PCNA、BCL-2及BMP2/4的表达对十二指肠腺癌的诊断意义及预后价值

李忠辉,张晋冀,石书玮,邰智慧*

(1.华北理工大学研究生院，河北 唐山063000；2.华北理工大学附属医院 肿瘤外科，河北 唐山063000)



PCNA、BCL-2及BMP2/4的表达对十二指肠腺癌的诊断意义及预后价值

李忠辉1,张晋冀2,石书玮1,邰智慧2*

(1.华北理工大学研究生院，河北 唐山063000；2.华北理工大学附属医院 肿瘤外科，河北 唐山063000)

摘要：目的观察十二指肠腺癌患者体内PCNA、BCL-2及BMP2/4的表达情况，进一步探讨PCNA、BCL-2及BMP2/4在该疾病诊断及预后中的临床意义。方法选取2005年1月至2014年11月间在我院检查取组织活检确诊为十二指肠腺癌患者45例，根据美国癌症联合委员会AJCC的分期标准，将以上患者分为Ⅰ组(7例)、Ⅱ组(16例)、Ⅲ组(13例)以及Ⅳ组(9例)，采用免疫组织化学染色SP法，检测不同患者活检组织中的PCNA、BCL-2及BMP2/4的表达情况，并与对照组(45例)进行对照分析，通过统计学软件计算，进一步分析以上因子的表达与十二指肠腺癌的关系。 结果十二指肠腺癌患者体内PCNA、BCL-2及BMP2/4的表达水平与对照组比较升高明显(P<0.05)，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ四组比较差异明显(P<0.05)。 结论 十二指肠腺癌组织中PCNA、BCL-2及BMP2/4的表达与该类疾病密切相关，同时与该类疾病的生物学行为及病理学分期具有相关性，对诊断十二指肠腺癌及判断预后有一定指导意义。

关键词：十二指肠腺癌；PCNA；BCL-2；BMP2/4

(ChinJLabDiagn,2016,20:0557)

十二指肠腺癌在临床上较少见，由于十二指肠在整个消化道长度中所占比例最小，国内文献报道十二指肠腺癌仅占全消化道肿瘤的0.3%，占小肠恶性肿瘤的25%-45%，占十二指肠恶性肿瘤的65%左右[1]。目前在生化检验方面缺乏对十二指肠腺癌特异诊断价值的指标，使得该疾病在临床中易被误诊为其他消化道疾病。由于近年来十二指肠腺癌发病率的持续增长，如何更加直接，更有目的性的诊断该疾病，也成为了临床医师与科研工作者研究的重点。PCNA、BCL-2、BMP2/4在调控细胞周期，指导细胞凋亡，影响细胞的增殖、发育以及分化中起到重要作用。与此同时还参与生物体内免疫调节、炎症反应以及组织坏死再生等多种生理调节[2]。国内外文献均有相关报道，在十二指肠腺癌的病理发展过程中，其体内的表达具有显著变化。本研究将对病例标本中的PCNA、BCL-2、BMP2/4表达水平进行测定，运用统计学方法进行科学计算，进一步探究以上三类物质在十二指肠腺癌的诊断及预后意义。

1材料与方法

1.1一般资料选取2005年1月至2014年11月期间于我院检查取活组织病理诊断为十二指肠腺癌的患者45例，其中男性27例，女性18例，年龄29-71岁，中位年龄为47岁，根据美国癌症联合委员会AJCC的分期标准，将以上患者分为Ⅰ组(7例)、Ⅱ组(16例)、Ⅲ组(13例)以及Ⅳ组(9例)，同时排除其他系统的慢性疾病及免疫性疾病影响。选取对照组患者45例，其中男性25例，女性20例，年龄29-73岁，中位年龄为49岁，均为活组织病理检查为正常、十二指肠球炎和十二指肠溃疡者。

1.2方法通过内镜所取得的活组织均经过10%福尔马林固定后，常规制成石蜡包埋切片，采用免疫组织化学SP法染色，检测PCNA、BCL-2、BMP2/4在不同标本中的表达水平。PCNA、BCL-2、BMP2/4试剂盒均购自武汉博士德生物工程有限公司，并严格按照使用说明进行操作。

2结果

2.1十二指肠腺癌患者标本中PCNA、BCL-2、BMP2/4的表达水平测定十二指肠腺癌患者标本中PCNA、BCL-2、BMP2/4的表达水平明显高于对照组，见表1。

表1　　　　十二指肠腺癌患者标本中PCNA、BCL-2、BMP2/4的

注：十二指肠腺癌组与对照组比较，P<0.05

2.2十二指肠腺癌分期(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ)四组中PCNA、BCL-2、BMP2/4比较四组之间数据比较有显著差异(P<0.01)。AJCC分期Ⅳ期组中各指标表达水平明显高于其他组，表明随着十二指肠腺癌病情发展，PCNA、BCL-2、BMP2/4的表达水平随之增高，具有相关性，能够作为十二指肠腺癌诊断及预后的可靠指标。见表2。

表2　　　　AJCC分期Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ四组中PCNA、BCL-2、

注：Ⅳ组与其他三组比较，P<0.05

3讨论

十二指肠腺癌多为单发，起源于十二指肠黏膜上皮，由于其早期病变肉眼观与十二指肠溃疡难以区分，且其症状不典型，容易被误诊为其他消化道疾病而延误病情，导致该病确诊时已是中晚期[3]。一旦确诊为十二指肠腺癌，目前最有效手段仍是手术治疗，虽然十二指肠腺癌手术切除率较高，但术后生存率却取决于淋巴结转移情况、肿瘤浸润深度以及是否发生远处转移等因素，所以能否早期诊断该病，对于患者的生存率及生活质量显得尤为重要[4-6]。

