哈尔滨地区鸡源沙门菌耐药性分析

廖　聪，牛鑫鑫，黄　皓，艾显辉,王晓菲，薛　原

(东北林业大学野生动物资源学院,黑龙江哈尔滨 150040)



哈尔滨地区鸡源沙门菌耐药性分析

廖聪，牛鑫鑫，黄皓，艾显辉,王晓菲，薛原*

(东北林业大学野生动物资源学院,黑龙江哈尔滨 150040)

摘要:对黑龙江省哈尔滨地区鸡源沙门菌进行分离培养，并进行沙门菌耐药性调查。采用纸片扩散法测定各分离菌株对19种抗菌药物的敏感性。结果表明，鸡源沙门菌各分离株对不同抗菌药物的敏感性不同，对氨苄西林、恩诺沙星、卡那霉素和强力霉素的耐药率较高，对阿莫西林/棒酸、阿米卡星和亚胺培南敏感。

关键词:沙门菌；耐药性；药敏试验

沙门菌是人类食源性疾病常见的病原菌之一。绝大多数沙门菌对人和动物具有致病性,能引起人和动物不同的沙门菌病，是引起人类食物中毒的常见病原菌，在兽医公共卫生上具有十分重要的意义。

应用抗微生物药对控制和预防畜禽的沙门菌病发挥了巨大的作用。然而随着抗微生物药的广泛、持续和不当使用，沙门菌对抗菌药物的耐药性日趋普遍。本研究以鸡源沙门菌为研究对象，进行了耐药性分析，旨在为抗菌药物的正确使用提供科学依据。

1材料与方法

1.1材料

1.1.1菌株药敏质控菌株大肠埃希菌ATCC25922，购自中国兽医药品监察所；试验用沙门菌于2014年8月～12月从哈尔滨周边地区鸡群分离的沙门菌33株，所有菌株均经过标准的生化试验。分离菌株用于药敏试验确证。

1.1.2培养基普通琼脂和水解酪蛋白琼脂培养基(Mueller-Hinton,MH),杭州天和微生物试剂有限公司产品(批号120201)。

1.1.3药敏纸片 药敏片共19种，购自杭州天和微生物试剂有限公司。包括β-内酰胺类：阿莫西林/克拉维酸钾(AMC)、氨苄西林(AMP)、氨曲南(AZT)、头孢他啶(CZ)、头孢噻吩(KF)、亚胺培南(IPM)；氨基糖苷类：阿米卡星(AK)、庆大霉素(CN)、卡那霉素(KAN)、新霉素(FY)；喹诺酮类： 诺氟沙星(NOR)、恩诺沙星(ENR)、环丙沙星(CIP)、氧氟沙星(OFL)；四环素类：多西环素(DO)、四环素(TE)；磺胺类：复方新诺明(SMZ)；氯霉素类：氯霉素(CMP)；多肽类：多黏菌素B(POL)。

1.2方法

1.2.1药敏试验采用WHO推荐的Kirby-Bauer法[1]。依据CLSI有关标准，只有当质控菌株的抑菌圈直径在允许范围内,测试菌株结果才有效。

1.2.2判定标准按抗菌药物敏感性试验扩散法标准[2]，判定各菌株的敏感度，对所分离的细菌进行药敏试验。以抑菌圈的大小判定敏感(susceptible)、中介(intermediate)、耐药(resistant)。

2结果

2.1沙门菌的耐药性

33株细菌均可产生耐药性。对氨苄西林(AMP)、恩诺沙星(ENR)、卡那霉素(KAN)和强力霉素(DO)的耐药率较高，达80%以上；对阿莫西林/棒酸(AMC)、阿米卡星(AK)和亚胺培南(IPM)高度敏感，其中IPM敏感率达97% (图1)。

