西门子化学发光测定铁蛋白标本稀释方法的探讨

石爱新 韦敏秀 蓝宇利 李梵川

（广西省南宁市上林县人民医院检验科，广西 南宁 530500）



西门子化学发光测定铁蛋白标本稀释方法的探讨

石爱新 韦敏秀 蓝宇利 李梵川

（广西省南宁市上林县人民医院检验科，广西 南宁 530500）

【摘要】目的 探讨不同的稀释介质与稀释方式对化学发光免疫法测定血清铁蛋白（FER）浓度的影响。方法 使用ADVIACE ntaur CP化学发光分析仪及配套的检测铁蛋白试剂（FER），分别对高浓度铁蛋白标本进行三种不同稀释介质以及稀释倍数的稀释测定，观察三种不同稀释介质以及稀释倍数对测定结果的影响。结果 三种稀释液10倍稀释和50倍稀释测定结果与相应理论值比较，差异都没有统计学意义（P＞0.05），100倍稀释测定结果都明显高于理论值，差异都有统计学意义（P＜0.05 ）。结论 三种稀释液对铁蛋白测定不产生基质效应但稀释方式的选择是否合适将会对测定结果产生显著的影响。

【关键词】稀释；化学发光免疫；铁蛋白

铁蛋白既是贫血的检验指标，也是一种肿瘤标志物，可用于多种肿瘤的诊断和疗效观察［1］，但由于肿瘤患者标本中的铁蛋白浓度往往异常升高，常会超出仪器的检测范围，西门子CP化学发光测定铁蛋白的上限是1650 ng/mL，高于此值报＞1650 ng/mL，需要对标本进行稀释测定才能得出一个确定结果，因此，选择稀释液和稀释倍数就成了一个关健问题。文献报道各种稀释介质对化学发光法检测不同项目基质效应不同［2-3］。

1 材料与方法

1.1 仪器设备：德国西门子全自动化学发光免疫分析仪（ADVIACE ntaur CP）。

1.2 试剂：该仪器配套的检测铁蛋白试剂（FER）。批号：012234。

1.3 原料及样本：质控血清采用仪器试剂配套的高中低值定值质控品，批号分别为：40220测定结果在定值范围内，三个浓度水平CV均＜5%。

1.4 分析方法：用已知铁蛋白确定浓度标本稀释测定铁蛋白，比较不同基质对结果的影响程度，选择可接受的稀释介质；用可接受的稀释介质稀释测定铁蛋白超出线性范围的标本，观察荧光值与铁蛋白浓度的关系，寻求铁蛋白超出线性范围标本适合的测定稀释倍数。

1.5 数据处理：采用SPSS16.0统计软件进行统计分析，用理论值为对照组，三种稀释介质稀释测定结果与理论值的差异配对t检验，以P ＜0.05差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 不同稀释介质测定结果分析：30份已知铁蛋白确定浓度标本，用西门子通用稀释液、0.9%氯化钠溶液、正常人血清分别稀释测定，结果见表1。三种稀释液10倍稀释和50倍稀释测定结果与相应理论值比较，差异都没有统计学意义（P＞0.05），三种稀释介质100倍稀释测定结果都明显高于理论值，差异都有统计学意义（P＜0.05）。

表1 三种稀释介质稀释标本测定铁蛋白结果与稀释倍数理论值结果比较（ng/mL）

2.2 超线性范围样品的稀释测定结果分析：用0.9%氯化钠溶液作为稀释介质，对10份铁蛋白＞1650 ng/mL的标本进行2～128倍比稀释测定。

3 讨 论

铁蛋白是体内铁的主要存在形式，相对分子质量445 kD，由24个亚基组成，其亚基成分分成H和L两类，分量分别为21 kD和19 kD。铁蛋白主要由网关内皮系统的吞筮细胞释放出来，当铁负荷增多时，铁蛋白升高，在血中半寿期为27～30 h，为肝实质细胞所清除，最近发现，血清铁蛋白增高与慢性肾脏疾病、心脑血管疾病、血液系统疾病及许多肿瘤性疾病有关，在疾病时铁蛋白升高，缓解时降低，可作为疾病的动态观察和判断疗效用。因此，能准确的测定铁蛋白含量具有重要现实意义。

本研究用0.9%氯化钠溶液，通用稀释液，正常人血清作为稀释介质稀释测定已知高值铁蛋白标本，50倍内稀释测定结果与理论值具有很好的相关性，表明三种稀释液对铁蛋白测定并没有基质效应，都可以选用，但通用稀释液成本高，正常人血清难以收集，又有被感染风险，测底本也要成本投入，0.9%氯化钠溶液成本低，易得到，比较实用。

30份已知铁蛋白确定浓度标本，100倍稀释测定结果明显高于理论值，表明过度稀释不可取，而10份超高值标本2倍稀释测定结果也明显高于其他稀释倍数的结果，表明稀释倍数不够也不行。免疫反应遵循著名的海德堡曲线，计算曲线呈“S”形，是非线性的，在非检测区曲线的上下端都相对走平，对结果产生较大误差，检验报告结果时，要乘上稀释倍数，所有的互差也同时放大相应的倍数，误差就会更明显。所以，化学发光测定的稀释液和稀释方式的选择应慎重。在临床工作中应结合实际情况多尝试比较，否则将会对测定结果产生显著的影响，影响临床诊断和治疗。

参考文献

［1］ 丁继敏，范维坷.血清铁蛋白与恶性肿瘤［J］.国际检验医学杂志，1993，14（4）:152-154.

［2］ 朱毅，张顺.电化学发光法检测高值甲胎蛋白标本的稀释方法及其沟状效应［J］.肿瘤防治研究，2011，38（4）:465.

［3］ 赵敏，笪宏华.甲功五项化学发光免疫分析的基质效应对临床测值的影响［J］，现代生物医学进展，2012，19（12）:3714-3718.

中图分类号：R556

文献标识码：B

文章编号：1671-8194（2016）02-0032-01