呼吸科病房鲍曼不动杆菌耐药性及耐药机制研究

2016-01-20王浩斌张凤岐

护理研究 2016年1期

关键词：鲍曼不动杆菌呼吸科耐药性

王浩斌，沈　燕，张凤岐

Study on drug resistance and drug resistance mechanism

of Acinetobacter baumannii in department of respiration ward

Wang Haobin,Shen Yan,Zhang Fengqi

(Affiliated First Hospital of Zhengzhou University,Henan 450052 China)

呼吸科病房鲍曼不动杆菌耐药性及耐药机制研究

王浩斌，沈燕，张凤岐

Study on drug resistance and drug resistance mechanism

of Acinetobacter baumannii in department of respiration ward

Wang Haobin,Shen Yan,Zhang Fengqi

(Affiliated First Hospital of Zhengzhou University,Henan 450052 China)

摘要:[目的]分析我院呼吸科病房鲍曼不动杆菌耐药现状，探讨其耐药机制。[方法]应用法国梅里埃VITEK2 微生物鉴定和药物敏感系统对分离自呼吸科病房的86株鲍曼不动杆菌进行细菌鉴定及药物敏感分析；PCR法检测Ⅰ类整合子分布情况。[结果]鲍曼不动杆菌在痰液中的检出率为80.23%，尿液8.14%，分泌物5.81%，血液3.49%，引流液2.33%；鲍曼不动杆菌敏感率较高的是头孢哌酮舒巴坦(100.00%)、米诺环素(100.00%)，其次是多黏菌素B(98.8%)、替加环素(97.7%)、亚胺培南(89.5%)，对氨苄西林的耐药率为100.00%；Ⅰ类整合子在临床分离的鲍曼不动杆菌中检出率较高。[结论]鲍曼不动杆菌耐药性强，耐药谱广，临床上应加强对鲍曼不动杆菌的实时检测和预防控制。应采取综合措施如加强手卫生知识的培训教育，提高手卫生的依从性，加强痰液、分泌物等体液的引流，合理使用抗菌药物等，以降低鲍曼不动杆菌医院感染的发生率。

关键词:鲍曼不动杆菌；耐药性；整合子；耐药机制；呼吸科

鲍曼不动杆菌(Acinetobacter baumannii，AB)是不动杆菌属中最常见的革兰阴性杆菌，广泛存在于自然界、人类的皮肤及呼吸道等处。该菌在医院环境中分布广泛并可长期存活，在医务工作人员手和各种医疗用具上的检出率较高，是医院(院内)感染的重要条件致病菌之一。由于抗生素的广泛使用，鲍曼不动杆菌耐药性逐渐增加[1]。为了解呼吸科病房鲍曼不动杆菌耐药性，本研究对86例分离自该病区的鲍曼不动杆菌耐药情况进行分析，并采用PCR方法检测其Ⅰ类整合子携带情况，以期探讨鲍曼不动杆菌的耐药机制。

1材料与方法

1.1菌株来源86株鲍曼不动杆菌来自2013年9月—2014年1月我院呼吸科病房病人的痰液、血液、引流液等86份标本的分离培养中获得。86株菌株在标本中的分布见表1。

表1　86株鲍曼不动杆菌的标本来源

1.2细菌鉴定与药物敏感实验细菌分离培养严格按照《全国临床检验操作规程》进行，细菌鉴定与药物敏感试验采用法国梅丽埃VITEK系统进行。多重耐药菌判断标准按照2010年美国等对多药耐药菌共同提出的关于MDROs国际标准化定义建议(草案)[2]实行。用ATCC27853 铜绿假单孢菌进行细菌鉴定和药物敏感试验全程质量控制。

1.3方法

1.3.1模板质粒DNA的提取采用吸附柱法提取细菌DNA，所有模板OD260/OD280比值均在1.8~1.9之间。

1.3.2Ⅰ类整合酶基因与ISCR1的检测采用聚合酶链反应(PCR)检测Ⅰ类整合酶基因和ISCR1。 IntI1 扩增条件：94 ℃预变性4 min；94 ℃变性30 s,52 ℃退火30 s,72 ℃延伸1 min，30个循环；72 ℃延伸10 min。引物序列见表2。

表2　PCR引物序列

1.3.3PCR产物分析取5 μL产物进行2%琼脂糖凝胶电泳，紫外成像仪拍照观察。

2结果

2.1鲍曼不动杆菌对抗菌药物的耐药情况(见表3)

