柴胡三参胶囊对缺血性心律失常大鼠模型血清前列环素、血栓素A2及CRP的影响

刘建和，王建国，王　敏，刘锦霞，周　正，唐　银



柴胡三参胶囊对缺血性心律失常大鼠模型血清前列环素、血栓素A2及CRP的影响

刘建和1，2，王建国3，王敏1，2，刘锦霞3，周正3，唐银3

1.湖南中医药大学第一附属医院(长沙 410007)，E-mail：591623614@qq.com；2.湖南中医药大学中医诊断学湖南省重点实验室；3.湖南中医药大学

摘要：目的 探讨柴胡三参胶囊对缺血性心律失常大鼠血清中前列环素(PGI2)、血栓素A2(TXA2)及C反应蛋白(CRP)含量的变化，进一步明确其抗心律失常的作用机制。方法 将实验大鼠随机分为空白组、假手术组、模型组、柴胡三参胶囊(青蒿)组(青蒿组)、柴胡三参胶囊(常山)组(常山组)、胺碘酮组、稳心颗粒组，每组10只，观察各组大鼠结扎后心电图改变及血清中PGI2、TXA2及CRP含量变化。结果柴胡三参胶囊能够降低缺血性心律失常的发生率(P<0.05)，升高血清中PGI2水平(P<0.01)，降低TXA2(P<0.05)、CRP(P<0.01)含量。结论 柴胡三参胶囊通过升高血清中的PGI2、降低TXA2及CRP的发挥达到抗心律失常的作用。

关键词：缺血性心律失常；柴胡三参胶囊；前列环素；血栓素A2；C反应蛋白

在心血管系统疾病中，由于各种原因导致的心脏供血不足已是一种病理状态，而这种病理状态得不到及时恢复亦会引发一系列的连锁反应，如各种类型的心肌缺血均可引起心律失常，同时心肌缺血得到治疗后，尚有可能发生再灌注损伤，其常见临床表现形式为恶性心律失常。研究表明炎症反应及细胞微环境的改变是急性心肌梗死发展的一个重要过程常见的炎症时相反应蛋白及氧自由基的大量活化反应，不仅与急性心肌梗死(AMI)密切相关，而且与梗死后心律失常与再灌注损伤的发生均存在密切关系。通过对缺血性心律失常大鼠模型的研究，检测血清中前列环素(PGI2)、血栓素A2(TXA2)的变化，探讨柴胡三参胶囊抗心律失常的机制；检测血清C反应蛋白(CRP)含量，观察柴胡三参胶囊对心肌再灌注损伤的抗炎保护作用。

1材料与方法

1.1实验动物清洁级Wistar大鼠70只，雌雄各半，体重200 g±20 g，由北京维通利华实验动物技术有限公司提供[许可证编号：SCXK(湘)2012-0001，动物合格证号(11400700061625，11400700070275)]。

1.2实验药物与试剂柴胡三参胶囊(SHSS)，湖南中医药大学第一附医院制剂室生产提供，柴胡三参胶囊(青蒿)，批号：140403，柴胡三参胶囊(常山)，批号：140820；CRP试剂盒，由武汉贝茵莱生物科技有限公司提供(批号：201412)；前列环素试剂盒，由武汉贝茵莱生物科技有限公司提供(批号：201412)；血栓素试剂盒，由武汉贝茵莱生物科技有限公司提供(批号：201412)。

1.3实验仪器RWD407型小动物呼吸机，深圳市瑞沃德生命科技有限公司；RM6280型多道生理信号采集处理系统以及图像识别分析系统，成都仪器厂；光学显微镜，上海泸星光学仪器有限公司。

1.4实验分组与给药将大鼠随机分为7组：空白组、假手术组、模型组、柴胡三参胶囊(青蒿)组(青蒿组)、柴胡三参胶囊(常山)组(常山组)、胺碘酮组、稳心颗粒组，每组10只。分别予以生理盐水、相应药物灌胃，连续预给药14 。给药量按成人70 g、大鼠200 体表面积换算(公式为D2=D1×R2÷R1)，并按重量调整剂量。

