核苷酸还原酶M1表达对老年晚期非小细胞肺癌化疗疗效的影响

江　波　何文杰　涂长玲　刘　坤

(昆明医科大学第三附属医院　云南省肿瘤医院干疗科，云南　昆明　650118)



核苷酸还原酶M1表达对老年晚期非小细胞肺癌化疗疗效的影响

江波何文杰涂长玲刘坤

(昆明医科大学第三附属医院云南省肿瘤医院干疗科，云南昆明650118)

摘要〔〕目的探讨核苷酸还原酶M1(RRM1)的表达对老年晚期非小细胞肺癌(NSCLC)化疗疗效的影响。方法分为治疗组和对照组，每组40例。治疗组通过免疫组织化学法检测肺癌组织RRM1的表达，根据RRM1的表达选择化疗药物，RRM1低表达选择吉西他滨(1 000 mg/m2第1、8天，每21 d为1个周期)化疗，RRM1高表达选择紫杉醇(175 mg/m2第1天，每21 d为1个周期)化疗；对照组只需根据医生的意愿选择吉西他滨或紫杉醇化疗。结果治疗组中不同性别、组织类型及分期患者的RRM1表达差异无统计学意义(P>0.05)；治疗组的疗效及疾病控制率明显优于对照组(P<0.05)；两组的治疗方式与不良反应均无明显差异。结论根据RRM1的表达对老年晚期NSCLC患者进行选择性用药。

关键词〔〕 核苷酸还原酶M1；非小细胞肺癌；化疗

第一作者：江波(1973-)，女，硕士，副主任医师，主要从事肺癌的化疗和靶向治疗及其肺癌生物标志物的研究。

过去10年间，肺癌的发病率及死亡率在≥70岁的人群中明显上升〔1〕。因此，老年肺癌的治疗是肿瘤学界面临的越来越普遍的问题。第三代化疗药物(吉西他滨、紫杉醇、多西他赛等)单药化疗是非选择性老年晚期非小细胞肺癌(NSCLC)患者的基本治疗，可延长生存期、改善生活质量。但是目前老年晚期NSCLC的化疗疗效不容乐观，单药间比较疗效相近，有效率约20%〔2〕。如何选择性用药以更好地提高不同化疗药物的疗效是临床医师面临的难题。本研究探讨老年晚期NSCLC根据肺癌组织的核苷酸还原酶M1(RRM1)表达选择化疗药物的可行性，从而为老年晚期NSCLC化疗药物的选择提供依据。

1材料与方法

1.1临床资料选取2009年10月至2013年3月我科收治的老年晚期NSCLC患者80例，患者均未接受过抗肿瘤化疗药物治疗。均经病理组织学或细胞学检查确诊，无化疗禁忌证，预计生存时间>3个月。分为两组。治疗组：40例，男32例，女8例，年龄70～76岁，中位年龄73.6岁，其中腺癌22例，鳞癌18例，ⅢB期12例，Ⅳ期28例。对照组：40例，男29例，女11例，年龄70～77岁，中位年龄74.2岁，其中腺癌24例，鳞癌16例，ⅢB期10例，Ⅳ期30例。化疗前生活质量(PS)评分0～2分，血常规、肝肾功、心电图均正常。病理组织分型按WHO组织学分类(1998)标准，分期按1997年国际抗癌联盟(UICC)制订的标准。两组一般资料具有可比性。

1.2RRM1检测 治疗组40例患者的肺癌组织标本均在化疗前采用SP免疫组化法检测RRM1蛋白表达,RRM1抗体工作浓度均为1∶100，以已知阳性标本为阳性对照,以PBS代替一抗作为阴性对照。标本经4～5 μm厚石蜡切片，常规脱蜡、水化、微波修复抗原后，按SupervisionTM试剂盒说明书操作。每张切片加3%H2O2100 μl孵育10 min，弃去PBS液，再在切片上滴加一抗，室温孵育4 h,PBS清洗3 min，重复3次；弃去PBS液，每张切片滴加生物素标记的二抗工作液，室温孵育30 min DAB显色，苏木素复染，脱水，透明，中性树胶封固，镜检。采用双盲法阅片,Olympus光学显微镜高倍镜下随机选择5个视野，每个视野计数100个细胞。胞质中RRM1染色为棕黄色者评定为阳性细胞。样本含<50%的阳性染色细胞为RRM1(-)即低表达，≥50%阳性染色细胞为RRM1(+)即高表达。

1.3治疗方法(1)治疗组：40例患者的肺癌组织标本均进行了RRM1的表达检测，RRM1低表达者化疗采用吉西他滨单药化疗，吉西他滨1 000 mg/m2第1、8天，每21 d为1个周期；RRM1高表达者化疗采用紫杉醇单药化疗，紫杉醇175 mg/m2第1天，每21 d为1个周期；(2)对照组：40例患者均未进行肺癌组织标本RRM1的表达检测，根据临床医师的意愿，选择吉西他滨或紫杉醇进行单药化疗，药物剂量、方法与治疗组相同；两组患者均治疗2～6周期，疾病进展或患者不能耐受时停药。

1.4疗效及不良反应评价标准参照RECIST实体瘤近期疗效评价标准进行疗效评价，分为完全缓解(CR)、部分缓解(PR)，疾病稳定(SD)，疾病进展(PD)。客观有效率(RR)为(CR+PR)/总数×100%，疾病控制率(DCR)为(CR+PR+SD)/总数×100%；不良反应按照WHO分级标准评定。

