茉莉花叶水提物对小肠平滑肌的影响

茉莉花叶水提物对小肠平滑肌的影响

翟玉荣刘波莫镇涛李意奇

(遵义医学院珠海校区，广东珠海519041)

摘要〔〕目的观察茉莉花叶水提物对小肠平滑肌的作用。方法采用常规离体灌注小肠平滑肌标本方法，观察给药前后离体家兔小肠平滑肌平均张力、振幅及收缩频率变化，并检测其对在体小鼠小肠推进功能的影响。结果与给药前相比，茉莉花叶水提物槽内终浓度(2.0～6.0)×10-2 g生药/ml可使家兔离体十二指肠平滑肌平均张力及振幅显著降低，并随着给药剂量增加，抑制作用增强，当终浓度为4.0×10-2 g生药/ml时抑制效应达到最大,但各浓度组对收缩频率均无明显影响。40 g生药/kg、20 g生药/kg剂量组对小鼠小肠推进运动亦有显著抑制作用。结论茉莉花叶水提物对家兔离体小肠平滑肌活动及小鼠小肠的推进运动有抑制作用，其作用机制可能与平滑肌细胞膜上的M受体有关，而与α,β受体无关。

关键词〔〕茉莉花叶水提物；小肠平滑肌

中图分类号〔〕R285.5〔文献标识码〕A〔

基金项目：贵州省卫生厅科学技术

通讯作者：刘波(1978-)，男，硕士，讲师，主要从事肾脏及消化生理研究。

第一作者：翟玉荣(1976-)，女，副教授，硕士，主要从事心血管药理学与新药研发工作。

茉莉除了可用于香料物质来源外，还具有一定的药物价值，传统中医药中，茉莉的花、根、叶均可入药〔1〕。有关茉莉花的化学药理研究较多,并取得了一定的成果〔2,3〕。为综合利用资源，国内外对茉莉花芳香性成分以外的化学成分和植物其他部位的成分也进行了一些研究〔4～6〕，目前我国对茉莉花的研究主要停留在花朵上。本实验拟观察茉莉花叶水提物对离体家兔小肠平滑肌活动及小鼠小肠推进运动的影响。

1材料与方法

1.1药物与试剂茉莉花叶水提物(自制，2 g生药/ml)的制备:称取500 g新鲜茉莉花叶(珠海市农科所农业高新技术研究中心提供及鉴定)，加入蒸馏水浸泡30 min，加适量的蒸馏水煮沸后用文火煎煮3次，每次0.5 h，合并3次煎出滤液，静止去渣，然后用旋转浓缩蒸发仪蒸发浓缩后定容至250 ml，即配成浓度为2 g生药/ml备用。碳末混悬液(含碳末0.1 g/ml)。0.1%心得安(常州康普药业有限公司，批号：1205002),0.1%酚妥拉明(江苏康宝制药有限公司，批号：120201)，0.1%氯化乙酰胆碱(北京天宇祥瑞科技有限公司，批号：120806)。

1.2动物新西兰兔8只,雌雄不限,体重2.0～2.5 kg,昆明种小鼠30只,雌雄各半,体重18～22 g。以上动物均由广东省医学实验动物中心提供〔合格证号：SCXK(粤)2012-0002〕。