1.5动物模型制备末次给药30 min后大鼠腹腔注射10%水合氯醛(0.35 mL/100 g)进行麻醉，用生物信号采集器全程记录Ⅱ导联心电图，气管切开、插管、接呼吸机。打开胸腔，分离心包膜，轻掀左心耳，从左心耳下缘处进针，在肺动脉旁出针，结扎左冠状动脉前降支，以Ⅱ导联ST段明显抬高或T波高耸，肉眼结扎线以下心脏表面区域颜色变暗为成功标志，结扎30 min后再灌注40 min。空白组腹腔只麻醉，不开胸、不结扎，假手术组只开胸不结扎。

1.6血清PGI2、TXA2、CRP的检测腹主动脉血4 000 r/min离心，取血清，双抗夹心ELISA法检测血清PGI2、TXA2、CRP含量。

2结果

2.1心电图统计分析在喂养及手术期间，因不明原因突然死亡，或麻醉意外，或多次结扎致大出血等死亡的剔除，未进入心电图统计分析及最后数据统计；术后因恶性心律失常而死亡的大鼠进入心电图统计分析，但不进入最后的数据统计。在实验过程中，因室颤死亡13只，其中模型组4只，死亡率44.4%；青蒿组2只，死亡率12.5%；稳心颗粒组1只，死亡率11.1%；胺碘酮组4只，死亡率40.0%，常山组2只，死亡率22.2%。

2.2各组大鼠心律失常情况及评分与模型组相比，室性早搏(VP)、心室颤动(VF)发生次数、心律失常评分均降低，差异有统计学意义(P<0.01)；青蒿组、常山组与稳心颗粒组比较差异无统计学意义(P>0.05)；而胺碘酮组VP、VF发生次数及心律失常评分明显高于稳心颗粒组，差异有统计学意义(P<0.01)。详见表1。

表1　各组大鼠心律失常情况及评分

2.3各组前列环素、TXA2、CRP比较与模型组比较，青蒿组、常山组前列环素、TXA2、CRP差异有统计学意义(P<0.01)。详见表2。

表2　各组前列环素、TXA2、CRP比较(±s)

3讨论

目前，医学界在心律失常的防治上达成的共识作为药物选择的首要考虑点，重在治疗引起心律失常的病因，而不仅仅是对心律失常的对症治疗。强调病因治疗，即改善产生心律失常的机制，比如改善心肌供血、减轻炎症反应等[1]。从此共识出发，中医中药在心律失常的防治上大有可挖掘之处。心悸的基本病机为少阳不和，治法为和解定悸。柴胡三参胶囊是由小柴胡汤加减而来。方中以柴胡为君，达肝入少阳，疏泄肝郁、升发肝气、和解少阳之邪；配伍黄芩，清泄少阳湿热之邪，柴胡+黄芩经典和法配伍；臣以法半夏下气化痰，丹参活血清心，苦参通利清火，青蒿截邪并配合柴胡和解少阳之邪；党参、甘草缓急益气，调和诸药共为佐使。全方合用标本兼治，邪去而正安，又扶正兼祛邪，以达和解稳律之目的。前期研究已表明柴胡三参胶囊抗心律失常疗效确切[2-5]。

炎症反应是急性心肌梗死发展的一个重要过程，其与梗死后心律失常与再灌注损伤的发生均存在密切关系。相关研究表明：心肌细胞和间质的炎症反应可直接导致膜电位变化[6]。临床研究则认为CRP可作为急性心肌梗死及梗死后并发严重心律失常的预测因子。刘泽军等[7]研究表明CRP与急性心肌梗死并发室性心律失常的发生率呈正相关，并且认为CRP可作为心肌梗死后并发危及生命的室性心律失常的基础性参照。周建峰[8]采用胺碘酮治疗室性心律失常取得较好疗效，并在特发性心律失常、再灌注性心律失常发生率相对低的病例中发现，其血清超敏C反应蛋白含量相对较低。从反面推测超敏C反应蛋白与再灌注心律失常是存在联系的。

缺血心肌在恢复血流再灌注过程中，PGI2/TXA2比值会较缺血状态进一步降低，这会加重再灌注损伤，不利于缺血心肌功能的恢复。动物实验表明：静脉运用TXA2受体阻断剂AH23848可减少再灌注后室颤的发生率。冠状动脉内给予PGI2可减少缺血-再灌注室性心律失常的发生[9]。提示TXA2可诱发再灌注性心律失常，PGI2则具有抗再灌注心律失常作用。

在本实验中，通过制造缺血性心律失常大鼠模型，检测血清中CRP及PGI2、TXA2含量变化，结合心电图统计分析结果表明，心律失常发生率低的柴胡三参胶囊组血清CRP、TXA2含量降低，PGI2含量升高，表明血清前列环素、血栓素及C反应蛋白是柴胡三参胶囊抗缺血性心律失常的作用靶点。

参考文献：

[1]蒋文平.心律失常药物治疗的点评[J].中国心脏起搏与电生理杂志，2009，19(4)：243-245.

