不同级别脑胶质瘤中TGF-β1 SRF及波形蛋白表达水平及意义

田　力

辽宁调兵山市铁法煤集团总院神经外科　调兵山　112700



不同级别脑胶质瘤中TGF-β1 SRF及波形蛋白表达水平及意义

田力

辽宁调兵山市铁法煤集团总院神经外科调兵山112700

【摘要】目的探讨不同级别脑胶质瘤中转化生长因子β1(TGF-β1)、血清应答因子(SRF)及波形蛋白表达水平及意义。方法分析40例脑胶质瘤患者的临床资料。结果研究组TGF-β1、SRF及波形蛋白阳性表达率分别为65.0%(26/40)、45.0%(18/40)、77.5%(31/40)，均显著高于对照组的26.7%(8/30)、13.3%(4/30)、7.1%(2/30)(P<0.05)，肿瘤级别Ⅲ+Ⅳ级患者的TGF-β1、SRF及波形蛋白阳性率分别为77.3%(17/22)、63.6%(14/22)、86.4%(19/22)，均显著高于Ⅰ+Ⅱ级患者的50.0%(9/18)、22.2%(4/18)、66.7%(12/18)(P<0.05)，TGF-β1与SRF、SRF与波形蛋白均呈显著正相关(P<0.05)。结论脑胶质瘤中TGF-β1、SRF及波形蛋白表达水平显著提升，与其恶性程度显著相关。

【关键词】不同级别脑胶质瘤；TGF-β1；SRF；波形蛋白

SRF属于MADS转录因子家族成员，从进化上来说具有高度保守性。相关研究表明，SRF能够对立早基因、细胞骨架、黏附相关基因等的表达进行有效调控。最新研究表明，胃癌、肝癌等多种恶性肿瘤中均具有较高的SRF表达水平，同时还具有较高的间质标记物波形蛋白表达水平及较低的上皮标记物E-钙黏蛋白表达水平，而通常情况下该过程发生的前提条件为生长因子信号活化和调控，如TGF-β1。相关研究表明[1]，SRF能够为肿瘤细胞对间质细胞表型的获取提供良好的前提条件，直接而深刻地影响着肿瘤的转移和浸润。本研究对40例脑胶质瘤患者的临床资料进行分析，探讨不同级别脑胶质瘤中TGF-β1、SRF及波形蛋白表达水平及意义，报告如下。

1资料与方法

1.1一般资料运用随机抽样方法选取我院2011-01—2014-09收治的40例脑胶质瘤患者为研究组，均接受手术切除治疗，均经病理确诊为脑胶质瘤，均知情同意；男23例，女17例，年龄14～77岁，平均(47.5±10.2)岁；病程1～3 a，平均(1.1±0.4)a。Ⅰ级2例，Ⅱ级16例，Ⅲ级13例，Ⅳ级9例。另选取我院同期收治的30例脑胶质瘤患者的胶质瘤旁正常脑组织标本为对照组，男18例，女12例，年龄14～77岁，平均(43.6±10.7)岁；病程1～3 a，平均(1.0±0.3)a。2组一般资料差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。本研究通过医院伦理委员会批准。

1.2方法依次常规石蜡切片、HE染色、组织学观察。以厚度为5 μm连续切片，分别将Santa Cruz 公司生产的抗TGF-β1(sc-146)、SRF(sc-335)及EPITOMICS 公司生产的波形蛋白抗体(2707-1)加入其中，采用SP法试剂盒(SP-9001，SP-9002)进行免疫组织化学染色，抗体浓度均为1%，对其进行热修复，修复过程中运用枸盐酸。购买北京中山金桥生物技术有限公司生产的试剂盒ZLI-9031进行DAB显色。TGF-β1阳性的标准为有棕黄色颗粒出现在细胞质内，SRF和波形蛋白表达分别在细胞核定位、主要为胞浆，通常情况下丝状、索状条纹为其主要表达[2]。400倍视野下认真细致地观察10个视野，细胞个数为100个/视野，计算阳性细胞百分比。依据4级计分：阳性细胞数在10%以下，计0分；阳性细胞数10%～25%，计1分；阳性细胞数26%～50%，计2分；阳性细胞数51%～75%，计3分；阳性细胞数75%以上，计4分[3]。染色强度评分标准：无色、淡黄色、棕黄色、棕色或棕褐色分别为0分、1分、2分、3分。阳性标准为两者乘积至少为4分[4]。

