不同pH值对维生素C注射液的影响研究

张慧，夏厚林，杨孟妮，徐庆凯，邓放



不同pH值对维生素C注射液的影响研究

张慧，夏厚林，杨孟妮，徐庆凯，邓放

[摘要]目的：考察不同pH值对维生素C（Vc）注射液的影响。方法：采用紫外分光光度法对不同pH值的Vc注射液进行最大吸收波长考察，进行稳定性试验筛选最稳定的pH值，采用百分吸收系数法测定稳定pH值的Vc注射液含量。结果：随着pH值的增大，最大吸收波长红移，反之则紫移；pH值在3左右时最大吸收波长比较稳定；把pH值控制在3左右测定Vc注射液的含量为：95.36％～98.64％。结论：pH值影响Vc注射液的最大吸收波长，把pH值控制在3左右，Vc注射液较稳定。

[关键词]维生素C注射液；紫外分光光度法；稳定性；pH；含量测定

[作者单位]成都中医药大学 中药材标准化教育部重点实验室 中药资源系统研究与开发利用省部共建国家重点实验室培育基地，四川 成都 611137

维生素C又叫抗坏血酸，能减少毛细血管的通透性，加速血液的凝固，刺激造血功能，促进铁在肠内吸收，降低血中甘油三酯和胆固醇，增加对感染的抵抗力，参与解毒功能，是维持人体机能的一种重要的维生素[1]。

目前，文献报道的Vc含量测定方法有高效液相色谱法[2]、2，4—二硝基苯肼比色法[2]、荧光法[3]、紫外分光光度法[4]、碘酸钾滴定法[4]、2，6一二氯酚靛酚法[5]等。高效液相色谱法、荧光法要求样品的纯度较高，还需要有昂贵的仪器；2，4—二硝基苯肼比色法操作麻烦，耗时较长；2，6一二氯靛酚法虽然简便，但是药品价格昂贵；碘量法[6]需标定滴定液碘，麻烦费时，基准物毒性大。光度法测定Vc含量的方法很多[7-9]，相比之下，紫外法较为简便，易操作，准确度高。综合考虑本文采用直接紫外法测定维生素C的含量。

Vc稳定性较差，维生素C结构中含有烯二醇结构，在水溶液、碱性溶液中极不稳定，且很容易被氧化分解[10-11]。维生素C注射液随着临床应用的日益广泛，其稳定性也越来越引起人们的重视，本实验通过对不同pH维生素C注射液稳定性的考察，筛选出最适宜的维生素C注射液pH，为注射制剂pH的控制奠定基础。

1　仪器与材料

紫外分光光度仪（UV1000 spectrophotometer）；PHS-25雷磁pH计（依法分别用pH=6.86、pH=4.00的缓冲溶液进行校正）；实验用Vc注射液（5 mL:1 g）（批号：1408324-A10、1408324-A12、1408324-A14）购自国药集团容生制药有限公司；维生素C对照品购自中国药品检定研究所(批号：2159C)；分析纯盐酸（36％～38％）购置成都科龙化工试剂厂。

2　方法与结果

2.1对照品溶液的制备

取维生素C对照品适量，精密称定，加蒸馏水制成每1 mL含0.2 mg的溶液。

2.2供试品储备溶液的制备

吸取Vc注射液5 mL加蒸馏水定容到50 mL，再从中取1 mL加蒸馏水定容到100 mL作为储备液。再从中取不同体积的储备液加不同浓度的盐酸（1 mol．L-1、0.1 mol．L-1、0.01 mol．L-1、0.001 mol．L-1）定容到100 mL即得供试品溶液。

2.3最大吸收波长的选择

精密取对照品溶液2 mL定容到100 mL，进行195 nm～500nm的全波长扫描，标准品在243 nm处有最大吸收，故选择243 nm作为Vc的检测波长。

2.4线性范围考察

精密吸取“2.1”项下的对照品溶液各1 mL、2 mL、4 mL、5 mL、8 mL、10 mL定容到100 mL，于245 nm波长下用1 cm比色皿进行紫外扫描测定吸光度A，以Vc的浓度为横坐标，对应的吸光度为纵坐标，绘制标准曲线，回归方程为y=54.350x+0.0047，r=0.9993，结果表明Vc的浓度在0.002 mg．mL-1～0.02 mg．mL-1之间线性范围良好，结果见表1、图1。

表1　维生素C浓度与对应吸光度关系表

图1　维生素C标准曲线图

2.5稳定性考察

吸取“2.2”项下的供试品储备液3 mL，加不同浓度的盐酸定容到100 mL，分别在0 h、0.5 h、1 h、2 h、3 h、4 h、6 h、8 h于紫外扫描最大吸收波长（λmax），考察不同pH对Vc注射液稳定性的影响见表2、图2。

