滇龙胆地上部分资源综合利用的化学研究

黄福荣

[摘 要]目的：通过现代化的研究手段，对滇龙胆地上部分的化学成分进行测定，为综合利用滇龙胆地上部分资源，扩大药用部位提供依据。方法：利用色谱、光谱等方法对其化学成分进行研究并进行结构鉴定。结论：得到6个单体化合物，其中3个分别为龙胆苦苷、β-谷甾醇、熊果酸，剩余3个有待鉴定。

[关键词]滇龙胆；龙胆苦苷

[中图分类号]R282 [文献标识码]A

龙胆来源于龙胆科植物条叶龙胆Gentiana manshurica Kitag.、龙胆G.scabra Bge.、三花龙胆G.triflora Pall.、坚龙胆G.Rigescens Franch.的干燥根及根茎。为多年生草本，高30-60厘米；根黄白色，绳索状，长20厘米以上。茎直立，粗壮，常带紫褐色，粗糙。叶对生，卵形或卵状披针形，长3-7厘米，宽1-2厘米，有3-5条脉，急尖或渐尖，无柄，边缘及下面主脉粗糙。花簇生茎端或叶腋；苞片披针形，与花萼近等长；花萼钟状，长2.5-3厘米，裂片条状披针形，与萼筒近等长；花冠筒状钟形，蓝紫色，长4-5厘米，裂片卵形，尖，褶三角形，稀二齿裂；雄蕊5，花丝基部有宽翅；花柱短，柱头2裂。蒴果矩圆形，有柄；种子条形，边缘有翅。分布于朝鲜，苏联，日本，及我国黑龙江、吉林、辽宁、浙江等地。生草甸、灌丛或林缘。根入药，能去肝胆火。前三种主产于东北地区，药材俗称关龙胆，是全国范围内的主流品种；后一种主产于云南，药材俗称坚龙胆、滇龙胆，是西南和华南地区的主流品种，生于海拔1100-3000m的山地、草地、灌丛中、林下及山谷，分布于湖南、广西、贵州、四川、云南等地。龙胆草为龙胆科龙胆属植物。又名龙胆（《本经》），陵游（《本经》），草龙胆（《本草图经》），苦龙胆草、地胆草（《滇南本草》），胆草（《药品化义》），山龙胆（《浙江中药手册》），四叶胆（《广西中兽医药植》），水龙胆（《江苏植药志》）。根及根茎入药。味苦，性寒。归肝、胆经。有清热燥湿，泻肝胆实火的作用。主治高血压，头晕耳鸣，胆囊炎、急性传染性肝炎、阴部湿痒、湿热黄疸、疮疖痈肿，口苦和惊风等症，为保肝利胆之良药。

龙胆最早记载于《神农本草经》，列为上品，记其：“龙胆，一名陵游。味苦涩，主骨间寒热，惊痫邪气，续伤疤，定五脏，杀蛊毒。久服益智不忘，轻身耐老”。后世历代本草也均收载本品。在中医药应用中，龙胆味苦性寒，能清热燥湿，泻肝胆火。以龙胆为主要药物的经典方剂有龙胆泻肝汤、泻青丸、当归龙荟丸等。而在国外植物药应用中，龙胆也是常用品种，主要用作苦味健胃剂[4]。龙胆根茎呈不规则的块状，长1～3cm，直径0.3～1cm；表面暗灰棕色或深棕色，上端有茎痕或残留茎基，周围和下端着生多数细长的根。根圆柱形，略扭曲，长10～20cm，直径0.2～0.5cm；表面淡黄色或黄棕色，上部多有显著的横皱纹，下部较细，有纵皱纹及支根痕。质脆，易折断，断面略平坦，皮部黄白色或淡黄棕色，木部色较浅，呈点状环列。气微，味甚苦。坚龙胆 表面无横皱纹，外皮膜质，易脱落，木部黄白色，易与皮部分离。

现代化学成分研究显示，滇龙胆根含裂环烯醚萜甙类苦味成份：龙服苦甙，当药苦甙，当药甙，痕量苦龙胆酯甙，痕量苦当药酯甙；苦甙总含量5.10%，龙胆苦甙含量5.01%。地上部分含龙胆碱，秦艽碱乙（gentianidine），秦艽碱丙（gentianal），β-谷甾醇（β-sitosterol）。但对滇龙胆地上部分至今尚无化学成分研究的报道。龙胆泻肝汤是龙胆在临床上应用最为广泛，泻肝胆实火和清利肝经湿热。随着临床研究的深入，应用面不断地扩大，主要的有以下几个方面：治疗肝胆疾病、高血压、急性肾盂肾炎、病毒性角膜炎、皮肤病、急性咽炎、慢性支气管炎、上呼吸道感染、结膜炎等。