1.3仪器BL-420E生物信号采集处理系统、张力换能器和恒温平滑肌浴槽均由成都泰盟科技有限公司生产；旋转浓缩蒸发仪由上海亚荣生化仪器厂生产，型号RE-52。

1.4对家兔离体小肠平滑肌的影响①家兔离体小肠平滑肌标本制备及收缩活动记录方法：家兔在实验前禁食24 h，自由饮水，实验前1 h喂食。将家兔倒悬,用木棰猛击兔头枕部，使其昏迷，迅速沿腹部正中切开腹部，找出幽门与十二指肠交界处，以此处为起点，找出十二指肠，剪取肠管一段，置于充氧的室温台氏液的平皿中，洗净肠管内容物，当肠管活动明显时，将十二指肠剪成2～2.5 cm的肠段备用。连接张力换能器、BL-420E生物信号采集系统、计算机和恒温水浴槽。浴槽内温度保持在(37.0±0.5)℃。取一段肠管将其对角的两端用线结扎，一端系在通气管的钩上，另一端与张力换能器相连，使标本垂直悬挂于恒温浴槽内的盛有20 ml台氏液浴管中，持续慢慢通入空气,其速度以持续单个气泡出现而不冲动小肠为宜，调整适宜的肌张力，给予标本2.0 g的基础负荷，待标本自发节律性收缩稳定20 min后开始给药记录。②不同剂量茉莉花叶水提液对小肠平滑肌收缩的影响：待标本自发节律性收缩稳定后，记录一段正常曲线，然后累计加入茉莉花叶水提液,使槽内终浓度分别为(1.0～6.0)×10-2g生药/ml，每次换药后,用(37.0±0.5)℃台氏液反复冲洗肠管3次，待舒缩恢复到用药前水平再加入下组药液，观察给药前3 min和给药后3 min肠管收缩平均张力和收缩频率变化，并计算抑制率〔抑制率=(给药后-给药前)/给药前〕。③心得安、酚妥拉明和乙酰胆碱对茉莉花叶水提物效应的影响：待标本自发节律性收缩稳定后，记录一段正常曲线，然后分别加入0.1%心得安0.1 ml、0.1%酚妥拉明0.1 ml和0.1%乙酰胆碱0.1 ml,分别观察小肠平滑肌收缩活动变化，待各自加入上述药3 min后再分别加入茉莉花叶水提物使其终浓度为4.0×10-2g生药/ml，分别观察上述药对茉莉花叶水提物效应的影响，每次换药方法同②。

1.5对小鼠小肠推进运动的影响昆明种小鼠30只(禁食24 h,不禁水)，随机平均分为空白对照组(蒸馏水)、茉莉花叶水提液高剂量组(40 g生药/kg)和低剂量组(20 g生药/kg)，均采取灌胃给药，每组10只。各组给药后45 min，用碳末混悬液(含碳末0.1 g/ml)0.2 ml/10 g灌胃，20 min后脱颈椎处死小鼠，打开腹腔，分离肠系膜，剪取上端至幽门，下端至回盲部的肠管，置于托盘上将小肠拉直，测量肠管长度作为小肠总长度，从幽门至碳末前沿的距离作为碳末推进距离，计算碳末推进百分率=碳末推进距离(cm)/小肠总长度(cm)。

1.6统计学处理应用SPSS19.0软件行t检验。

2结果

2.1茉莉花叶水提物对家兔离体十二指肠平滑肌活动的影响与给药前相比，茉莉花叶水提物终浓度(2.0～6.0)×10-2g生药/ml对家兔离体十二指肠平滑肌收缩活动均有抑制作用，表现为平均张力和振幅均明显下降(P<0.05或P<0.01)；随着给药剂量增加，其抑制作用增强，在终浓度4.0×10-2g生药/ml时其抑制效应达到最大。但各剂量组对收缩频率无明显抑制作用(P<0.05)。见表1。

表1　茉莉花叶水提液对家兔离体十二指肠平滑肌收缩活动的影响( n=10， ± s)

与给药前比较：1)P<0.05，2)P<0.01

2.2心得安、酚妥拉明和乙酰胆碱对茉莉花叶水提液效应的影响分别加入心得安、酚妥拉明后，与给药前相比，家兔离体十二指肠平均张力和振幅均增加(P<0.05)；加入乙酰胆碱后，与给药前相比，十二指肠平滑肌平均张力显著增加(P<0.05)，但收缩频率无明显变化(P>0.05)。3 min后再加入茉莉花叶水提液(终浓度4.0×10-2g生药/ml)，与单独加入心得安、酚妥拉明或乙酰胆碱相比，十二指肠平均张力和振幅均明显下降(P<0.05)，但收缩频率无明显变化(P>0.05)。见表2。

