石斛治疗血栓闭塞性脉管炎患者炎症细胞因子变化的观察

曾德创邹才华李近都梁 烨▲罗仕官陈宏明唐习强李天资

1.右江民族医学院附属医院，广西百色 533000；2.广西医科大学第一附属医院，广西南宁 530021

石斛治疗血栓闭塞性脉管炎患者炎症细胞因子变化的观察

曾德创1邹才华1李近都2梁 烨1▲罗仕官1陈宏明1唐习强1李天资1

1.右江民族医学院附属医院，广西百色 533000；2.广西医科大学第一附属医院，广西南宁 530021

目的探讨铁皮石斛处方辅助治疗血栓闭塞性脉管炎（TAO）患者的临床效果和白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-8（IL-8）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平变化与效果。方法选取TAO患者62例，经医院伦理委员会审批，随机分为治疗组和对照组两组，每组31例，对照组单纯用西药药物治疗，治疗组用铁皮石斛处方加西药药物治疗；两组疗程均为3个月。比较两组患者治疗前后临床效果和血清IL-6、IL-8和TNF-α水平。结果治疗组临床有效率96.8%，对照组临床有效率93.5%，两组临床有效率差异没有统计学意义（χ2=0.553，P=0.758）；治疗组治疗前IL-6、IL-8和TNF-α水平分别为（4.25±2.71）ng/L、（826.0±97.3）ng/L和（4.62±2.32）ng/L，治疗后分别为（1.33±0.61）ng/L、（231.7±76.0）ng/L和（1.74±0.54）ng/L。对照组治疗前为（4.18±2.35）ng/L、（852.4±84.5）ng/L和（4.43±2.16）ng/L，治疗后为（3.57±2.16）ng/L、（619.8±73.4）ng/L和（3.97±1.61）ng/L。两组治疗前血清IL-6、IL-8和TNFα平均值高，治疗后两组患者IL-6、IL-8和TNF-α水平均有不同程度降低（P＜0.01）；治疗组治疗后血清IL-6、IL-8平均水平低于对照组（P＜0.01），提示治疗组对患者免疫损伤的改善作用优于对照组。结论铁皮石斛处方辅助治疗TAO对改善患者的临床症状和炎症细胞因子功能紊乱的效果优于单纯用西药治疗，为提高临床疗效奠定基础。

铁皮石斛；血栓闭塞性脉管炎；炎症细胞因子；瘀血阻络证

血栓闭塞性脉管炎（thromboangiitis obliterans，TAO）是一种病变始于机体远端的，发生于中小动脉的，累及邻近静脉和神经的进行性、节段性、非感染性性血管损害疾病，病变累及脉管全层，其病理变化主要是病变的血管出现继发腔内炎症细胞浸润性血栓、管腔闭塞和机化[1]。TAO病因尚不完全明确，目前认为，本病在吸烟，性激素代谢紊乱，或继发于急慢性感染所致的自身免疫功能紊乱等有关[2]。病变主要累及四肢的中小动脉，常见于下肢[3]。祖国医学认为，TAO是气血亏虚，脉道痹阻，血运不畅，肢末失养所致，治疗上应用逐瘀泻热[4]，常用清热、养阴、活血、通络疗法。石斛（Dendrobium）为兰科草本植物，具有清热养阴、活血化瘀、通脉散结等功效[5]。现代医学认为，石斛的酯类成分，具有活血化瘀、扩张血管和抗血小板凝结等功效，可治疗血脉瘀阻，脱疽等顽疾[6]。为探讨石斛对TAO的疗效，我们对收治的62例TAO血脉瘀阻患者，随机分为治疗组和对照组两组，每组31例，治疗组：铁皮石斛处方加西药药物治疗；对照组：单纯用西药治疗，比较两组患者治疗前后的血清白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-8（IL-8）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

62例随机分为治疗组和对照组两组，每组31例。治疗组31例均为男性，年龄31～46岁，平均（42.6±6.7）岁，病程≤3年25例，＞3年6例，局部缺血期20例，营养障碍期9例，坏疽期2例，间歇性跋行22例，静息痛9例；对照组31例均为男性，年龄30～47岁，平均（41.1±6.9）岁，病程≤3年26例，＞3年5例，局部缺血期21例，营养障碍期8例，坏疽期2例，间歇性跋行21例，静息痛10例。两组患者平均年龄、病程、病期和主要症状构成差异无统计学意义（t=0.868，χ2=0.111，χ2=0.083，χ2=0.076，P＞0.05）。提示两组患者平均年龄病程、病期和主要症状构成等构成的均衡性好，具有可比性。