[2] 刘建和，易刚强，程丑夫.柴胡三参汤治疗冠心病室性期前收缩临床研究[J].中国中医药信息杂志，2005，12(11)：13-15.

[3] 刘建和，李群，何少平，等.柴胡三参胶囊对大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响[J].中国中医药信息杂志，2012，11(17)：29-30.

[4] 刘建和，何少平，胡熙苒，等.柴胡三参胶囊对心肌缺血心律失常模型大鼠心肌细胞Ca2+及SERCA2a表达的影响[J].中华中医药杂志，2010，25(10)：35-37.

[5] 刘建和，胡熙苒，何少平，等.柴胡三参胶囊对实验性心律失常保护作用的研究[J].中西医结合心脑血管病杂志，2010，8(10)：35-38.

[6] Ward CA，Bazzazi H，Clark RB，et al.Actions of emigrated neutrophils on Na(+) and K(+) currents in rat ventricular myocytes[J].Prog Biophys Mol Biol，2006，90(1-3)：249-269.

[7] 刘泽军，李晚珍，吴礼文.C-反应蛋白与急性心肌梗死并发室性心律失常相关性研究[J].中国医学创新，2013，10(16)：44-45.

[8] 周建峰.胺碘酮治疗心律失常的效果分析及其对血清超敏C反应蛋白的影响[J].中国医药指南，2012，11(10)：532-533.

[9]郭志凌.PGI2/TAX2失平衡与心肌缺血-再灌注[J].心血管病学进展，1995，16(5)：266-269.

(本文编辑郭怀印)

Influences of Chaihu Sanshen Capsule on Serum Prostacyclin，Thromboxan A2and C-reactive Protein in Model Rats with Ischemic Arrhythmia

Liu Jianhe，Wang Jianguo，Wang Min，Liu Jinxia，Zhou Zheng，Tang Yin

The First Affiliated Hospital，Hunan University of Chinese Medicine，Changsha 410007，Hunan，China；Hunan Provincial Key Laboratory of Traditional Chinese Medicine Diagnostics，Hunan University of Chinese Medicine，Changsha 410007，Hunan，China

Abstract：ObjectiveTo investigate the influences of Chaihu Sanshen capsule(CSC) on serum prostacyclin (PGI2)，thromboxane A2 (TXA2) and C-reactive protein(CRP) in model rats with ischemic arrhythmia.Methods The rats were randomly divided into blank group，control group，model group，CSC Qinghao group，CSC Changshan group，amiodarone group，Wenxin Keli group.The electrocardiogram changes，the levels of serum PGI2，TXA2 and CRP were observed.Results The incidence of ischemic arrhythmias，the levels of serum TXA2 and CRP reduced while the levels of serum PGI2 increased in CSC group(P<0.05 or P<0.01).ConclusionCSC can increase the levels of serum PGI2 and reduce the levels of serum TXA2 and CRP，which has antiarrhythmic effects.

Key words：ischemic arrhythmia；Chaihu Sanshen capsule；prostacyclin；thromboxance A2；C-reactive protein

基金项目：湖南省科技厅科研项目(No.2013SK3103)；湖南省中医药管理局重点课题(No.201303)；湖南省重点实验室开放基金计划项目(No.2014XNFZ03)；湖南省科技创新项目投资计划，编号：[2014]658；2015年湖南省学位与研究生教育教改研究课题(No.JG2015B071)

中图分类号：R541.7R285.5

文献标识码：A

doi：10.3969/j.issn.1672-1349.2016.11.010

文章编号：1672-1349(2016)11-1216-03

(收稿日期：2015-12-16)

·基础医学论著/研究·