目前尚作为废弃物的滇龙胆地上部分，若能开发利用，将会使龙胆药物资源更为充分的利用。滇龙胆资源主要分布云南中部及中南部的丘陵山区，人工种植的发展也集中在该地区，其地上部分资源的综合利用，不仅提高龙胆种植产业的经济效益，还能在一定程度上缓解龙胆的资源紧张态势。

1 仪器与材料

材料：硅胶G和薄层层析板为青岛海洋化工厂产品；Sephadex LH-20凝胶。

常用试剂：环己烷、乙酸乙酯、氯仿、丙酮、甲醇。

滇龙胆地上部分药材于2015年8月采集于云南省境内，经云南省农业科学院药用植物研究所张金渝副研究员鉴定。

2 提取与分离

2.1 提取

取638.4g干燥的滇龙胆地上部分药材，粉碎成粗粉，用95%乙醇回流提取，减压回收，得到浸膏102.2g，将其悬浮于水中，用乙酸乙酯和正丁醇分别萃取，回收溶剂得到正丁醇部分39g（Fr-A）、乙酸乙酯部分36g（Fr-B）、水层弃去。

2.2 分离

Fr-A（正丁醇萃取部分）用甲醇溶解，硅胶G（45g）拌样，经硅胶柱色谱分离，用氯仿-甲醇（20：1至3：1）进行梯度洗脱，收集流份（500ml/份），将洗脱液减压回收，用TLC检查，合并色点相同的流份，得到2个部分（Ⅰ、Ⅱ、）。

其中，Ⅰ部分静置后析出白色粉末用甲醇-丙酮反复重结晶，经TLC检查为一纯品，标记为化合物Fr-A-1（986mg）。Ⅱ部分回收溶剂，约重3.4g，经反复凝胶柱层析后，在收集液（18-29瓶）中有黄白色粉末析出，用甲醇反复重结晶后，得到一纯品，标记为化合物Fr-A-2（235mg）；在收集液（39-62瓶）中析出黄色颗粒状结晶，TLC检查发现含有少量的杂质，将粉末用甲醇溶解后过凝胶柱色谱，重结晶后得到一纯品，标记为化合物Fr-A-3（121mg）。

Fr-B（乙酸乙酯部分）用乙酸乙酯溶解，硅胶G（40g）拌样，室温挥干后经硅胶柱色谱分离，用环己烷-乙酸乙酯（0：100-100：0）梯度洗脱，收集流份（250ml/份），将洗脱液减压回收，用TLC检查，合并色点相同的流份，得3个部分（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ）。

其中，Ⅰ部分为白色蜡状固体，经TLC初步检查为一纯品，标记为化合物Fr-B-3（88mg）；Ⅱ流份静置后析出无色针状结晶，滤出后TLC检查为一纯品，标记为化合物Fr-B-1（45mg）；Ⅲ流分静置后析出白色粉末，滤出后TLC检查为一纯品，标记为化合物Fr-B-2（23mg）。

3 实验结果

从滇龙胆地上部分中，用各种色谱方法分离纯化，共得到6个单体化合物，即化合物Fr-A-1（986mg）、Fr-A-2（235mg）、Fr-A-3（121mg）、Fr-B-1（45mg）、Fr-B-2（23mg）、Fr-B-3（88mg）。

化合物Fr-A-1：经TLC检查和龙胆苦苷对照品Rf值、显色现象一致，鉴定为龙胆苦苷，如：图-1。

化合物Fr-B-1：经TLC分析和β-谷甾醇对照品的Rf值、显色现象一致，鉴定为β-谷甾醇，如：图-2。

化合物Fr-B-2：经TLC分析和熊果酸对照品Rf值、显色现象一致，鉴定为熊果酸，如：图-3。

化合物Fr-A-2、化合物Fr-A-3、化合物Fr-B-3的结构鉴定工作尚待进行。

[参考文献]

[1] 国家药典委员会.中国药典2005年版（一部）[M].北京化学工业出版社，2005.

[2] 国家中医药管理局《中华本草》编委会.中华本草[M].上海科学技术出版社，1999.

[3] 国家药典委员会.中国药典2005年版（一部）[M].北京化学工业出版社，2005.

[4] 谢观.中国医学大辞典第四册[M].北京：中国书店出版社，1988.