1.2 入选标准

病例选取与分组原则研究方案经医院伦理委员会审批，入选患者经知情告知，并签署知情同意书后进入临床观察，选取2013年1月～2016年6月在我院心胸外科就诊患者，按中华全国中医学会脉管专业委员会[7]《血栓闭塞性脉管炎的中医诊断及疗效评定标准》，有下列（1）和（6），并具备（2）（3）（4）和（5）中≥1条的患者。（1）有下列症状之一：①病变部位有反复出现游走性血栓性静脉炎；②间歇性跋行；③静息痛；④有酸、胀、麻、木等症状之一；⑤发凉或烧灼感；⑥病变部位皮肤、汗毛、肌肉呈营养不良性改变；⑦病变部位有干性或湿性坏疽。（2）患肢中、小动脉波动减弱或消失。（3）buerger试验阳性。（4）多普勒超声血流检查，踝肱指数（ABI）＜0.5。（5）数字减影血管造影（DSA）表现为内膜不规则，轮廓毛糙，血管扭曲，管腔的狭窄闭塞；周围有树根状的侧支循环，病变远近端的管壁光滑平整。（6）①舌象：舌质多见淡紫、青紫、可有癖点或疲斑，苔白润或见舌质红或绛，苔黄或舌质淡，苔薄白等； ②脉象：可见弦紧或沉涩或弦数或弱等。排除标准：（1）脉管内血栓形成；（2）多发性大动脉炎；（3）结节性动脉周围炎；（4）红斑性狼疮、银屑病、雷诺病等自身免疫性疾病；（5）糖尿病、感染、冻伤或其他缺血性慢性营养障碍引起的局部组织损害。中医诊断和分型：脉络血瘀证： 患肢发凉，麻木，酸胀较重，持续性疼痛，夜间加剧，间歇性跋行。皮肤可呈紫红色，或见紫褐斑，趾（指）甲增厚、变形、生长缓慢，汗毛稀少或脱落，肌肉萎缩。中、小动脉搏动减弱或消失。舌质青紫有瘀点或瘀斑，苔白润，脉沉紧或沉涩。

1.3 治疗方法

（1）对照组：①盐酸尼卡地平缓释片（重庆科瑞制药集团有限公司，H10980159），10mg/d，口服。②肠溶阿司匹林（北京曙光药业有限责任公司，H11020827）10mg/d，口服。③己酮可可碱肠溶片（大同市卫华药业有限责任公司，0421106），0.6g/d，口服。④疼痛剧烈者用止痛剂：双氯芬酸、美施康定或哌替啶。3个月为1疗程。（2）治疗组在对照组的基础上加铁皮石斛处方（广西根辽生物技术有限公司），铁皮石斛、玄参、金银花、生地黄各15g，当归，知母、紫花地丁、黄柏、赤芍、天花粉各9g，生甘草6g，水煎服，每日l剂。疼痛剧烈者，加丹参12g、延胡索9g、乳香、没药各3g。300mL水慢火煎煮50min，每天分2次口服，3个月为1疗程。

表2 石斛治疗血栓闭塞性脉管炎患者炎症细胞因子变化情况

表2 石斛治疗血栓闭塞性脉管炎患者炎症细胞因子变化情况

注：治疗前后比较：AP＜0.01；与对照组比较：BP＜0.01

组别 n 观察时期 IL-6（ng/L） IL-8（ng/L） TNF-α（ng/L）治疗组 31 治疗前 4.25±2.71A 826.0±97.3A 4.62±2.32A31 治疗后 1.33±0.61B 231.7±76.0B 1.74±0.54对照组 31 治疗前 4.18±2.35 852.4±84.5A 4.43±2.16 31 治疗后 3.57±2.16 619.8±73.4 3.97±1.61治疗前治疗组与对照组比较 t 0.914 1.123 0.334 P 0.219 0.270 0.349治疗后治疗组与对照组比较 t 5.557 20.451 7.312 P 0.000 0.000 0.000治疗组治疗前与治疗后比较 t 5.853 26.801 6.732 P 0.000 0.000 0.000对照组治疗前与治疗后比较 t 1.064 11.551 0.951 P 0.296 0.000 0.056

1.4 检测方法

治疗组和对照组于治疗前和治疗3个月末各抽血1次，2组受检者采血前10h禁食，于清晨7：00～8：30时抽静脉血5mL。以3000r/min，离心20min，取血浆，-70℃冻存备检测，IL-6和IL-8的检测方法采用放免分析法，试剂由广西根辽生物技术有限公司提供。TNF-α采用ELISA双抗体夹心法，试剂由上海将来实业股份有限公司提供。酶联免疫检测仪使用BIOBASE-EL10A酶联免疫分析仪（济南博鑫生物技术有限公司）。

