复方熊胆茵陈颗粒的制备工艺研究

阙金花，李煌，黄鸣清，徐伟，孙照霞，乔丽菲



复方熊胆茵陈颗粒的制备工艺研究

阙金花，李煌，黄鸣清，徐伟，孙照霞，乔丽菲

[摘要]目的：制备复方熊胆茵陈颗粒，优选复方熊胆茵陈颗粒剂成型工艺。方法：以颗粒的成型率、休止角、堆密度、溶化性为指标筛选合适的辅料，以口感、成形性为指标筛选最佳矫味剂，并以水分控制确定干燥时间，以绿原酸有无被破坏来确定干燥温度。并了解颗粒的吸湿性及相对临界湿度，控制颗粒的贮藏条件，确保颗粒的质量。结果：复方熊胆茵陈颗粒的最佳配方为复方熊胆茵陈浸膏，加入与熊胆粉混匀的辅料（蔗糖：糊精）以1:1.5:1.5混合，制软材，12目过筛，干燥温度为65 ℃，10目整粒。结论：筛选得到的复方熊胆茵陈颗粒剂制备方法简便可行，成型工艺稳定可控，建议密闭、置干燥阴凉处保存。

[关键词]复方熊胆茵陈颗粒剂；辅料；矫味剂；成型工艺

[作者单位]福建中医药大学,福建 闽侯 350122

复方熊胆茵陈由熊胆粉、茵陈、泽泻、北柴胡、山楂、白术、甘草7味中药组成；具有清肝利湿，化痰祛瘀的功效。对肝胆湿热、痰浊血瘀型脂肪肝有较好疗效。8年内在福建中医药大学附属人民医院收集82例患者使用本品情况，服用方法均为茵陈、泽泻、白术、山楂、柴胡、甘草水煎后，加入熊胆粉混匀，饭后服用，早晚各服一次。患者用药一个月后症状明显改善，表明水煎煮液在临床上效果明显。原方在临床上使用的剂型是汤剂，将汤剂剂型改革为颗粒剂，由于颗粒剂保有汤剂作用迅速的特点，且具有体积小，服用、存储及运输较方便、性质稳定、质量可控等特点[1]。所以本实验选择对复方熊胆茵陈颗粒剂制备工艺进行研究，为工业化生产提供参考依据。

1　材料与仪器

1.1主要试剂

1.1.1药材 泽泻、茵陈、柴胡、山楂、白术、甘草（均购自福州回春中药饮片有限公司，批号分别为：10020504、20110901、11101702、20110901、11112801、11011807）；熊胆粉（购自归真堂，批号：20120503）。

经鉴定，以上药材均符合《中国药典》2005年版规定，鉴定人杨成梓教授（福建中医药大学 药学院）。

1.1.2 试药 绿原酸对照品（批号：110753-200413；中国食品药品检定研究院）；微晶纤维素（批号：110123；上海源聚生物科技有限公司）；糊精（批号：20101225；北京双旋微生物培养基制品厂）；可溶性淀粉（批号:20100719；北京双旋微生物培养基制品厂）；环拉酸钠（批号：20120625，四川瀚华药用辅料有限公司）

1.2主要仪器

XS105 电子分析天平（梅特勒-托利多国际股份有限公司）；U3000美国戴安高效液相色谱仪；电热恒温鼓风干燥箱DHG-9240（上海精宏实验设备有限公司）；KQ-500DE超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；FW135中草药粉碎机（天津市泰斯特仪器有限公司）；KDM调温电热套（山东甄城华鲁电热套仪器有限公司）；DLSB-5/40（低温冷却循环泵郑州长城科工贸有限公司）；RE-52旋转蒸发器（上海亚荣生化仪器厂）；LXJ-II（离心机上海安亭科学仪器厂）；微孔滤膜（江苏汉邦科技有限公司）；快速水分测定仪（奥豪斯MB23 水分分析仪）。

2　方法

2.1处方筛选

2.1.1复方试制粒 干膏粉直接制粒：取过筛后的干膏粉20 g同相应的熊胆粉混匀喷以70 ％乙醇制粒，但制粒时粘性大，难过筛，且干燥时结块、花斑，颗粒硬度大。加入适量辅料可克服这些缺点。用湿稠膏加辅料直接制粒，方法简单，操作简便，生产成本低，我们选用此方法进行制粒。

2.1.2辅料的筛选 ①以成型性、休止角、堆密度和溶化性为考察指标，筛选最佳的辅料。

成型性的测定：按照《中国药典》一部2010年版附录XI B筛分法中的双筛分法测定[2]。药筛为一号筛在上五号筛在下组成的双筛，将制备好的颗粒称取100 g，称定重量，置于1号筛上，保持水平过筛，左右往返，边筛边轻叩3 min。收集能通过1号筛但不能通过5号筛的颗粒，即留在五号筛上的颗粒，称定称重，计算所占百分比。

