32个居群滇龙胆地上部分龙胆苦苷的含量测定

黄福荣

[摘 要]目的：云南范围内有各个地州都有龙胆科植物分布，为综合利用滇龙胆地上部分资源，充分发挥地方资源优势，为扩大药用部位提供依据。方法：通过现代研究手段，明确滇龙胆中基本化学成分，以高效液相色谱法测定云南省内不同居群的滇龙胆地上部分龙胆苦苷的含量。结论：经高效液相色谱法测定表明，不同居群的滇龙胆地上部分龙胆苦苷含量在0.15%～4.70%之间，平均含量1.79%，具备开发利用价值，可为地方经济服务。

[关键词]滇龙胆；龙胆苦苷；高效液相色谱法

[中图分类号]R284 [文献标识码]A

龙胆草，中药名，为龙胆科植物龙胆、条叶龙胆、三花龙胆和滇龙胆、的根和根茎。龙胆草在我国具有比较悠久的使用历史，具有清热、泻肝、定惊之功效。《本草纲目》记载：“性味苦，涩，大寒，无毒。主治骨间寒热、惊病邪气，继绝伤，定五脏，杀虫毒。”前三种主产于东北地区，药材俗称关龙胆，是全国范围内的主流品种；后一种主产于云南，药材俗称坚龙胆、滇龙胆，是西南和华南地区的主流品种，分布于湖南、广西、贵州、四川、云南等地。龙胆最早记载于《神农本草经》，列为上品，记其：“龙胆，一名陵游。味苦涩，主骨间寒热，惊痫邪气，续伤疤，定五脏，杀蛊毒。久服益智不忘，轻身耐老”。后世历代本草也均收载本品。在中医药应用中，龙胆味苦性寒，能清热燥湿，泻肝胆火。以龙胆为主要药物的经典方剂有龙胆泻肝汤、泻青丸、当归龙荟丸等。而在国外植物药应用中，龙胆也是常用品种，主要用作苦味健胃剂。龙胆根茎呈不规则的块状，长1～3cm，直径0.3～1cm；表面暗灰棕色或深棕色，上端有茎痕或残留茎基，周围和下端着生多数细长的根。根圆柱形，略扭曲，长10～20cm，直径0.2～0.5cm；表面淡黄色或黄棕色，上部多有显著的横皱纹，下部较细，有纵皱纹及支根痕。质脆，易折断，断面略平坦，皮部黄白色或淡黄棕色，木部色较浅，呈点状环列。气微，味甚苦。坚龙胆 表面无横皱纹，外皮膜质，易脱落，木部黄白色，易与皮部分离。龙胆泻肝汤是龙胆在临床上应用最为广泛，泻肝胆实火和清利肝经湿热。随着临床研究的深入，应用面不断地扩大，主要的有以下几个方面：治疗肝胆疾病、高血压、急性肾盂肾炎、病毒性角膜炎、皮肤病、急性咽炎、慢性支气管炎、上呼吸道感染、结膜炎等。在民间，龙胆草泡水喝是比较常见的应用，不仅操作简单，同时还可以有效的促进这种药材对身体的保健以及治病作用。

1 仪器与试药

主要仪器和设备 VI500型高效液相色谱仪，FA3204B电子分析天平（上海精科---上海天平仪器厂），HCP-18超声清洗器；多功能恒温超声波提取机。

主要试剂和药品 龙胆苦苷对照品，甲醇（色谱纯溶剂），纯化水（超滤膜过滤）；提取处理等用分析纯试剂。采集于云南省内不同地区的滇龙胆药材的地上部分，共32份样品，生药鉴定均为龙胆科植物坚龙胆G. rigescens Franch.

2 方法与结果

2.1 色谱条件

GP-C18色谱柱（4.6mm×250mm，5μm）：甲醇—水（35：65）为流动相，1.0ml/min流动速度；30℃柱温；270nm为检测波长；10μl的进样量。色谱显示龙胆苦苷对照品吸收峰保留时间约12min，拖尾因子1.05，理论板数大于3000，分离度大于2，符合含量测定要求（如图1）。

2.2 对照品溶液配制

用电子分析天平精密称取龙胆苦苷对照品，加甲醇制成浓度为5mg/ml的溶液，浓度测定后作为对照品溶液。

2.3 供试品溶液制备

依次称取滇龙胆地上部分材料，50℃下烘干，粉碎，过7号筛，精密称取0.5g，加甲醇10ml，放置过夜，超声提取40min，初滤，微孔滤膜（0.45μm）过滤，取续滤液为供试品液。

2.4 线性关系的考察

精密称取龙胆苦苷对照品用甲醇制成储备液（5mg/ml），分别精密吸取储备液各1ml，甲醇稀释成0.01mg/ml，0.05 mg/ml，0.1 mg/ml，0.5 mg/ml，1 mg/ml，1.5 mg/ml，2 mg/ml，2.5 mg/ml浓度的对照品溶液，滤过，取10μl进样，按照1.2.1项色谱条件进行HPLC分析，以峰面积Y对进样量X进行回归处理，得线性回归方程：Y=803383.36*X-10226.04，r=0.9999，即龙胆苦苷进样量在0.1μg～25μg时，峰面积和进样量呈现良好的线性关系。

2.5 重现性考查

取同一居群供试药材粉末5份，平行制备5份供试品样品溶液，在GP-C18色谱柱（4.6mm×250mm，5μm）：甲醇—水（35：65）为流动相，1.0ml/min流动速度的色谱条件测定测得结果为RSD1.35%（n=5）。

2.6 样品测定

取各居群的供试品样品粉末0.5g，制成样品溶液，按上述色谱条测定，各居群供试品中，龙胆苦苷含量如下：（表一）

3 结果与讨论

含量测定结果显示，各居群的滇龙胆地上部分均含有一定量龙胆苦苷，最低含量0.15%，最高含量4.70%之间，平均含量1.79%，具有可开发利用的价值。

目前，云南省内有很多地州都在人工栽培龙胆草，有的地方栽培面积都较大，但目前主要是用其根及根茎，地上部分只是在民间有些应用，但都没有系统规范的开发利用，使有限的药材资源浪费了。若能有规模的加以开发利用，将会大大改善生态环境，还能为农村增加经济收入，带动农村和社会经济的进一步发展；提高资源的综合利用，促进生态环境良性发展，从一定程度缓解资源匮乏的状态。

[参考文献]

[1] 国家药典委员会.中国药典2005年版（一部）[M].北京化学工业出版社，2005，64

[2] 谢观.中国医学大辞典第四册[M].北京：中国书店出版社，1988