系统性红斑狼疮患者血清维生素D水平与维生素D抗体及自身抗体关系的研究

邢桂芝，王志敏，石哲群，佟胜全，房　成，褚金龙

(1.唐山市工人医院 检验科，河北 唐山063000；2.河北大学附属医院 风湿免疫科；3.唐山市康复医疗中心)



系统性红斑狼疮患者血清维生素D水平与维生素D抗体及自身抗体关系的研究

邢桂芝1，王志敏2*，石哲群3，佟胜全3，房成1，褚金龙1

(1.唐山市工人医院 检验科，河北 唐山063000；2.河北大学附属医院 风湿免疫科；3.唐山市康复医疗中心)

摘要：目的观察系统性红斑狼疮(SLE)患者血清25羟基维生素D3(25-OH-D3)水平与疾病活动度的相关性，研究其与维生素D抗体(VD-Ab)及自身抗体的关系，并探讨其临床意义。方法收集资料完整的90例SLE患者及60例健康志愿者的血清标本。应用化学发光法测定血清25-OH-D3水平，酶联免疫(ELISA)法测定血清VD-Ab水平，免疫斑点法测定自身抗体。采用SPSS 13.0软件进行数据分析。结果病例组血清25-OH-D3水平为10.29±5.74 ng/ml，对照组血清25-OH-D3水平为13.72±5.39ng/ml，两组比较，差异有统计学意义，P<0.05。病例组血清VD-Ab水平为792.2±450.7 nmol/L，对照组为705.3±280.2 nmol/L，差异无统计学意义，P>0.05。SLE患者血清25-OH-D3水平与VD-Ab水平无明显相关性(r=-0.120，P>0.05)，与SLEDAI呈负相关(r=-0.417，P<0.01)。SLE患者抗dsDNA抗体、抗组蛋白抗体、抗心磷脂抗体阳性组血清25-OH-D3水平低于阴性组，P<0.05。抗nRNP抗体、抗Sm抗体、抗SSA抗体、抗Ro52抗体、抗SSB抗体、抗核小体抗体、抗核糖体P蛋白抗体阳性组与阴性组血清25-OH-D3水平比较差异无统计学意义，P>0.05。结论SLE患者血清25-OH-D3水平低下，与疾病活动度负相关。SLE患者血清维生素D水平降低与VD-Ab无关，可能与抗dsDNA抗体、抗组蛋白抗体、抗心磷脂抗体有关，维生素D在SLE发病中起重要作用。

关键词：系统性红斑狼疮；25-羟-维生素D3；维生素D抗体；自身抗体

(ChinJLabDiagn,2016,20:0592)

系统性红斑狼疮(SLE)是一种多脏器功能损害的自身免疫性疾病，以血清中出现多种自身抗体为特征。研究发现，维生素D与SLE疾病活动相关，它可能是一种免疫调节剂[1-2]。维生素D参与T淋巴细胞、树突状细胞、单核-巨噬细胞、B细胞等的增殖与分化，以及抑制细胞因子、抗体的产生[3]。维生素D的缺乏可能与维生素D抗体(VD-Ab)有关[4]，然而，该结论尚有争议。本文旨在观察SLE患者体内25羟基维生素D3(25-OH-D3)及VD-Ab的水平及两者的相关性，研究25-OH-D3水平与自身抗体的关系，并探讨维生素D在SLE发病中的可能作用。

1资料与方法

1.1临床资料收集2013年11月-2015年3月在唐山市工人医院风湿免疫科住院，资料完整的SLE患者为病例组。SLE患者共90例，其中女79例，男11例，年龄(37±13)岁；入选患者具备以下条件：(1)均符合1997年ACR制定的SLE分类标准或2009年ACR修订的SLE诊断标准。(2)初发或未服用过钙剂、维生素D及维生素D类似物。(3)未合并其他自身免疫性疾病及甲状腺功能亢进等影响体内维生素D代谢的疾病。以60例健康志愿者为对照组，其中女53例，男7例，年龄(35±10)岁。病例组和对照组的年龄及性别比较，差异无统计学意义，P>0.05。

1.2实验方法研究对象均于次日晨起留取空腹静脉血3 ml，静止30 min后以3 000 r/min离心5 min，再取上清液-80℃保存。25-OH-D3水平由北京大学第三医院化验室采用化学发光法检测。使用北京诚林生物科技有限公司进口分装的人维生素D抗体ELISA试剂盒(批号LOT201410)测定VD-Ab水平，操作严格按照试剂盒使用说明书。自身抗体由唐山工人医院应用免疫斑点法测定。

