亚洲人群CYP17(-34T/C)基因多态性与子宫内膜异位症易感性的Meta分析

程雯，翟东霞，张丹英，姚睿嫔，王汝倩，俞超芹

(第二军医大学长海医院中医系，上海　200433)

亚洲人群CYP17(-34T/C)基因多态性与子宫内膜异位症易感性的Meta分析

程雯，翟东霞，张丹英，姚睿嫔，王汝倩，俞超芹*

(第二军医大学长海医院中医系，上海200433)

【摘要】目的应用Meta分析探讨亚洲人群中细胞色素氧化酶17基因(CYP17)(-34T/C) 基因多态性和子宫内膜异位症(EMs)易感性的关系。方法检索Pubmed、中国知网、万方、中国生物医学文献数据库(CBM)等中、英文数据库中发表的关于亚洲人群CYP17 (-34T/C)基因多态性和EMs易感性的文献。对文献进行质量评价、筛选和提取相关病例对照研究资料，利用R软件进行Meta 分析，计算合并的比数比(OR)及其95%可信区间(CI)。结果 共纳入文献6篇，累计病例组662例，对照组937例。分析结果显示：等位基因对比模型(T vs. C)：OR=1.283，95%CI：0.948-1.737；杂合子模型(TC vs. CC)：OR=1.181，95%CI：0.919-1.518；纯合子模型(TT vs. CC)：OR=1.612，95%CI：0.899-2.889；显性模型(TT+TC vs. CC)：OR=1.320，95%CI：0.932-1.871；隐性模型(TT vs. TC+CC)：OR=0.716，95%CI：0.456-1.123。结论本次Meta分析结果显示，在亚洲人群中CYP17(-34T/C)基因多态性与EMs易感性并无显著相关性，但需要开展更多设计细致、实施良好的大样本量病例-对照研究以得到更科学可信的结论。

【关键词】CYP17；基因多态性；子宫内膜异位症；Meta分析

Methods： Databases from Pubmed，CNKI，Wanfang and CBM were collected，and the relevant papers and literatures were analyzed by Meta-analysis. Crude odds ratio (OR) with 95% confidence interval (CI) was used to assess the strength of association.

Results： A total of 6 studies including 662 patients and 937 controls were identified. The pooled results showed no association between polymorphism T→C of geneCYP17 and endometriosis risk in the Asian population (T vs. C：OR=1.283，95%CI：0.948-1.737；TC vs. CC：OR=1.181，95%CI：0.919-1.518；TT vs. CC：OR=1.612，95%CI：0.899-2.889；TT+TC vs. CC：OR=1.320，95%CI：0.932-1.871 and TT vs. TC+CC：OR=0.716，95%CI：0.456-1.123).

Conclusions： The meta-analysis suggested that polymorphism of gene CYP17(-34T/C)was not associated with endometriosis susceptibility in Asian population. Considering the limited sample size and ethnicity included in our meta-analysis，an updated meta-analysis needs to be conducted when more well-designed studies are published.

(JReprodMed2016，25(6)：487-492)

子宫内膜异位症(EMs)是子宫内膜种植于子宫腔以外部位的妇科疾病，已有研究证实EMs具有一定的遗传特征[1]。育龄妇女中EMs的发病率约为10%～15%，它是导致妇女痛经、不孕以及盆腔疼痛等症状的重要原因之一，EMs的发生严重影响育龄妇女的生活质量[2]。因此，探索EMs的发病机制并寻找有效的治疗手段是妇科领域刻不容缓的课题之一。

基因多态性已经证实与EMs发病具有一定的联系，其中以激素合成、代谢相关的基因研究最多，例如CYP17。CYP17基因位于10号染色体，在激素合成中起着重要作用[3]。CYP17(-34T/C)多态位点位于5’非编码区翻译起始点-34 bp处，T-C突变后单个碱基的替换产生了限制性内切酶MspA1的酶切位点，继而产生两种等位基因Al(T)和A2(C)[4]，当等位基因A2存在时，可以增加基因的转录效率，提高酶的活性，使雌激素合成增多，诱发EMs[5]。CYP17(-34T/C)基因多态性与EMs易感性的研究较多，然而，分子流行病学结果(尤其是在不同人种中的结果)并不一致[6-7]。目前的研究主要集中在欧洲的白种人及亚洲的黄种人，其中涉及白种人的研究可查到3篇，分别涉及英国人[8]、土耳其人[9]及意大利人[10]，3篇研究的结果一致，提示CYP17(-34T/C)基因多态性与EMs发病无显著相关性；涉及亚洲人的研究较多，地区涉及日本、中国大陆及中国台湾等，但研究结果存在较大差异，尚无统一结论。本文拟采用Meta分析更精确地评估亚洲人群中CYP17(-34T/C)基因多态性与EMs易感性之间的关系。

