离子色谱法测定可溶性焦磷酸铁中柠檬酸、焦磷酸的含量

钟春华　陈刚胜　李孝壁　姜涛　胡春勇

【摘要】目的建立了一种离子色谱法测定可溶性焦磷酸铁中柠檬酸、焦磷酸含量的分析方法。方法采用阴子交换色谱柱ionex IonPac AS114mm×250mm），10mmol/L氢氧化钠溶液为流动相，流速为1.0mL/min，电导检测，柱温为30%，检测器温度为35℃。结果柠檬酸在0.05～3.06μg/mL范围线性关系良好，相关系数r=0.9995（n=6），精密度试验的RSD为<0.39%（n=6）；焦磷酸在0.06～4.48μg/mL范围线性关系良好，相关系数r=0.9999（n=6），精密度试验的RSD为<0.39‰（n=6）。结论该方法操作简单、环境好，灵敏度高，测定结果准确、可靠，能满足可溶性焦磷酸铁中柠檬酸、焦磷酸的测定。

【关键词】离子色谱；可溶性焦磷酸铁；柠檬酸；焦磷酸

【中图分类号】R943 【文献标识码】B 【文章编号】2095-0616（2015）21-54-03

可溶性焦磷酸铁（ferric pyrophosphate）为焦硫酸钠、柠檬酸二钠或柠檬酸三钠或柠檬酸、硫酸铁水合物组合的混合物，是由Rockwell Medical Inc研发的一种铁离子吸收调节剂，主要用于接受透析治疗的慢性肾病患者的缺铁性贫血，商品名为Triferic。该产品中规定焦磷酸盐（按焦磷酸钠计）含量应为10.0%～20.0%，柠檬酸盐（按柠檬酸钠计）的含量应为14.0%～30.0%，铁含量应为7.0%～11.0%，对于铁的含量测定采用其他方法进行测定，本文不做研究，主要针对可溶性焦磷酸铁中的焦磷酸盐和柠檬酸盐的含量进行研究。离子色谱法作一种特殊的液相色谱方法，已经应用在食品、药品、化工、化妆品、临床检测等多个行业，作为检测阴离子、阳离子及部分有机酸和有机胺等测定手段，已使用的越来越来广泛。离子色谱法在国外药典中早被采用，2010中国药典中也首次将离子色谱法收入附录，有许多药物本身含量或有关物质无法采用常规液相方法，而逐渐采用离子色谱方法进行测定，在质量控制方面取得了很好的成果。

本研究根据焦磷酸铁中主要成分柠檬酸、焦磷酸等的相关特性，建立了离子色谱测定可溶性焦磷酸铁中柠檬酸盐、焦磷酸盐的测定方法，该方法操作简单、环境污染小，灵敏度高，测定结果准确、可靠，能满足可溶性焦磷酸铁中柠檬酸、焦磷酸的测定。

1实验器材

电子分析天平，梅特勒XS105；热电DIONEX ISC-2100离子色谱，Dionex CERS500抑制器，DS6 Heated Conductivity Cell电导检测器；CHROMELEON 6.8化学工作站；采用阴子交换色谱柱ionex IonPac AS114mm×250mm。

试剂：所有化学试剂均为分析纯，柠檬酸钠（含量大于99.0%，国药集团化学试剂股份有限公司）；焦磷酸钠（含量>98.0%，国药集团化学试剂股份有限公司）；氢氧化钠（含量>99.0%，南京化学试剂公司）；水为娃哈哈纯净水。

2方法与结果

2.1色谱条件

采用阴子交换色谱柱（DIONEX IonPac AS114mm×250mm）；采用以10mmol/L氢氧化钠溶液作为洗脱液，流速为分1.0mL/min；柱温设置为30℃，采用抑制性电导检测器，检测器的温度设置为35℃。

2.2系统适用性

本品主要成分为柠檬酸、焦磷酸、铁，但本方法不研究铁，只对柠檬酸、焦磷酸进行研究，焦磷酸有可能降解会产生一定量的磷酸，故此将柠檬酸、焦磷酸、磷酸按进行混合考查系统适用性。从表1和图1中可以看出三个组分离子分离良好，说明该方法的系统适用性很好。

2.3检测限、定量限

精密称取柠檬酸、焦磷酸适量，用水溶解，配制成一系列溶液，分别进样至信噪比（峰高/基线噪声）（3±1）为检测限，至信噪比（10±2）为定量限，见表2。

2.4线性关系试验

按照标准限度浓度配制线l生试验溶液，柠檬酸钠在0.05～3D6μg/mL，焦磷酸钠在0.06～4.48μg/mL，以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标进行线性回归，线性回归方程分别为：A=0.6930C-0.0251、A=0.7274C+0.0046，相关系数分别为r=0.9995、r=0.9999，说明本方法线性良好，见表3～4。

2.5精密度

精密称取柠檬酸钠、焦磷酸钠适量，用水溶解并定量逐渐稀释成每1mL中含柠檬酸钠、焦磷酸钠各约1.5μg、2.2μg的溶液，平行进样6次，记录色谱图，计算峰面积的平均值和相对标准偏差，见表5～6。

由表5～6的数据显示，6次进样，柠檬酸、焦磷酸的峰面积的平均值分别为1.0224、1.6489，RSD分别为0.39%、0.32%，表明方法的精密度很好。

3讨论

焦磷酸、柠檬酸采用常规的液相方法无法进行控制和检测，通过文献查阅和试验，最终选择了离子色谱方法进行研究和检测，本文选择抑制性电导检测器，采用离子色谱法对可溶性焦磷酸铁中的焦磷酸盐和柠檬酸盐的含量方法进行了研究。由于焦磷酸在溶液状态长期放置时，可能会产生一定量的磷酸，会对焦磷酸铁中焦磷酸盐和柠檬酸的测定有一定的干扰，故此将磷酸也加入到了专属性试验中，通过对焦磷酸盐和柠檬酸、磷酸根的专属性考察，说明分离度能够满足要求，且焦磷酸可能降解产生的磷酸盐不会干扰测定，说明所建立的方法有很好的专属性。

通过检测限、定量限的研究，说明该方法有较高的响应灵敏度，足以满足检测灵明度的要求，另通过对焦磷酸和柠檬酸在一定浓度范围的线性、含量测定精密度等项目的研究，说明方法能有效、准确的测定可溶性焦磷酸铁中焦磷酸盐和柠檬酸的含量。endprint