休止角的测定：采用固定漏斗法，即将3只漏斗串联并固定于水平放置的坐标纸上1 cm的高度处，此时漏斗下口距坐标纸的距离为H，小心地将过筛后的颗粒沿漏斗壁倒入最上面的漏斗中，直到最下面漏斗颗粒的圆锥体尖端接触到漏斗口为止，此时由坐标纸测出圆锥体底部的直径R，计算出休止角α [休止角tgα=H/R][3]。

堆密度的测定：取过筛后的颗粒适量，倒入干燥的100 mL量筒中轻轻振动至刻度(mL)，精密称定重量(g)，计算堆密度 [堆密度 =颗粒重量(g)．量筒体积(mL)-1[4]。

溶化率的测定：在干燥至恒重的10 mL离心管中加入颗粒约1 g，精密称定，加入沸水至10 mL，搅拌振荡5 min，以3000 r．min-1离心15 min，弃去上清液，在80 ℃将残渣烘干至恒重，精密称定，计算溶化率[溶解率(％) = 溶解颗粒质量/颗粒质量×100％][5]。

②颗粒的制备：取浸膏，加入与熊胆粉混匀的辅料，照拟定的处方辅料品种用量配料，混匀，制软材，12目过筛，60 ℃干燥，10目整粒。照实验内容测定各项指标，见表1。

表1　100g浸膏制粒所用辅料及用量

2.1.3矫味剂的筛选——调试口感 前期试验得到的颗粒，因含熊胆粉，具有苦腥难咽，为提高病人对药物的依从性和顺应性，应加入一定量的甜味剂和矫味剂。在颗粒剂中，最常用的既可作为稀释剂又可作为甜味剂的辅料为蔗糖。因此选用糊精和蔗糖混合作为颗粒剂的稀释剂。进一步选用阿斯巴甜、甜菊糖甙、环拉酸钠、糖精、安赛蜜、桂皮醛、桔子香精作为而矫味剂或甜味剂，对颗粒的口感进行考察。

①蔗糖用量比例：以制粒情况、成型性为考察指标

制粒情况：考察制粒过程中软材的过筛情况及过筛后颗粒的形状，还有颗粒的口感。

成型性：按照《中国药典》一部2010年版附录XI B筛分法中的双筛分法测定[2]。药筛为一号筛在上五号筛在下组成的双筛，将制备好的颗粒称取100 g，称定重量，置于1号筛上，保持水平过筛，左右往返，边筛边轻叩3 min。收集能通过1号筛但不能通过5号筛的颗粒，即留在五号筛上的颗粒，称定称重，计算所占百分比。

②制备方法

取浸膏，加入与熊胆粉混匀的辅料，照拟定的处方辅料品种用量配料，混匀，制软材，12目过筛，60 ℃干燥，10目整粒。

③矫味剂的筛选

以口感（多人的口感评价折中为标准），选择阿斯巴甜、甜菊糖甙、环拉酸钠、糖精、安赛蜜、桂皮醛、桔子香精作为矫味剂或甜味剂，对颗粒的口感进行考察，见表2。

制备方法：以100 g浸膏加入150 g糊精和150 g蔗糖混匀（含熊胆粉），按照下表的矫味剂处方（约占湿颗粒重的百分比算）制粒，12目过筛，60 ℃干燥，10目整粒。

表2　矫味剂的考察

2.2颗粒干燥条件的测定

颗粒对烘干的温度有一定要求，如果干燥温度太低，颗粒干得慢，干燥时间长，效率低，浪费能源，提高成本；而温度太高容易导致表面干燥而内部仍然未干，有些药效成分也容易因过热而被破坏。本实验以水分控制确定干燥时间，以绿原酸有无被破坏来确定干燥温度。

2.2.1颗粒干燥温度的考察 对照品溶液制备：精密称取绿原酸加入50 ％甲醇溶解得50.4 μg．mL-1的对照品溶液。供试品溶液制备：取各温度下颗粒精密称定2份，共8份，每份精密加入50％甲醇20 mL，称定重量，超声30 min，放冷，再称定重量，用50 ％甲醇不足减失的重量，摇匀，过滤，取续滤液，即得。色谱条件：色谱柱（Ultimate XB-C18柱，4.6 mm x 250 mm，5 μL）；流动相为乙腈-0.1 ％磷酸(10:90)；检测波长为327 nm；柱温为25 ℃；进样量为10 μL；流速为1.0 ml．min-1。

实验方法：取50 g湿颗粒平铺于搪瓷盘上厚度不超过2 mm，平行4份，分别放入55 ℃、65 ℃、75℃、80 ℃的烘箱中，干燥2 h，取出，经HPLC法测绿原酸含量。