在本项研究中，通过对临床病例标本进行检测加以统计分析，表明PCNA、BCL-2、BMP2/4在临床确诊为十二指肠腺癌患者体内表达水平明显高于对照患者组(P<0.05)，而AJCC分期四组中各指标表达水平Ⅳ期组高于其他三组(P<0.05)。可以断定PCNA、BCL-2、BMP2/4的表达水平与十二指肠腺癌的病情发展密切相关。增殖细胞核抗原(PCNA)仅存在于正常细胞及肿瘤细胞中，目前研究认为由于PCNA参与DNA的合成过程，在细胞增殖的启动上具有重要作用。检测PCNA水平不但可以反映细胞代谢情况，而且对于细胞的增殖状态有很好的作用，在十二指肠腺癌细胞增殖的状况下，PCNA的表达水平也有明显升高，虽然PCNA在慢性炎症、感染性疾病以及免疫系统疾病中往往也会升高，但结合临床症状及影像学等检查，为十二指肠腺癌的早期诊断提供生化检测依据[7]。凋亡相关因子BCL-2蛋白家族在细胞凋亡中起到关键性作用，不但能与其他凋亡因子相互协同，而且大量研究表明，BCL-2蛋白还具有调控线粒体结构和功能稳定性，起到启动细胞凋亡主导作用[8]。BMP作为TGF(转化生长因子)中的一员，广泛参与靶细胞的增殖、分化、生长及凋亡过程，肿瘤细胞在过度表达及病理增殖过程中，由于其细胞周期紊乱，调控机制异常，往往出现基因突变或丢失，受体运输异常，信号传导通路紊乱或信号传导元件改变，而导致作为细胞调控活动中的重要分子BMP-2和BMP-4的表达水平异常增高。由于在肿瘤患者体内含量变化明显，结合其他指标，可以为十二指肠腺癌的诊断提供检验学证据[9]。PCNA、BCL-2、BMP2/4在调控细胞生理活动中具有重要作用，在十二指肠腺癌患者体内表达水平升高显著。

综上所述，十二指肠腺癌患者体内PCNA、BCL-2、BMP2/4的表达水平不仅在疾病早期可作为疾病诊断依据，同时表明PCNA、BCL-2、BMP2/4在十二指肠腺癌的病情发展中具有重要的辅助价值，也为术后患者判断治疗效果及预后评估中提供了新的理论依据。

参考文献：

[1]Han SL,Cheng J,Zhou HZ,et al.The surgical treatment and outcome for primary duodenal adenocarcinoma[J].J Gastrointest Cancer,2010,41:243.

[2]Bienz M,Clevers H,Linking colorectal cancer to wnt signaling[J].Cell,2000,103:311.

[3]张思森,陈雷,冷希圣,等.十二指肠腺癌89例临床分析[J].中华普通外科杂志,2011,(7):543.

[4]脱红芳,张万星,曹月敏.胰腺癌的手术治疗现状[J].肝胆外科杂志,2008,16(5):398.

[5]Lee HG,You DD,Paik KY,et al.Prognostic factors for primary duodenal adenocarcinoma[J].World J Sury,2008,32:2246.

[6]Chung WC,Paik CN,Jung SH,et al.Prognostic factors associated with survival in patients with primary duodenal adenocarcinoma[J].Korean J Intern Med,2011,26:36.

[7]Acharya N,Klassen R,Johnson RE,et al.PCNA binding domains in all three subunits of yeast DNA polymerase δ modulate its function in DNA replication[J].Proc Natl Acad Sci USA,2011,8(44):17927.

[8]Heiser D,Labi V,Erlacher M,et al.The Bcl-2 protein family and its role in the development of neoplastic disease[J].Exp Gerontol,2004,39(8):1125.

[9]Kim M ,Choe S.BMPs and their clinical potentials[J].BMP Rep,2011,44(10):619.

Expression of PCNA,BCL-2 and BMP2/4 in diagnosis and prognosis of adenocarcinoma of the duodenum value

LIZhong-hui,ZHANGJin-ji,SHIShu-wei,etal.

(NorthChinaUniversityofScienceandTechnologyGraduateSchool,Tangshan063000,China)

Abstract:ObjectiveTo observe the expression of PCNA,BCL-2 and BMP2/4,in patients with duodenal adenocarcinoma,to further explore the clinical significance of PCNA,BCL-2 and BMP2/4 in the diagnosis and prognosis.MethodsFrom 2005 January to 2014 November in our hospital check biopsy diagnosed 45 cases of duodenal adenocarcinoma patients,according to the Joint Committee American cancer AJCC staging criteria above,the patients were divided into group Ⅰ(7 cases),group Ⅱ(16 cases),group Ⅲ(13 cases) and IV (9 cases),using immunohistochemical staining SP method,the expression of PCNA,BCL-2 and BMP2/4detection in patients with biopsy is different,and the control group (45 cases) were analyzed by statistical software,calculation,the relationship between the expression of further analysis of above factors and duodenal adenocarcinoma.ResultsThe expression level of PCNA,BCL-2 and BMP2/4 in patients with duodenal adenocarcinoma,increased significantly compared with the control group (P<0.05),Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ,the difference between the four groups was significantly(P<0.05).ConclusionExpression of PCNA,BCL-2 and BMP2/4 of duodenal adenocarcinoma tissues is closely related to the disease,at the same time with the biological behavior and pathology of the disease the academic stages of relevance,it has certain guiding significance for the diagnosis of duodenaladenocarcinoma and prognosis.

Key words:Duodenal adenocarcinoma；PCNA；BCL-2；BMP2/4

(收稿日期：2015-04-07)

中图分类号：R735.3+1

文献标识码：A

*通讯作者

文章编号：1007-4287(2016)04-0557-03