2结果

2.1病例组和对照组血清25-OH-D3及VD-Ab水平的比较见表1。

表1　两组血清25-OH-D3及VD-Ab水平的比较

注：与对照组比较，*P<0.05

2.2SLE患者血清25-OH-D3水平与VD-Ab水平无明显相关，r=-0.120，P>0.05。

2.3SLE患者血清25-OH-D3水平与疾病活动度的相关性根据SLE疾病活动性指数积分表(systemic lupus erythematosus disease activity index，SLEDAI)对SLE患者进行评分，SLE患者血清25-OH-D3水平与SLEDAI呈负相关，相关系数r=-0.417，P<0.01。

2.4SLE患者血清25-OH-D3水平与自身抗体的关系根据自身抗体阴性或阳性分为两组，分别比较两组间血清25-OH-D3水平，抗dsDNA抗体、抗组蛋白抗体、抗心磷脂抗体阳性组与阴性组25-OH-D3水平比较差异有统计学意义，P<0.05；抗nRNP抗体、抗Sm抗体、抗SSA抗体、抗Ro52抗体、抗SSB抗体、抗核小体抗体、抗核糖体P蛋白抗体阳性组与阴性组25-OH-D3水平比较差异无统计学意义，P>0.05(表2)。

表2SLE患者血清25-OH-D3水平与自身抗体的关系

自身抗体结果n25-OH-D3(ng/ml)t/zP抗dsDNA抗体+388.3±4.2-3.4120.003-5211.7±5.8抗nRNP抗体+289.0(5.8-13.0)-0.2350.814-629.2(5.2-13.6)

3讨论

流行病学调查显示，维生素D的缺乏与许多慢性病，如自身免疫性疾病、癌症、心血管疾病、糖尿病、感染性疾病等，有着密切的关系[3]。近年，越来越多的研究发现，SLE患者体内的维生素D水平出现明显下降[4-5]。多项研究发现，SLE患者维生素D水平与SLE疾病活动度呈负相关。Ritterhouse LL等[6]提出，25-OH-D3与系统性红斑狼疮临床活动、抗C1q抗体、抗dsDNA抗体相关。Munoz L E等[7]提出，SLE患者血清25-OH-D3水平与舒张压、空腹血糖、胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白、BMI、蛋白尿和补体C3相关。本研究通过对比发现，SLE患者血清25-OH-D3水平低于健康对照组，且维生素D水平与SLEDAI明显负相关，与国内外研究相一致。本实验将维生素D水平不足定义为25-OH-D3<20 ng/mL，健康对照组血清25-OH-D3水平也明显低于参考值，这表明维生素D的缺乏可能是个普遍性问题。本研究纳入SLE患者基本为初发，且未服用过钙剂或维生素D类似物等影响体内维生素D代谢的药物，SLE患者维生素D水平降低，考虑其可能与SLE发病相关，维生素D可能有免疫调节作用。SLE患者体内维生素D水平降低，除与年龄、种族、阳光暴露、使用防晒霜、吸烟、某些药物、皮肤色素沉着、饮食摄入和遗传等相关外，有学者提出维生素D降低可能与SLE患者体内产生VD-Ab有关，尤其是抗磷脂抗体综合征患者体内存在 VD-Ab[8]，而本研究并未发现SLE患者血清VD-Ab水平高于健康对照组，也未发现25-OH-D3与VD-Ab的相关性，与Ganley I G 等[9]研究结果相一致，SLE患者维生素D水平降低可能与VD-Ab无关，而与环境、免疫等多种因素相关。