2.2.2颗粒干燥时间的考察 以颗粒剂中所含水分为考察指标，取50 g湿颗粒平铺于搪瓷盘上，厚度不超过2 mm，放入65 ℃烘箱中，定时(1 h，2 h，3 h，4 h)取样，采用快速水分测定仪测水分，平行做4份。

2.3颗粒吸湿性考察及临界相对湿度的测定[6]

了解颗粒的吸湿性，控制颗粒的贮藏条件，确保颗粒的质量。临界相对湿度是药物吸湿率迅速增加的临界值，它是确定生产时的环境湿度的依据。大生产中分装颗粒时可参考此值对车间的相对湿度进行控制，以避免吸湿使产品的含水量过高而影响质量。

2.3.1颗粒吸湿性测定 取一定量的颗粒于60 ℃烘箱中干燥至恒重。将底部盛有氯化钠饱和溶液的玻璃干燥器放入25 ℃的恒温培养箱内恒温24 h，此时干燥器内的相对湿度为75 ％。在已恒重的称量瓶底部放入厚约2 mm的干颗粒，准确称重后置于氯化钠过饱和溶液的玻璃干燥器内(称量瓶盖打开)，于25 ℃恒温培养箱保存，定时(4 h，6 h，12 h，24 h，36 h，48 h，60 h，72 h，84 h，96 h，108 h，120 h后)称量，按下式计算吸湿百分率。并以吸湿百分率为纵坐标，时间为横坐标作图。

2.3.2复方颗粒的相对临界湿度考察 取一定量的颗粒于60 ℃烘箱中干燥至恒重。配制KNO3、KCl、NaCl、NaBr、K2CO3、MgCl2、CH3COOK7种不同饱和盐溶液，分别置于干燥器中，25 ℃室温放置48 h，使其内部湿度平衡，构成不同相对湿度(RH)的环境，精密称取复方颗粒约1 g，平铺于干燥至恒重的称量瓶中，厚度约为2 mm，精密称定，按每3份为1组放置在不同RH的干燥器中，放于25 ℃室温中，七天后取出，精密称重，计算颗粒在不同RH下的平均吸湿百分率(n＝3)，以吸湿率为纵坐标，相对湿度为横坐标作图，曲线两端切线的交点对应的横坐标即为临界相对湿度(CRH)。

3　结果与分析

3.1辅料的筛选

结果见表3。

表3　100 g浸膏制粒所用辅料及用量筛选结果

3.2矫味剂选择

3.2.1蔗糖用量考察：结果见表4。

表4　100 g浸膏制粒所用蔗糖用量的筛选结果

由上表可知，处方4难制粒，成型性最差，因此不可行，而处方1、处方3、处方2的成型性都很高，三个配比成型率差不多，说明蔗糖和糊精作为本复方颗粒的辅料是可行的。本次实验主要考察的是颗粒的口感，因此我们选用处方3作为最佳方案，浸膏：蔗糖：糊精=1:1.5:1.5。

3.2.2矫味剂种类选择 从不同口感人员试喝，对表2的11组颗粒中，对环拉酸钠评价比较好，因此选环拉酸钠为最佳矫味剂0.2 ％环拉酸钠的口感均表示没有很苦，没有那么酸和涩，味道淡淡的，而0.4％ 的环拉酸钠有点偏酸和甜，稍苦，两者的口感好像都有点欠缺。调试环拉酸钠含量0.2 ％、0.3 ％、0.4 ％，试喝得到结果为0.3 ％环拉酸钠的口感为腥，不酸，微苦，有点甜为最佳矫味剂量。

考虑到因每组处方的口感都有点腥，加入常用的气味掩盖剂桂皮醛和桔子香精。桂皮醛加入并没有使颗粒的口感改善多少，还是有些腥，而加入桔子香精后，喝起来是有桔子香味，但味道很奇怪，并没有很好的掩盖熊胆的味道，达到矫味的目的，还不如没加时口感来得自然。

因此矫味剂考察结果表明用糊精和蔗糖制粒，成型性效果好，加入0.3％环拉酸钠能达到更好的口感。复方浸膏（相对密度为1.36，50 ℃）加入1.5份的蔗糖和1.5份的糊精及总重量的0.3 ％环拉酸钠制粒，成型性好，口感佳。若以1000 g颗粒算，为浸膏270 g，熊胆粉8.33 g，糊精405 g，蔗糖405 g，环拉酸钠3.3 g。