2.2沙门菌的多重耐药性

32株受试沙门菌对19种抗菌药物有多重耐药性，表现对4种或4种以上药物耐药。6重耐药菌株和7重耐药菌株所占比例最大,均为21.2%，其次是5重耐药和8重耐药均为15.2%。分离菌株存在多重耐药现象，最少为4种，最多为10种，存在敏感性较高的1株，为2重耐药(图2)。

2.3沙门菌的耐药类型

受试鸡源沙门菌中，共有18种耐药类型(表1)。

图1　禽源沙门菌对19种抗菌药物的体外药敏试验结果

图2　受试沙门菌的耐药总数

编号Number耐药类型Typeofdrugresistance耐药种数No.drugresistance1POL-CN22ENR-TE-KF-DO43TE-KF-NOR-DO44AMP-KAN-SXT-TE-KF55KAN-CMP-SXT-KF-NOR56AMP-KAN-SXT-TE-KF-ENR67AMP-ENR-KAN-CMP-TE-DO68AMP-POL-CIP-TE-CN-DO69CMP-SXT-TE-KF-NOR-DO610AMP-ENR-CIP-KAN-SXT-CZ-CN711AMP-ENR-CIP-KAN-CMP-KF-NOR712ENR-KAN-SXT-TE-KF-CN-DOX713AMP-POL-ENR-KAN-CMP-SXT-KF-CN814AMP-POL-KAN-CMP-SXT-TE-NOR-DO815AMP-POL-ENR-CIP-SXT-TE-KF-CZ-DO916AMP-AZT-ENR-CIP-KAN-KF-CZ-NOR-DO917AMC-AMP-AZT-ENR-CIP-KAN-TE-KF-CN918AMP-ENR-CIP-KAN-CMP-SXT-TE-KF-CN-NOR10

3讨论

沙门菌病是兽医临床上具有重要意义的人畜共患病之一。沙门菌是引起人类食物中毒最常见的致病菌[3]。在我国由沙门菌引起的食物中毒屡居首位[4]。由于抗微生物药的广泛应用，使得沙门菌的耐药谱不断增宽，特别是出现了多重耐药菌株。许多耐药基因可在动物和人类病原菌间相互传播，严重危害养殖业[5]。国内外文献显示，沙门菌的耐药率逐渐上升，耐药谱逐渐变宽[6-7]。潘志明等[8]根据325株鸡沙门菌不同年代多重耐药菌株的变化，得出20世纪60年代菌株几乎没有多重耐药性，20世纪70年代以四重耐药、五重耐药菌株为主，20世纪80年代以五重耐药、六重耐药、七重耐药菌株为主，20世纪90年代七重耐药以上菌株的比率高达83.7%，而且对青霉素、链霉素、卡那霉素等药物的耐药性大多呈现出显著增强的变化趋势。戴建华等[9]从江苏苏中地区分离到禽源沙门菌，其多重耐药现象较严重，且每个菌株耐药表型均在4重或4重以上，甚至有10重耐药菌株。李静怡等[10]从广东和广西两省分离鸡白痢沙门菌，发现菌株对青霉素G、利福平、红霉素等常用药物高度耐药。唐攀等[11]发现42株鸡源沙门菌对四环素、氨苄青霉素和萘啶酸普遍耐药，耐药率均在60%以上，4重以上耐药菌株占88.9%。

哈尔滨地区的受试鸡源沙门菌对试验所采用的19种抗菌药物均有不同程度耐药性。其中最少的耐药2种，最多的耐药10种。33株耐药沙门菌中有97%为多重耐药，其中耐4种抗菌药物的占9%，耐5种～9种抗菌药物的占88% ，耐10 种抗菌药物的占3%。对氨苄西林、恩诺沙星、卡那霉素和强力霉素的耐药率较高。分离的菌株中具有耐药性的占100%，其中恩诺沙星的耐药比例高达94%。同时也看出，受试大肠埃希菌对亚胺培南敏感性相对较高，敏感比例达到97%。在动物饲养过程中抗菌药物的不规范使用或滥用，从而导致沙门菌的多重耐药现象，这将会对人畜沙门菌病的控制产生不利影响，应引起高度重视。沙门菌可以将其抗药性质粒传递给其他菌株，所以沙门菌的抗药性形成较快，导致环境中沙门菌耐药性菌株越来越多。为控制耐药性沙门菌的发展，应加强对沙门菌耐药性监测力度。