1.5 疗效判断标准

按中华全国中医学会脉管专业委员会[7]《血栓闭塞性脉管炎的中医诊断及疗效评定标准》：（1）间歇性跋行：用6级记分法。①行走1500米无不适应症状者，记0分；②行走1000米病腿出现不适症状者，记1分；③行走500米病腿出现不适症状者，记2分；④行走100米病腿出现不适症状，记3分；⑤行走50米病腿即出现不适症状，记4分；⑥行走5米即出现不适症状者，记5分。治疗后，评分为0分者为治愈，降低2分为好转，降低1分为有效，分数不变或加重为无效。（2）静息痛：用5级记分法。①病腿无静息痛出现者，记0分；②劳累后病腿出现静息痛，或出现静息痛每月不超过1次，记1分；③无明确原因病腿出现静息痛，或出现静息痛每月不超过2次，记2分；④病腿静息痛不影响睡眠，或出现静息痛每月不超过3次，记3分；⑤病腿静息痛影响睡眠，或出现静息痛每月3次以上，记4分。治疗后，评分为0分者为治愈，降低2分为好转，降低1分为有效，分数不变或加重为无效。

1.6 统计学方法

2 结果

2.1 石斛治疗血栓闭塞性脉管炎患者临床效果与对照组比较

治疗组临床有效率96.8%，对照组临床有效率93.5%，两组临床有效率差异无统计学意义（χ2=0.553，P=0.758），见表1。

表1 石斛治疗血栓闭塞性脉管炎患者临床治愈情况

2.2 石斛治疗血栓闭塞性脉管炎患者IL-6、IL-8和TNF-α平均水平与对照组比较

两组治疗前血清IL-6、IL-8和TNFα平均值高，治疗后两组患者IL-6、IL-8和TNF-α水平均有不同程度降低（P＜0.01）；治疗组治疗后血清IL-6、IL-8平均水平低于对照组（P＜0.01），提示治疗组对患者免疫损伤的改善作用优于对照组，见表2。

3 讨论

血栓闭塞性脉管炎患者因患肢循环障碍肢体缺血引起的局部皮肤疮白、冰凉、麻木、胼胝感、针刺感或烧灼感等感觉障碍，并有局部疼痛，间歇性跛行，静息痛等症状，进而出现局部营养障碍包括皮肤干燥，光滑，水肿，毳毛脱落，皮肤出现水疱，瘀点，瘀斑，色素沉着，肢端发凉等，如致病因素不能排除，临床症状反复发作，局部组织因较长时间的缺氧缺血，出现坏死、机化和坏疽[8]。坏死是以酶溶性变化为特点的活体内局部组织细胞的死亡。机化（organization）是由新生的肉芽组织吸收取代坏死组织的过程。坏疽（gangrene）是继发腐败菌感染，坏死组织经腐败菌分解产生硫化氢，硫化氢与血红蛋白中铁离子结合形成硫化铁，使坏死组织呈黑色[9]。坏死的肢端不但不能恢复生命细胞代谢，还会不断释放有害物质威胁机体，产生严重后果，临床上为了保障患者生命不得不给患者截肢，因此过去本病致残高，随着医学科学的快速发展，诊疗手段、方法和技术正在不断提高，TAO的早期诊断率和临床治愈率正在逐年提高[10]。到目前为止TAO发病机制尚不完全清楚，目前认为TAO发病可能与机体免疫反应异常有关，TAO患者出现免疫调节机能障碍，调节细胞的生理功能紊乱，影响其免疫系统调控，出现临床症状[11]。祖国医学认为，血栓闭塞性脉管炎是本病的发生与长期吸烟、饮食不当、环境、遗传及外伤等因素的作用下，患者脾气不健，肝肾不足，寒湿侵袭，凝滞脉络所致。患者因脾肾阳气不足，不能温养四肢，复感寒湿之邪，则气血凝滞，经络阻遏，或因患者肝肾不足，或寒邪郁久化热蕴毒，湿毒浸淫，脉络闭阻，肢末无血供养，而致肢端坏死，甚则脱落[12]。患者在出现肢端坏死之前，治疗上应以中西医结合药物治疗为主，西医方面，主要用抗炎，扩张血管，改善红细胞功能，降低纤维蛋白原，抗血小板聚集等[13]。中医方面，根据患者的症型不同辩症诊治，对于血脉瘀阻证患者中药则主要用活血化瘀，通络止痛；对于寒湿阻络证患者则用温阳散寒，活血通络；对于热毒炽盛证患者则用清热解毒，养阴活血为主[14]。从本组资料来看，两组患者临床效果的治愈率差别不大（P＞0.05），但两组患者治疗前，其IL-6、IL-8和TNF-α水平者高，提示TAO患者有细胞因子代谢紊乱现象，IL-6、IL-8和TNF-α水平异常增高与TAO患者临床症状相关；治疗后两组患者的IL-6、IL-8和TNF-α水平都有不同程度的下降，提示临床治疗可有效缓解患者细胞因子代谢紊乱的状况，对患者康复有益，治疗组治疗后血清IL-6、IL-8和TNF-α平均水平低于对照组（P＜0.01），提示中西结合治疗对患者免疫损伤的改善作用优于单纯用西药治疗。本组资料表明，早期诊断，提早治疗，合理用药，可有效缓解TAO患者的临床症状。祖国医学认为脱疽，是因火毒内蕴或寒湿化热，血行不畅，气血凝滞，瘀阻筋脉而致[15]。本研究的石斛处方中，在用银花清热解毒，当归活血散瘀，玄参泻火解毒和甘草清解百毒等的作用下，再用石斛益胃生津，滋阴清热，具有活血化瘀益气通络功效，达到破瘀散结、通络止痛、补气扶正、气血调和之功效，对提高TAO患者抗病能力，降低疾病的炎症反应，调节免疫功能水平有积极的作用[16]，为提高临床疗效奠定基础[17]。