维生素D缺乏可能与SLE患者的免疫异常相关，因此，有学者猜测，维生素D缺乏参与自身抗体的产生[10]。在此之前，已经通过体外研究证实，维生素D阻止B细胞分化，抑制B细胞抗体及自身抗体的产生[11]。也有报道认为，维生素D缺乏与凋亡细胞的清除机制相关，从而导致ANA过多的产生[12]。本研究将自身抗体阴性与阳性进行分组，发现抗dsDNA阳性组血清25-OH-D3水平低于抗dsDNA阴性组，与CC Mok等[13]人研究相一致。此外，本研究发现，抗组蛋白抗体、抗心磷脂抗体阳性组血清25-OH-D3水平均低于阴性组。抗组蛋白抗体与SLE疾病活动程度相关，且对狼疮肾脏疾病的特异性高于抗dsDNA抗体[14-15]，这间接反应维生素D水平降低可能与狼疮肾炎相关。抗心磷脂抗体阳性组维生素D降低，可能由该抗体消耗维生素D有关。然而，本研究并未发现抗nRNP抗体、抗Sm抗体、抗SSA抗体、抗Ro52抗体、抗SSB抗体、抗核小体抗体、抗核糖体P蛋白抗体阳性组与阴性组25-OH-D3水平的差异，有待于进一步的研究。

在狼疮动物模型中，补充维生素D可以抑制疾病活动。近年来，越来越多的文献提示SLE患者补充维生素D的重要性，它可能对SLE起到预防和治疗的作用，维生素D可能成为SLE等自身免疫性疾病的背景用药。然而，补充维生素D是否可以缓解SLE疾病活动度，以及SLE患者如何补充维生素D，仍需要大规模的研究证实。

参考文献：

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[13]CC Mok,DJ Birmingham,LY Ho,et al.Vitamin D deficiency as marker for disease activity and damage in systemic lupus erythematosus:a comparison with anti-dsDNA and anti-C1q[J].Lupus,2012,21(1):36.

[14]Hollis BW.Circulating 25-hydroxyvitamin D levels indicative of vitamin D sufficiency:implications for establishing a new effective dietary intake recommendation for vitamin D[J].J Nutr,2005,135(2):317.

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Study of Relationships between 25-Hydroxyvitamin D3 and both Vitamin D Antibodies and Autoantibodies in Systemic Lupus Erythematosus

XINGGui-zhi,WANGZhi-min,SHIZhe-qun,etal.

(TangshanWorker′sHospital,Tangshan063000,China)

Abstract:ObjectiveTo observe the associations of Serum 25-hydroxyvitamin D3 (25-OH-D3) levels with disease activity inPatients with systemic lupus erythematosus (SLE),study the relationships between 25-OH-D3 and both vitamin D-antibody (VD-Ab) and autoantibodies,and investigate their clinical significance.MethodsTo collect serum samples of 90 cases of SLE patients whose data complete and 60 cases of healthy volunteers.Applicating chemiluminescence to determinate the level of serum 25-OH-D3,the Enzyme-linked Immunosorbent Assay (ELISA) method was employed to detect the level of serum VD-Ab,applicating immune spot to determinate autoantibodies.Data analysis is done with SPSS 13.0 statistical software.ResultsThe average level of serum 25-OH-D3 of patient group was 10.29±5.74 ng/ml,and control group was 13.72±5.39 ng/ml,compare it between them,showed P<0.05,the difference was statistically significant.The serum VD-Ab level in patient group was 792.2±450.7 nmol/L,and the level in control group was 705.3±280.2 nmol/L,it not reach statistical significance,P>0.05.There was no significant relationships between the level of serum 25-OH-D3 and the level of serum VD-Ab(r=-0.120，P>0.05),a negative correlation was found between the levels of 25-OH-D3 and SLEDAI(r=-0.417，P<0.01).The level of serum 25-OH-D3 in SLE patients with anti dsDNA,anti-histone,anticardiolipin antibody positive group was lower than that of the negative group,P<0.05.There was no significant difference between the level of serum 25-OH-D3 of anti-nRNP antibody,anti-Sm antibody,anti-SSA antibody,anti-Ro52 antibody,anti-SSB antibody,anti nucleosome antibody,anti-Ribp antibody positive group and that of the negative group,P>0.05.ConclusionThe level of serum vitamin D in SLE patient is low,and it is negatively correlated with disease activity.The low level of serum 25-OH-D3 is not correlated with anti-vitamin D antibody,it may correlated with anti dsDNA antibody,anti-histone antibody and anticardiolipin antibody,vitamin D is important in the pathogenesis of SLE．

Key words:Systemic lupus erythematosus;25-Hydroxyvitamin D3;Vitamin D-Antibody;Autoantibodies

(收稿日期：2015-07-16)

中图分类号：R593.241

文献标识码：A

*通讯作者

基金项目：河北省卫生厅科研项目(20150956)

文章编号：1007-4287(2016)04-0592-04