表3　鲍曼不动杆菌对抗菌药物的耐药情况(n=86)

2.2IntI1的检测86株鲍曼不动杆菌中IntI1阳性菌56株，阳性率65.1%；电泳结果如图1。

图1　PCR产物电泳图

2.3Ⅰ类整合子阳性菌株与阴性菌株耐药情况比较(见表4)86株细菌中Ⅰ类整合子阳性株多重耐药率(3类或以上药物)为87.5%，阴性株为26.7%，Ⅰ类整合子阳性株的多重耐药率显著高于阴性株，差异具有统计学意义(P<0.01)，说明Ⅰ类整合子的存在与多重耐药性关系密切。

表4　整合子阳性与阴性鲍曼不动杆菌

3讨论

鲍曼不动杆菌是临床常见的病原菌，近年来其耐药性呈逐渐增加趋势，其中多重耐药、泛耐药性更增加了临床治疗难度。国内外曾报道过鲍曼不动杆菌耐药株的暴发流行[3-6]，其耐药及耐药性播散机制也成为研究人员关注的热点。质粒、整合子等可移动遗传元件通过介导耐药基因的水平传播导致细菌耐药。整合子是一类重要的耐药基因传播元件，凭借其位点重组成分和整合酶基因成分将不同的耐药基因盒整合在一起，介导耐药基因在染色体、质粒及转座子之间的移动，从而导致耐药基因在不同细菌间的播散，引起细菌多重耐药。整合子基本结构包括5’CS、3’CS及二者之间的可变区。5’CS包括编码整合酶的基因、整合子重组位点和可变区启动子；可变区可携带不同种类的耐药基因盒，如：氨基糖苷类、甲氧苄啶类、β-内酰胺类、氯霉素类等；3’CS包含qacE和sul1，分别编码对季铵盐类化合物和磺胺类耐药。本调查分析后发现Ⅰ类整合子阳性株多重耐药性强于Ⅰ类整合子阴性株，说明Ⅰ类整合子在鲍曼不动杆菌多重耐药性的形成中发挥重要作用。近两年研究者发现插入序列共同区(ISCR1)作为重要的遗传元件之一，也参与形成细菌多重耐药性，ISCR以串联形式与整合子相连，ISCR1与Ⅰ类整合子形成的复杂性Ⅰ类整合子值得研究。本病区86株鲍曼不动杆菌80.23%来自痰标本。提示该菌主要引起住院病人的下呼吸道感染，这与文献报道一致[7-8]。

医院内污染的器械及工作人员的手都可以是鲍曼不动杆菌的传播媒介[9-10]，提示应加强诊疗器械的消毒灭菌，严格执行手卫生，提高手卫生的依从性,阻断传播途径，尽量避免鲍曼不动杆菌的传播对病人造成的伤害。

参考文献：

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[3]Chen YS,Lin HH,Wu CH,etal.Colonization of a medical center in Southern Taiwan by epidemic strains of carbapenem and multidrug resistant Acinetobacter baumannii and the genetic organization of their Integrons[J].Jpn J Infect Dis，2009,62(2):155-157.

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[5]张亚英，姜亦虹，沈黎,等．重症监护病房4例泛耐药鲍曼不动杆菌肺部感染暴发[J]．中华医院感染学杂志，2010，20(12)：1794-1796.

[6]王辉,刘颖梅,陈民钧,等.鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类耐药机制的研究[J].中国医学科学院学报,2003,25(5)：567-572.

[7]刘文思，易春梅，邹明祥.2006年湘雅医院鲍曼不动杆菌临床感染分布和耐药性分析[J].实用预防医学,2007，14(6):1718-1720.

[8]黎敏,鲁卫平.鲍氏不动杆菌感染分布及耐药性变迁分析[J].重庆医学，2008，37(3):264-265.

[9]Raka L.Lowbury lecture 2008：infection control and limited resources-searching for the best solutions[J].J Hosp Infect,2009,72：292-298．

[10]Mariwick C，Davey P.Care bundles:the holy grail of infections risk management in hospital[J].Curr Opin Infect Dis,2009,22:364-369.

(本文编辑李亚琴)

收稿日期：(2015-01-13；修回日期：2015-12-14)

作者简介王浩斌，主管护师，本科，单位：450052，郑州大学第一附属医院(内科医学部)；沈燕、张凤岐单位：450052，郑州大学第一附属医院。

基金项目国家临床重点专科建设项目。

中图分类号：R471

文献标识码：A