3.3颗粒干燥温度的考察

实验结果见图1。

图1　干燥温度考察曲线图

考虑到温度的高低会影响有效成份绿原酸的稳定及干燥的时间，而干燥时间长也会相应增加成本，我们选用65 ℃作为颗粒干燥温度。

3.4颗粒干燥时间的考察

结果见图2。

图2　干燥时间考察曲线图

由实验结果可知在温度达到65 ℃时，干燥3 h后为2.7 ％，符合要求。

3.5验证试验结果

处方：熊胆粉8.33 g泽泻 250 g茵陈278 g山楂278 g柴胡167 g白术167 g甘草167 g

取1倍处方量，根据提取工艺得浸膏，取8.33 g熊胆粉、0.3 ％环拉酸钠、1.5份糊精和1.5份蔗糖，混匀，同浸膏混合制软材，12目过筛，65 ℃干燥，10目整粒。平行做3份对相关数据进行了统计，结果见表5。

表5　三批颗粒检查结果

经验证，该成型工艺方案稳定性好，制得的颗粒溶解性好、成型率高、成本低。

3.6颗粒吸湿性测定

以吸湿百分率为纵坐标，时间为横坐标作图。结果见图3。

图3　颗粒吸湿性曲线图

结论：颗粒在108 h（四天半）后即达到吸湿平衡时间。因此看出颗粒在T 25 ℃，RH 75 ％的条件下108 h后就可达到吸湿最大程度，考查其吸湿性放置时间要大于108 h。

4　讨论

由表3可知，处方4和处方5的配方制作出的软材太粘，没法过筛成颗粒，因此单独用可溶性淀粉或蔗糖作为辅料来制颗粒不适合本品颗粒。处方7，相较其他配方制粒较难，因中药提取物本身的粘性大，吸湿性强，而可溶性的吸湿性强，因此过筛较费力。处方3，溶化率最小，难溶化，微晶纤维素本身在水中较难溶，因此也不适合本品。处方1和处方2，颗粒成型率高，易于溶化，且流动性好，故乳糖和糊精为良好的颗粒剂辅料，但其乳糖价格昂贵，成本高，故本实验选用糊精作为辅料，糊精价格便宜，可以降低成本，物美价廉。

[参考文献]

[1]肖桂兰.中药颗粒剂的研究现状及应用前景[J].中国中医药现代远程教育, 2010, 15:130.

[2]国家药典委员会.中华人民共和国药典[S].北京:中国医药科技出版社, 2010.

[3]欧阳春华.芪丹颗粒剂成型工艺研究[J].中国药业,2011,20 (23):36-37.

[4]吴龙,易延逵,邓虹珠.复方红景天颗粒成型工艺研究[J].湖南中医杂志,2012,28(3):151-152.

[5]李小强,潘小燕.复方芪丹颗粒成型工艺研究[J].新疆中医药,2012,30(4):69-70.

[6]陈兴,张志国.活血安痛颗粒成型工艺研究[J].中南药学, 2010,10,8(10):748-751.

（责任编辑：傅舒）

·药理毒理·

Study on the preparation technology of Fufang-xiongdan-yinchen granule

QUE Jin-hua, LI Huang, HUANG Mingqing, XU Wei, SUN Zhao-xia, QIAO Li-fei
(Department of Pharmacy, Fujian University of Traditional Chinese Medicine, Fuzhou 350122, Fujian)

[Abstract]Objective: To prepare Fufang-xiongdan-yinchen granule and optimize the technology.Method: The excipients were optimized with the indexes of moldability, angle of repose, bulk density and dissolution.The best corrigent was chosen with taste and moldability.The drying time was determined with moisture, and the drying temperature was determined with chlorogenic acid content.And the hygroscopicity of granule and critical relative humidity and the storage conditions were considered to ensure granules quality.Result: The optimum formula of Fufang-xiongdan-yinchen granule was optimized.Fufang-xiongdan-yinchen extractum was prepared.Bear gall powder was mixecd with cane sugar and dextrin in the ration of 1:1.5:1.5.After being sieved with 12 screen mesh, the soft material was dryed at 65 ℃ and then granulated with 10 screen mesh.Conclusion: The preparation method of Fufang-xiongdan-yinchen granule is convenience.The forming processes is stable and controllable.The granule should be sealed in cool and dry place for preservation.

[Key words]Fufang-xiongdan-yinchen granule; excipients; corrigent; preparation

[收稿日期]2015-06-04

[通讯作者]徐伟(1975-)，男，博士，主要研究方向：中药制剂及其质量控制标准研究Tel:13950418662 Email:xwfjtcm@sina.com

[作者简介]阙金花(1989-)，女，在读硕士，主要研究方向：中药制剂及其质量控制标准研究Tel:13950223774 Email:275376859@qq.com

[基金项目]福建省科技重大专项（2010YZ0001-1）

[中图分类号]R285.5

[文献标识码]A

[文章编号]1674-926X(2016)01-013-05