表2　不同pH的Vc注射液最大吸收波长随时间变化关系表

结果显示用0.001 mol．L-1的盐酸定容相当于调节Vc注射液pH在3左右时最大吸收波长保持在243 nm基本上稳定，RSD为0.42％。

2.6精密度、重复性、重现性和加样回收率的考察

取同一支Vc注射液供试品储备液依法考察，精密度试验RSD为0.81％，重复性试验RSD为0.89％，重现性试验RSD为0.49％，加样回收率的平均回收率为98.42％，RSD为1.03％。表明该法可靠性良好。

2.7含量测定

吸取Vc注射液5 mL加蒸馏水定容到50 mL，再从中取1 mL加蒸馏水定容到100 mL，再从中取3 mL 加0.01 mol．L-1盐酸定容到100 mL，于紫外243 nm下测定Vc的吸光度值A，并利用百分吸收系数法计算Vc注射液中Vc的百分标示含量（E1％1cm=560），结果见表3。

表3　Vc百分标示含量测定结果表（n=3）

结果显示用0.01 mol．L-1的盐酸定容到pH在3左右时，Vc的百分标示含量为95.36％～98.64％。

3　讨论

1.根据稳定性考察结果显示不同的pH对Vc注射液最大吸收波长影响较大，随着pH的增大，最大吸收波长往长波长方向移动，但当用0.01 mol．L-1的盐酸调节pH在3左右时，随着时间的变化，最大吸收波长保持在243 nm比较稳定，故提示测量维生素C注射液含量时应该把pH调节在3左右有利于其稳定。

2.本实验也研究了Vc注射液在碱性条件下的最大吸收波长，实验结果显示在碱性条件下几乎没有吸收，考虑到Vc是一个酸性物质，在碱性条件下被中和，所以表现出无吸收。

3.紫外分光光度法测量Vc注射液的含量，具有操作简便、快速、准确的优点，查阅文献有用标准曲线测含量的，本实验探讨了百分吸收系数法测定Vc的含量，把Vc的pH控制在3左右，最大吸收波长保持在243 nm处测定含量跟文献报道结果基本一致。

[参考文献]

[1]王红霞,张伟婵,孟莉新,等.水果中Vc含量的测定[J].宜春学院学报,2011,33(4):120-121.

[2]林桂荣,郭泳,付亚文,等.新鲜果蔬Vc测定方法研究[J].北方园艺,1995(2):7-9.

[3]邵晓芬,张韵慧.荧光法测定果蔬中抗坏血酸和核黄素[J].光谱学与光谱分析,1994,14(2):125-127.

[4]张英.食品理化检测与微生物实验[M].北京:中国轻工业出版社, 2004.

[5]王丽霞.测定Vc的两种方法[J].经济林研究,2001,19(2):39-40.

[6]中华人民共和国卫生部药典委员会.中华人民共和国药典(二部)[S].北京:中国医药科技出版社,2010.

[7]张广元.Vc片剂的紫外分光光度法测定[J].安庆师范学院学报:自然科学版,2002,8(3):26-27.

[8]李军.紫外分光光度法测定果蔬中的Vc[J].河北职业技术学院学报,2000,14(1):4l-44.

[9]李安荣,杨玲莉,夏代全.紫外分光光度法测定维生素银翘片中Vc含量[J].药品检测,2002,11(8):44-45.

[10]关静,王健,田立茹,等.不同pH维生素C注射液制剂稳定性的影响[J].北方药学,2007,4(5):22.

[11]刘艳芳,孙学文,杨晴.紫外分光光度法测定Vc含量的方法改进[J].安徽农业科学,2011,39(22):13270-13272.

(责任编辑：傅舒)

Influence of different pH on vitamin C injection

ZHANG-Hui, XIA Hou-lin, YANG Meng-ni, Xu Qing-kai, DENG Fang
(School of Pharmacy, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine; Key Laboratory of Standardization for Chinese Herbal Medicine, Ministry of Education; National Key Laboratory Breeding Base of Systematic Research, Development and Utilization of Chinese Medicine Resources, Chengdu 611137,Sichuan)

[Abstract]Objective: To study the influence of different pH on vitamin c (Vc) injection.Method: Ultraviolet spectrophotometry was applied to investigate the maximum absorption wavelength of Vc injection at different pH.The most suitable pH value was chosen and the stable Vc injection content was detected using percent absorption method.Result: With the increase of pH value, maximum absorption wavelength was shifted to long wavelength.Maximum absorption wavelength was stable at pH 3.And Vc injection content was 95.36％-98.64％ at pH 3.Conclusion: pH values affect the wavelength of maximum absorption of Vc injection.Vc injection is stable at pH 3.

[Key words]Vitamin C injection; uv spectrophotometry; stability; pH; content determination

[收稿日期]2015-04-27

[通讯作者]邓放，男，博士，从事中药及其复方物质基础和质量控制研究 Email:dengf99@163.com

[作者简介]张慧，女，在读硕士，从事中药质量控制研究Tel:13880459062 Email:zhanghui9101@163.com

[中图分类号]R 283.1

[文献标识码]A

[文章编号]1674-926X(2016)01-011-03