1.5统计学方法应用SPSS13.0统计软件进行χ2检验及Pearson分析。

2结果

2.1治疗组RRM1的表达40例治疗组的肺癌组织标本中RRM1高表达18例(见图1)，表达率为45%。不同性别(男43.8%，女50%)，组织类型(腺癌41.7%，鳞癌50%)及分期(ⅢB期50%，Ⅳ期42.9%)患者的RRM1表达差异均无统计学意义(χ2=0.795,P=0.427;χ2=0.846,P=0.405;χ2=0.389,P=0.733)。

图1　RRM1免疫组织化学染色情况 (SP，×400)

2.2近期疗效两组中80例患者均可评价疗效，无1例达完全缓解。治疗组患者中，PR10例(25%)，NC7例(17.5%)，PD23例(57.5%)；对照组患者中，PR5例(15%)，NC5例(12.5%)，PD20例(72.5%)。治疗组与对照组的客观有效率分别为25%和15%，两组差异显著(χ2=8.146,P=0.008)；治疗组与对照组疾病控制率分别为42.5%和27.5%，两组差异显著(χ2=9.348,P=0.005)。

2.3治疗方式与不良反应(1)治疗组中，22人接受了吉西他滨化疗，共完成化疗79个周期，平均完成3.6个周期，化疗不良反应主要表现为骨髓抑制、胃肠道反应等，Ⅲ级及以上的不良反应发生率为13.6%；另有18人接受了紫杉醇化疗，共完成化疗68个周期，平均完成3.8个周期，化疗不良反应主要表现为骨髓抑制、胃肠道反应等，Ⅲ级及以上的不良反应发生率为5.6%；(2)对照组中，20人接受了吉西他滨化疗，共完成化疗78个周期，平均完成3.9个周期，化疗不良反应主要表现为骨髓抑制、胃肠道反应等，Ⅲ级及以上的不良反应发生率为10%；另有20人接受了紫杉醇化疗，共完成化疗80个周期，平均完成4个周期，化疗不良反应主要表现为骨髓抑制、胃肠道反应等，无Ⅲ级及以上的不良反应发生。

3讨论

近年研究显示多种分子标志物对化疗疗效有一定的预测作用〔3〕。RRM1是核苷酸还原酶影响吉西他滨疗效的成分〔4〕，是近年来发现的一个可能有助于指导临床是否选择吉西他滨化疗的分子标志物。有基础及临床研究显示RRM1高表达与吉西他滨耐药有关〔5〕。一项来自于75例NSCLC患者肿瘤活检组织的RRM1的表达水平显示：低水平RRM1表达的患者经过吉西他滨/顺铂联合化疗后疗效会更好；但这种预测价值在应用长春瑞滨/顺铂和紫杉醇/顺铂方案化疗的患者身上看不到〔6〕。Bepler等〔7〕进行的一项临床研究，接受吉西他滨/卡铂化疗的局部晚期NSCLC患者中，RRM1表达与肿瘤缩小成负相关(r=-0.498,P=0.002),也就是说，瘤内RRM1低表达患者化疗疗效好于高表达者。Jennifer等〔8〕在研究两个对吉西他滨耐药的NSCLC细胞株时发现RRM1呈阳性表达，认为其可以作为预测吉西他滨化疗敏感程度的生物标志物。

本研究选择老年人为研究对象，化疗药物选择了第三代单药化疗去除了铂类药物间相互作用的影响，使研究因素较单一，因此能较好地反映RRM1的表达与吉西他滨疗效间的关系。本研究说明老年晚期NSCLC患者RRM1低表达者能从吉西他滨的化疗中获益，初步提示根据RRM1的表达对老年晚期NSCLC患者进行选择性用药的合理性。

参考文献4

1 高志强,韩宝惠,沈洁，等.晚期非小细胞肺癌RRM1蛋白表达与吉西他滨联合顺铂化疗疗效的关系〔J〕.中国肺癌杂志,2011;14(4):340-4.

2陈良安.EGFR-TKI在非小细胞肺癌二线治疗与一线治疗中的疗效比较〔J〕.解放军医学杂志,2011;36(8):783-7.

3Lee JJ,Maeng CH,Baek SK,etal.The immunohistochemical overexpression of ribonucleotide reductase regulatory subunit M1(RRM1)protein is a predictor of shorter survival to gemcitabine-based chemotherapy in advanced non-small cell lung cancer〔J〕.Lung Cancer,2010;70(2):205-10.

4罗扬，冯凤仪.核苷酸还原酶亚单位M1和内切修复交叉补体1在非小细胞肺癌中的研究进展〔J〕.癌症进展，2008;6(2)：152-6.

5Kim SO,Jeong JY,Kim MR,etal.Efficacy of gemicitabine in patients with non-small-cell lung cancer according to promoter polymorphisms of the ribonucleotide reductase M1 gene〔J〕.Clin Cancer Res,2008;14(10):3080.

6Rosell R,Scagliotti G,Danenberg KD,etal.Transcripts in pretreatmentbiopaiesn from a three-aim randomized trial in meta-static non-small-cell lung cancer〔J〕.Oncogene,2003;22(23):3548.

7Bepler G,Kusmartseva I,Shama S,etal.RRM1 modulated in vitro and in vivo efficacy of gemcitabine and platinum in non-small-cell lung cancer〔J〕.J Clin Oncol,2006;8(11):1292.

8Jennifer D,Davidson Y,Liandong M,etal.An increase in the expression of ribonucleotide reductase large subunit is associated with gemcitabine resistance in non-small-cell lung cancer cell lines〔J〕.Cancer Res,2004;64(76):3761-6.

〔2014-06-17修回〕

(编辑曹梦园)

通讯作者：何文杰(1979-)，男，硕士，主治医师，主要从事肺癌的化疗和靶向治疗研究。

中图分类号〔〕R734.2〔

文献标识码〕A〔

文章编号〕1005-9202(2015)21-6152-02；doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2015.21.071