表2　心得安、酚妥拉明和乙酰胆碱对茉莉花叶

与给药前比较：1)P<0.05；与独立加入心得安、酚妥拉明和乙酰胆碱比较：2)P<0.05

2.3茉莉花叶水提液对在体小鼠小肠推进运动的影响与对照组(0.60±0.02)比较，茉莉花叶水提物40、20 g生药/kg均能明显抑制小鼠小肠推进功能(0.46±0.01、0.49±0.01)(P<0.01)。

3讨论

茉莉花是具有广泛药用价值的植物，其根、叶、花均有药用价值。花可用于治疗腹胀腹泻、结膜炎、皮炎、疮毒等；根有麻醉、止痛之功效，可以用于治疗失眠、头痛、龋齿、跌打损伤；叶用于治疗外感发热、腹胀腹泻等症〔7〕。本实验观察了茉莉花叶水提物对小肠平滑肌收缩活动的影响。结果显示,茉莉花叶水提物终浓度(2.0～6.0)×10-2g生药/ml均可以使家兔离体十二指肠平滑肌平均张力降低，且茉莉花叶水提物40 g生药/kg、20 g生药/kg能明显抑制小鼠小肠推进功能，此结果与茉莉具有收敛、止痛、止泻的功效基本吻合。

小肠的机械活动和电活动受到神经和体液因素调节,也受中药中某些化学物质的调节。消化道平滑肌主要有α,β，M受体分布，α,β受体激动可使小肠平滑肌舒张,M受体可使小肠平滑肌兴奋收缩。本次实验在使用α和β受体阻断剂酚妥拉明和心得安干预后，没有阻断茉莉花叶水提物对小肠平滑肌的抑制效应。在应用M受体激动剂乙酰胆碱干预后，对平滑肌痉挛有一定的拮抗作用，表现为使乙酰胆碱所致的小肠强烈的收缩活动减弱。根据上述结果推测其抑制小肠平滑肌的作用可能与平滑肌细胞膜上的M受体有关，而与α,β受体无关。另外，茉莉花叶提取物减弱乙酰胆碱作用的同时，仍能使离体小肠保持着较好的收缩力并能恢复正常，这对维持小肠的正常活动极有意义。

4参考文献

1黄桂丽.茉莉的化学成分与药理作用的研究进展〔J〕.中外医疗(药物研究)，2010；4(33)：113-4.

2Phanukit K,Chuleratana B,Tanwarat K，etal.Chemical composition,toxicity and vasodilatation effect of the flowers extract of jasminum sambac (L.) Ait.“G.Duke of Tuscany” 〔J〕.Evid Based Compl Alternat Med,2012;2012:471312.

3Kalaiselvi M,Narmadha R,Ragavendran P,etal.Chemopreventive effect and HPTLC fingerprinting analysis of jasminum sambac (L.) ait.extract against DLA-induced lymphoma in experimental animals〔J〕.Appl Biochem Biotechnol,2013;169(4):1098-108.

4蔡柏玲，雷钧涛，唐泽波，等.茉莉花根中化学成分的初步分析〔J〕.吉林医药学院学报，2007;28(1):31-3.

5周琼花，严婷婷，吴艳凤，等.茉莉花叶色素的体外抗氧化活性研究〔J〕.时珍国医国药，2013;24(10):2346-8.

6Ghogomutih R，Bodo B，Nyasse B，etal.Isolation and identification of (2)oliviland (+)cycloolivil from Stereospermum kunthianum 〔J〕.Planta Med，1985;51(5):464.

7温昭君，何燕平，吴韦柳,等.茉莉花茎黄酮的体外抗氧化活性研究〔J〕.时珍国医国药，2012;23(8):1866-7.

〔2014-05-17修回〕

(编辑李相军)