度方面强于CFT，而价格又比ELISA便宜，成为现在衣原体检测的最佳选择［13］。因此，本研究选择IHA法对湖南省湘西州牦牛流产衣原体感染情况进行研究。本研究表明，湖南省湘西州牦牛流产衣原体的总感染率为17.2%，与青海省的调查结果（17.66%阳性率）基本一致，而此前青海省其他地区的牦牛衣原体感染阳性率在0.75%～27.7%之间［14-15］。

性别因素是牦牛感染流产衣原体的主要风险因素，其原因可能与牧场内牦牛性别结构有关。牦牛的饲养较为粗放，多采用自由交配，一般牧场内的母牦牛的数量多而公牦牛的数量少，加之衣原体可以通过交配感染［13］，因此一头感染的公牦牛可以导致较多的母牦牛感染此病。但是，此前的报道则认为性别因素不是牦牛感染衣原体的风险因素［12-13］，其原因仍需进一步探究。

动物和人类都可通过直接接触带有病原的排泄物，如阴道分泌物、尿液和粪便等感染衣原体［18］。牦牛吸入或者摄取了被污染了的物质也可以发生感染［13］。

衣原体在5～10 ℃的低温干燥的环境下可以存活长达6个月，而在室温下则可以存活10～15天［19］。牦牛是放牧动物，在草原上采食的同时也将粪便排泄在了草场上，带有衣原体病原的粪便可以污染草场。春末和夏季，草场茂盛，牦牛的采食量和采食范围加大，同时其感染衣原体的机会也在增加，所以春季和夏季牦牛感染衣原体的阳性率也相对较高。本次调查结果与Chen等［13］调查结果基本一致。

本研究调查结果显示，牦牛在各年龄段均可感染衣原体，阳性率在9.36%～25.08%之间。阳性率最高的为年龄大于3岁的分组，而阳性率最低的则发生在年龄小于1岁的分组。这可能是因为随着牦牛年龄的增加，接触病原的机会随之增加而造成的。虽然各年龄分组的阳性率有变化，但是差异不明显（P＞0.05），这与先前的Chen等［13］的结果一致。

人兽共患病的流产衣原体在湖南省湘西州已经相当普遍，可能还将长期存在。因此，有必要深入研究牦牛流产衣原体的分子流行病学特点和致病机理，定期监测牦牛群流产衣原体抗体变化。这对于保障公共卫生安全，有效预防和控制猪流产衣原体病有极其重要的意义。

参考文献：

［1］ Everett K D. Chlamydia and Chlamydiales：more than meets the eye［J］.Vet Microbiol，2000，75（2）：109-126.

［2］周继章，邱昌庆.我国家畜衣原体病流行状况［J］.现代预防医学，2014，41（11）：110-112.

［3］毕峻龙，杨斌，高利波，等.云南省部分地区猪衣原体感染的血清学调查［J］.中国畜牧兽医，2007，34（7）：134-136.

［4］ 龙冲冲，颜艾，周碧君，等.贵州省山羊布鲁氏杆菌病衣原体病蓝舌病的血清学调查研究［J］.贵州畜牧兽医，2011 （31）：1.

［5］ 杨晓芳，王伟忠，徐平，等.一起衣原体和布氏杆菌混合感染引起奶牛流产的诊治［J］.中国畜牧兽医，2008，35（7）：121-122.

［6］ 张立成，王谢忠，张茂华，等.青海省牲畜衣原体病血清学监测［J］.中国兽医杂志，2014，50（4）：38-39.

［7］ Liu Q，Cai J，Zhao Q，et al. Seroprevalence of Toxoplasma gondii infection in yaks （Bosgrunniens） in northwestern China［J］.Trop Anim Health Prod，2011，43（4）：741-743.

［8］ Bao Q，Liu W，Yu J，et al. Isolation and identification of cultivable lactic acid bacteria in traditional yak milk products of Gansu Province in China［J］.J Gen Appl Microbiol，2012，58（2）：95-105.

［9］ Reinhold P，Sachse K，Kaltenboeck B. Chlamydiaceae in cattle： Commensals， trigger organisms， or pathogens？ ［J］. Vet J，2011，189（3）：257-267.

［10］ Longbottom D，Coulter L J. Animal chlamydiaceae and zoonotic implications［J］.J Comp Pathol，2003，128（4）：217-244. ［11］Livingstone M，Longbottom D. What is the prevalence and economic impact of Chlamydial infections in cattle？ The need to validate and harmonise existing methods of detection［J］.Vet J，2006，172（1）：3-5.

［12］Bandyopadhyay S，Sasmal D，Biswas T K，et al. Serological evidence of antibodies against Chlamydophilaabortus in free-ranging yak（Poephagusgrunniens） in Arunachal Pradesh，India［J］.Rev Sci Tech，2009，28（3）：1051-1055.

［13］ Chen Q，Gong X，Zheng F，et al. Seroprevalence of Chlamydophilaabortus infection in yaks （Bosgrunniens） in Qinghai，China［J］. Trop Anim Health Prod，2014，46：503-507.

［14］ 张作秀.格尔木地区牦牛衣原体病的血清学调查［J］.青海畜牧兽医杂志，2012，42（1）：17.

［15］ 谢仲秀.果洛地区牦牛衣原体病疫情动态调查［J］.青海畜牧兽医杂志，2013，43（1）：33.

［16］ Huang S Y，Wu S M，Xu M J，et al. First record of Chlamydia abortusseroprevalence in Tibetan sheep in Tibet，China［J］.Small Ruminant Research，2013，112：243-245.

［17］ Zhou D H，Zhao F R，Xia H Y，et al. Seroprevalence of Chlamydial infection in dairy cattle in Guangzhou，southern China［J］.Ir Vet J，2013，66（1）：2.

［18］ Rodolakis A，Yousef M K. Zoonotic potential of Chlamydophila［J］.Vet Microbiol，2010，140（3/4）：382-391.

［19］ McEwen A D，Littlejohn A I，Foggie A. Enzootic abortion in ewes. Someaspects of infection and resistance［J］. Vet Rec，1951，63：489-492.

（责任编辑：朱迪国）

Research of Sero-prevalence and Risk factors of Chlamydophilaabortus Infection in Some Scaled Yak Breeding Farms in Xiangxi Autonomous Prefecture of Hunan Province

Tang Guoxiang1，Li Hui2
（1. Livestock and Poultry Breeding of Farm Heshan District，Yiyang，Hunan 410013；2.Xiangxi Vocational and Technical College for Nationalities，Jishou，Hunan 416000）

Abstract：The sero-prevalence of Chlamydophilaabortus infection in yaks was investigated in some scaled breeding farms of Hunan province from January 2015 to January 2016. A total of 812 animal serum samples were collected from Xiangxi autonomous prefecture of Hunan province. All the serum samples were evaluated by indirect hemagglutination test（IHA）. The overall sero-prevalence of C.abortus was estimated at 17.2%. The risk factors associated with seroprevalence were determined by multivariate logistic regression analysis. Season and gender of yaks were considered as main risk factors associated with C.abortus infection（P＜0.05）. The results revealed a widespread and high prevalence of C.abortus infection in yaks in Hunan province. The suggestions of taking control measures of zoonotic C.abortus infection were put forward ，in order to ensure the safety of human and animal health.

Key words：seroprevalence；Chlamydial；yaks；risk factors；evaluation

中图分类号：S851.3

文献标识码：A

文章编号：1005-944X（2016）06-0001-04

DOI：10.3969/j.issn.1005-944X.2016.06.001

基金项目：湖南省科技厅一般项目（2011NK3085）