资料与方法

一、数据收集

通过计算机检索Pubmed、Elesevier等外文文献数据库中2015年6月前公开发表的文献，检索关键词包括 CYP17、cytochrome P450c17 gene、endometriosis、genetic polymorphism、SNP、gene mutation，依次分别组合。检索中国知网(CNKI)、万方、维普、中国生物医学文献数据库(CBM)、中文生物医学期刊/会议文献数据库(CMCC/CMAC)等中文文献数据库在2015年6月前公开发表的期刊、会议文献、学位论文，检索词为子宫内膜异位症、CYP17、细胞色素氧化酶17基因、基因多态性、突变、SNP，依次分别组合。手工检索全国妇产科学术会议及中国中西医结合学会妇产科专业委员会会议论文集；查阅检索到所有文献的参考文献索引，手工检索相关文献。

二、文献纳入标准和排除标准

纳入标准：(1)有关亚洲人群的CYP17(-34T/C)基因多态性与EMs发病风险的原始研究；(2)运用独立的病例-对照试验设计；(3)可获得基因型分布频数或相关数据；(4)各研究中，对照群体基因型分布均符合Hardy-Weinberg(HWE)平衡。

排除标准：非临床论著(包括综述、Meta分析等)、研究对象为非亚洲人群、重复报告、文献中不能准确获得CYP17的各基因型分布、对照群体基因型分布显著偏离HWE平衡的研究。

三、质量控制

(1)严格根据入选标准收集相关文献及数据；(2)由两位研究者分别对文献进行整理、摘录。并交叉核对纳入文献的结果，对有分歧的文献通过讨论或由第3位研究者决定其是否纳入。(3)数据库建立，数据由双人提取并双机录入，以确保数据提取和录入的准确性。

四、统计学分析

通过计算下列基因型模型获得OR值及其95%CI，用以评估亚洲人群的CYP17(-34T/C)基因多态性与EMs发病风险的关联强度。基因型模型：等位基因对比模型(T vs. C)、杂合子模型(TC vs. CC)、纯合子模型(TT vs. CC)以及显性模型(TT+TC vs. CC)和隐性模型(TT vs. TC+CC)。根据异质性(I2)大小选择合适的效应模型，I2>50%时选择随机效应模型；I2≤50%时选择固定效应模型。发表偏倚应用Egger’s test进行评价，P<0.05为有发表偏倚。上述统计分析均采用R软件(R-3.2.0)进行，P<0.05为差异具有统计学意义。

结果

一、研究资料的基本情况

根据我们的检索条件，共6篇文献纳入研究(纳入流程见图1，所有文献的基因频率分布见表1)，其中中国大陆[11-12]、中国台湾[13-14]、日本[8，15]各两篇研究。一共662例EMs患者和937例对照个体纳入本Meta分析。

图1　文献筛选流程图

二、Meta分析

各基因模型合并结果及异质性如下：等位基因对比模型(T vs. C)：OR=1.283，95%CI：0.948-1.737，I2=76.1%(图 2)；杂合子模型(TC vs. CC)：OR=1.181，95%CI：0.919-1.518，I2=0%(图 3)；纯合子模型(TT vs. CC)：OR=1.612，95%CI：0.899-2.889，I2=73.4%(图 4)；显性模型(TT+TC vs. CC)：OR=1.320，95%CI：0.932-1.871，I2=52.5%(图 5)；隐性模型(TT vs. TC+CC)：OR=0.716，95%CI：0.456-1.123，I2=70.4%(图6)。分析结果显示，CYP17(-34T/C)基因多态性并没有增加亚洲人群中EMs的发病风险。

三、敏感性和发表偏倚分析

将上述基因型模型中单个研究逐个排除后重新计算获得OR值及其95%CI，探讨单个研究对于整体分析的影响程度及Meta分析的结果稳健性。结果显示排除单个研究后，Meta分析结果均未发生显著变化，提示本研究中Meta分析的结果是稳健、可信的。采用Egger’s test评价其发表偏倚，结果显示各基因型模型中未发现显著偏倚。