1.3统计学分析运用Excel将数据库，采用统计学软件SPSS 20.0进行统计学分析，计数资料采用率(%)表示，组间比较行χ2检验，相关性分析采用Spearman相关系数，P<0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.12组TGF-β1、SRF及波形蛋白阳性表达水平比较研究组TGF-β1、SRF及波形蛋白阳性表达率均显著高于对照组(P<0.05)。见表1。

表1　2组TGF-β1、SRF及波形蛋白阳性

注：与对照组比较，*P<0.05

2.2研究组TGF-β1、SRF及波形蛋白阳性表达的影响因素研究组肿瘤级别Ⅲ+Ⅳ级患者的TGF-β1、SRF及波形蛋白阳性率均显著高于Ⅰ+Ⅱ级(P<0.05)，但不同性别、年龄、脑肿瘤部位、肿瘤大小患者的TGF-β1、SRF及波形蛋白阳性率差异均无统计学意义(P>0.05)。见表2。

表2　研究组TGF-β1、SRF及波形蛋白阳性表达

注：与Ⅰ+Ⅱ级比较，*P<0.05

2.3研究组TGF-β1、SRF及波形蛋白表达的相关性分析研究组TGF-β1与SRF、SRF与波形蛋白均呈显著正相关(P<0.05)。见表3。

表3　研究组TGF-β1、SRF及波形蛋白表达的

3讨论

胶质瘤属于一种颅内肿瘤，临床极为常见，主要特点为侵袭性生长，手术很难完全切除，同时，放化疗会受到胶质瘤细胞的抵抗，一定程度上造成患者术后具有较高的复发率及病死率。相关研究表明[5]，含有血清应答元件的人类基因有300个，占全部基因组的1%左右。可以看出，SRF的作用之一是多种转录调控。SRF在细胞内结合DNA的CArG-box的形式为同源二聚体。近年来，相关研究表明[6]，SRF在多种肿瘤组织中表达较高。可以看出，在肿瘤的发生发展进程中，SRF的主要作用为调控；TGF-β1会为肿瘤进展及侵袭提供良好的前提条件，这一事实已得到临床普遍认可，其在多种肿瘤细胞及组织中的表达均较高，直接而深刻地影响肿瘤血管的生成、增值及侵袭。Zhang等[7]研究表明，在高级别和低级别脑胶质瘤中，TGF-β1分别达到93.8%和43.10%的阳性表达率，高级别脑胶质瘤的TGF-β1阳性表达率显著高于低级别脑胶质瘤，同时其表达随着微血管密度的提升而提升，降低而降低。体外研究也表明[8]，TGF-β1刺激胶质瘤SHG-44细胞及U251细胞能够对细胞迁移进行明显诱导；波形蛋白直接而深刻地影响脑胶质瘤的增值、转移及患者预后等，因此，临床普遍认为其可作为一种肿瘤标志物。现阶段，其作为一种间质标记物得到临床普遍认可，在肿瘤细胞获取迁移及侵袭能力过程中发挥至关重要的作用[9-10]。在神经系统发育中，神经胶质原纤维酸性蛋白表达不同于两种中间丝结构蛋白波形蛋白，通常情况下，波形蛋白在胶质瘤细胞恶性转化的诊断中可能能够作为一项重要的参考指标[11-12]。本研究表明，研究组TGF-β1、SRF及波形蛋白阳性表达率均显著高于对照组(P<0.05)，肿瘤级别Ⅲ+Ⅳ级患者TGF-β1、SRF及波形蛋白阳性率均显著高于Ⅰ+Ⅱ级(P<0.05)，TGF-β1与SRF、SRF与波形蛋白均呈显著正相关(P<0.05)，充分说明了脑胶质瘤中TGF-β1、SRF及波形蛋白表达水平显著提升，与其恶性程度显著相关。

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(收稿2015-01-15)

【中图分类号】R739.41

【文献标识码】A

【文章编号】1673-5110(2016)03-0065-02