参考文献:

[1]Khan A D,Dass C J,Ramamurthy T D.Antibiotic resistance,virulence gene,and molecular profiles of Shiga toxin producingEscherichiacoliisolates from diverse sources in Calcutta [J ] .India J Clin Microbiol,2002,40(6):2009-2015.

[2]Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI).Performance standards for antimicrobial susceptibility testing[S].Wayne,PA:CLSI,2009,15-19.

[3]陈龙，张春霞，康元环，等.猪源沙门菌耐药机制及耐药性研究进展[J].动物医学进展，2014,36(8)：56-59.

[4]李郁,焦新安,魏建忠,等.屠宰生猪沙门氏菌分离株的血清型和药物感受性分析[J].中国人兽共患病学报,2008,24(1):67-80.

[5]贺奋义．沙门氏菌的研究进展 [J ]．中国畜牧兽医，2006,33(11):91-95.

[6]Deekshit V K,Kumar B K,Rai P,et al.Simultaneous detection ofSalmonellapathogenicity island 2 and its antibiotic resistance genes from seafood[J].J Microbiol Meth，2013 ,3:231-233.

[7]Cha S Y,Kang M,Yoon R H,et al.Prevalence and antimicrobial susceptibility ofSalmonellaisolates in Pekin ducks from South Korea[J].Comp Immunol Microbiol Infect Dis,2013,6:187-189.

[8]潘志明，焦新安，刘学贤,等.鸡白痢沙门氏菌耐压性的变化趋势[J].中国预防兽医学报，1999，21(4):305-307.

[9]李静怡,崔可琦,冯赛祥,等.鸡白痢沙门菌的分离鉴定、耐药性及分子分型研究[J].动物医学进展，2014,35(2):47-49.

[10]陈龙,张春霞,康元环,等.猪源沙门菌耐药机制及耐药性研究进展[J].动物医学进展，2014,36(8):56-59.

[11]唐攀,崔恩慧,刘万华,等.鸡源沙门菌PFGE分型及耐药性研究[J].动物医学进展，2013,35(11)：78-81.

Drug Resistance Analysis ofSalmonellaIsolated from Chickens in Harbin

LIAO Cong,NIU Xin-xin,HUANG Hao,AI Xian-hui,WANG Xiao-fei，XUE Yuan

(CollegeofWildlifeResource,NortheastForestUniversity,Harbin,Heilongjiang,150040,China)

Abstract:In order to investigate the multi-drug resistance of Salmonella from chickens,Salmonella were isolated from the fecal samples in chicken farms of Harbin region.The sensitivities of Salmonella isolates to 19 antimicrobials were determined by scrip diffusion method.The results of antimicrobials sensitivity test indicated that all the isolates had drug resistance.Most of the isolated Salmonella strains had high resistance to ampicillin,enrofloxacin,kanamycin and doxycycline,had high sensitivity to amoxicillin/clavulanate acid,amikacin and imipenem.

Key words: ：Salmonella；drug resistance；drug sensitivity test

文章编号:1007-5038(2016)03-0131-03

中图分类号:S852.612;S858.31

文献标识码:B

作者简介：廖聪(1994-)，女，湖北十堰人，本科，研究方向为动物药理学与毒理学。 *通讯作者

基金项目：东北林业大学大学生创新创业训练计划项目(201410225173)；黑龙江省博士后科研启动金(LBH-Q14002);中央高校基本科研业务费(2572015CA21)；黑龙江省教育厅科学技术研究(指导)项目(12543010)

收稿日期：2015-07-22