表1　Meta分析纳入文献的基本资料

图2　等位基因对比模型(T vs. C)与EMs易感性的Meta分析

图3　杂合子模型(TC vs. CC)与EMs易感性的Meta分析

图4　纯合子模型(TT vs. CC)与EMs易感性的Meta分析

图5　显性模型(TT+TC vs. CC)与EMs易感性的Meta分析

图6　隐性模型(TT vs. TC+CC)与EMs易感性的Meta分析

讨论

EMs的发生发展受到体内性激素水平的影响，而调控性激素水平的药物也已经被证实对于EMs有一定的治疗效果[16-19]。另外，临床数据表明EMs具有遗传背景[20]，所以，性激素合成、代谢相关基因的单核苷酸多态性与EMs发生的联系也被越来越多的研究者关注。

CYP17基因与血清雌激素及孕激素浓度密切相关。一系列研究发现，CYP17(-34T/C)基因多态性与多种妇科疾病易感性有一定联系，包括子宫内膜癌[21]、乳腺癌[22]以及多囊卵巢综合征[23]，但其与EMs发生是否相关目前还存在争议。CYP17在雌激素的生物合成过程中非常重要，其是雌激素合成过程中的限速酶，将孕酮、孕烯醇酮转化为17α羟孕烯醇酮、雄烯二酮(AND)和脱氢表雄酮，继而转化为睾酮、雌二醇、雌酮。当其启动子-34位碱基T-C突变后，该处碱基序列由CCACT变为CCACC，从而增加了一个CG盒(SP1结合位点)，使得转录因子结合位点增加，上调CYP17基因的转录水平，增加了酶的活性，最终使雌激素的合成水平升高[5]。高浓度的雌激素为内膜组织异位种植和生长提供有利微环境，促进EMs的发生发展[24]，提示CYP17(-34T/C)基因多态性和EMs易感性存在联系。然而，这一推论并未在一些临床病例-对照研究中得到验证，关于欧洲白种人的研究提示二者无显著关联，关于亚洲人群的研究目前还存在争议[9，15]。因此，本研究中我们利用Meta分析，对已有研究进行汇总，共纳入6篇病例-对照研究文献(662例EMs患者和937例对照)探索亚洲人群中CYP17基因多态性与EMs易感性之间的关系。结果显示，在亚洲人群中，CYP17(-34T/C)基因多态性与EMs易感性无显著相关性。

但我们的研究尚存在一些不足，因为本次研究只纳入中国大陆、中国台湾及日本的研究数据，缺少亚洲其它地区的实验数据；纳入的文献中均以医院基础的非EMs患者人群作为对照组，容易受到其它疾病的影响；未提供详细的基因型分布数据的文献(如赵欣等[25]对432例EMs患者的研究)不纳入本次分析，纳入文献数和样本量相对较小；并且本次分析中部分基因型模型存在较高的异质性，缺乏对于病例的亚分类是造成高异质性的重要原因，但因为纳入文献中患者生活的环境因素、生活方式、家族史等无法获得，且同一地区纳入分析的文献不足3篇，无法进行更深入的亚分类分析。

综上所述，本次Meta分析结果显示，在亚洲人群中CYP17(-34T/C)基因多态性与EMs易感性并无显著相关性。但由于目前的临床病例研究中，缺少生活习惯、环境因素以及生理周期情况等亚分类，且缺少健康人群纳入对照，容易出现假阴性的结果等。针对上述不足，本课题组认为需要对CYP17(-34T/C)基因多态性与EMs易感性的关系开展更多设计细致、实施良好的大样本量病例-对照研究，从而得到更科学、可信的结论。

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[编辑：肖晓辉]

Meta analysis of CYP17 (-34T/C) gene polymorphism and endometriosis susceptibility in Asian population

CHENG Wen，ZHAI Dong-xia，ZHANG Dan-ying，YAO Rui-pin，WANG Ru-qian，YU Chao-qin*

ChanghaiHospitalofTraditionalChineseMedicine，SecondMilitaryMedicalUniversity，Shanghai200433

【Abstract】Objective： To estimate the relationship between CYP17 (-34T/C) gene polymorphism and endometriosis susceptibility in Asian population.

Key words：CYP17；Gene polymorphism;Endometriosis；Meta-analysis

DOI：10.3969/j.issn.1004-3845.2016.06.002

【收稿日期】2015-10-20；【修回日期】2015-12-23

【基金项目】国家自然科学基金重点项目(30930113)

【作者简介】程雯，女，浙江嘉兴人，硕士，住院医师，中西医结合临床专业.(* 通讯作者)