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Observation changes of inflammatory cytokines in patients with thrombotic obliterans treated by dendrobium

ZENG Dechuang1ZOU Caihua1LI Jindu2LIANG Ye1LUO Shiguan2CHEN Hongming1TANG Xiqiang1LI Tianzi1

1.Affiliated Hospital of Youjiang Medical University for Nationalities, Baise 533000, China; 2.The First Affiliated Hospital of Guangxi Medical University, Nanning 530021, China

ObjectiveTo discuss iron caulis dendrobium prescription auxiliary treatment of thromboangiitis obliterans(TAO) in patients with clinical effect and interleukin 6(IL-6), interleukin 8(IL-8) and tumor necrosis factor alpha-α(TNF-α) level change and the effect.MethodsApproved by hospital ethics committee, 62 cases of patients with TAO were selected and randomly divided into treatment group and control group with 31 cases in each. Patients in control group were only treated with western medicine drugs, and patients in treatment group were treated with iron caulis dendrobium prescription plus western medicine drugs. The course of the two group was three months. the clinical effect and the level of serum IL-6, IL-8 and TNF-α of the two groups before and after the treatment were compared.ResultsClinical effective rate of treatment group was 96.8%, and the clinical effective rate of control was 93.5%, and the difference was not statistically significant betweem the two groups(χ2= 0.553, P=0.553). The serum IL-6, IL-8 and TNF-α of treatment group before treatment were (4.25±2.71)ng/L, (826.0±97.3)ng/L and (4.62±2.3) ng/L, and the serum IL-6, IL-8 and TNFα of treatment group after treatment were (1.33±0.61)ng/L, (231.7±76.0) ng/L and (1.74±0.54)ng/L. The serum IL-6, IL-8 and TNF-α of control group before treatment were (4.18±2.35)IL-8 and the level of TNF-α of the two groups had varying degrees of reduction(P＜ 0.01). The average levels of serum IL-6 and IL-8 in treatment group were lower than those in control group(P＜ 0.01), which showed that the improvement of immune injury in treatment group was better than that in control group.ConclusionThe effect of iron caulis dendrobium prescription auxiliary treatment of thromboangiitis obliterans (TAO) in improving clinical symptoms and inflammatory cytokine dysfunction in patients is better than pure western medicine treatment. It lays the foundation for improving the clinical curative effect.

Dendrobium; Thromboangiitis obliterans; Inflammatory cytokines; Blood-stasis obstruction

R282.71

A

2095-0616（2016）21-09-05

2016-09-14）

国家自然科学基金（81060028）；广西重大专项基金（桂科重1598005-9，桂科攻1355005-3-7）；广西高等学校科学研究资助项目（KY2015YB230）；广西壮族自治区百色市学研究资助项目（百科计20141104，2014069）。

▲通讯作者ng/L, (852.4±84.5)ng/L and (4.43±2.16)ng/L, and the serum IL-6, IL-8 and TNF-α of control group after treatment were (3.57±2.16)ng/L, (619.8±73.4)ng/ L and (3.97±1.61)ng/L. The average of serum IL-6, IL-8 and the level of TNF-α of the two groups were high before treatment, and after treatment, serum IL-6,