尿RBP、尿mAlb、β2-MG、NAG酶联合检测在糖尿病早期肾损害诊断中的意义

张碧莲

(上饶市立医院检验科，江西上饶334000)

尿RBP、尿mAlb、β2-MG、NAG酶联合检测在糖尿病早期肾损害诊断中的意义

张碧莲

(上饶市立医院检验科，江西上饶334000)

目的探讨联合检测尿液视黄醇结合蛋白(RBP)、微量白蛋白（mAlb)、β2-微球蛋白(β2-MG)、N-乙酰-β-D氨基葡萄糖苷酶(NAG)在糖尿病早期肾损害诊断中的价值。方法将100例糖尿病早期肾损害患者作为糖尿病组和100例健康人作为正常对照组的尿液标本检测RBP、mAlb、β2-MG、NAG酶的含量，分析检测数据，建立病例资料档案，评价各项生物标记物的敏感性以及联合检测的敏感性。结果尿液RBP、mAlb、β2-MG、NAG酶在糖尿病早期肾损害中均有不同程度的增高，与正常对照组比较均有显著性差异（P＜0.05），联合检测此四项指标可显著提高糖尿病早期肾损害的诊断率。结论联合检测尿液RBP、mAlb、β2-MG、NAG酶是诊断糖尿病早期肾损害敏感的实验室指标。

糖尿病；早期肾损害；尿RBP；尿mAlb；β2-MG；NAG酶；联合检测

糖尿病肾病是糖尿病全身微血管病变的主要并发症，早期无明显临床表现，常规检测项目如尿蛋白定性、尿素氮、肌酐等均正常，难以发现肾脏早期的损伤，一旦出现临床表现预后较差。因此，对糖尿病肾病的早期诊断、治疗，阻止或延迟肾病的发生和发展，是当前临床研究的重要课题。本研究检测100例糖尿病早期肾损伤患者及100例健康人尿液中的RBP、mAlb、β2-MG、NAG酶，以探讨多项联合检测在糖尿病早期肾损伤诊断中的价值。

1 对象与方法

1.1 研究对象选择2014年1月-2015年6月期间在我院门诊及住院的糖尿病患者100例为糖尿病组，其中男性58例，女性42例，年龄26～72岁，以上患者均根据临床症状、空腹血糖、糖耐量及胰岛素释放试验确诊为糖尿病，所有患者临床排除各种肾病、尿路感染、高血压、酸中毒等，Urea、Cr和肝功能均正常，尿蛋白定性阴性，尿白蛋白排泄率在20～200mg/24h具有早期肾损害的指标。另选择100例来我院体检中心健康体检者作为正常对照组，其中男性55例，女性45例，年龄30～70岁，均无肾病、糖尿病、高血压、血液病及其他严重疾病，近期未服用任何药物。

1.2 标本收集所有入选本组受试者经知情同意后，留取新鲜晨尿10ml，3000r/min（离心半径12cm）离心10min，取上清液约5ml按操作程序上机检测，同时检测质控尿液。

1.3 仪器、试剂及检测方法尿液RBP、mAlb、β2-MG采用乳胶增强免疫比浊法，检测试剂由德赛诊断系统（上海）有限公司提供。NAG采用终点比色法，检测试剂由宁波美康生物科技有限公司提供，以上指标均在AU-640上检测。

1.4 各项指标参考区间⑴尿RBP参考值：< 0.7mg/L；⑵尿mAlb参考值：<25mg/L；⑶尿β2-MG参考值：<0.2mg/L；(4)尿NAG酶参考值：<18.5U/L。1.5统计学处理所有数据均采用SPSS 13.0软件进行统计学处理，结果以均数±标准差表示，在方差齐性的情况下进行卡方或t检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2．1糖尿病组尿液中的RBP、mAlb、β2-MG、NAG酶结果明显高于正常对照组，差异有统计学意义（P<0.05），具体数据详见表1。

表1 糖尿病组与正常对照组四项指标水平（）

表1 糖尿病组与正常对照组四项指标水平（）

组别糖尿病组正常对照组n 100 100 RBP（mg/L）mAlb（mg/L）β2-MG（mg/L）NAG(U/L) 1.18±0.62 0.25±0.14 45.3±25.5 8.5±2.1 0.30±0.13 0.10±0.02 52.4±37.6 6.4±2.3

2.2 糖尿病患者尿液RBP、mAlb、β2-MG、NAG酶超过正常上限（x±2s）的阳性例数及百分率的比较，详见表2。

表2 糖尿病患者尿液RBP、mAlb、β2-MG、NAG酶超过正常上限（x±2s）的阳性例数及百分率

3 讨论

糖尿病肾病（Diabetic Nephropathy，DN）是糖尿病引起的严重和危害性最大的一种慢性并发症，主要特点是糖尿病所引起的微血管病变而导致的肾小球硬化。随着糖尿病治疗手段及技术的不断进步，死于糖尿病急性并发症如酮症酸中毒的患者越来越少，但是糖尿病并发的心血管疾病和肾脏疾病却成为近年来糖尿病患者的主要致死、致残原因。糖尿病肾病不仅出现在Ⅰ型糖尿病，近年来发现2型糖尿病也会发展为糖尿病肾病。有学者研究表明，在肾病初期可实现逆转，但一旦病人出现持续蛋白尿，病情将无法得到有效控制甚至死亡。因此，对糖尿病早期肾损害的诊断显得尤为重要。检测尿中的RBP、mAlb、β2-MG、NAG酶具有取材容易、无损伤、灵敏、特异性高等特点，可作为诊断糖尿病早期肾损害的灵敏指标。

早期糖尿病肾病由于持续高血糖使肾小球基底膜增厚和细胞外基质增生以及系膜扩张，而导致肾小球高滤过和蛋白尿，在DN的早期，在肾小球滤过膜受损时它表面的电荷屏障遭到破坏，白蛋白的滤出量大于近曲小管重吸收量时将会出现在尿中，表现为微量蛋白尿[1]。近年的研究认为，糖尿病早期已伴有肾小管和肾间质病变，因此患者尿液中的RBP、mAlb、β2-MG、NAG酶的排泄均有不同程度的增加，且与正常对照组相比较差异显著。

RBP是肝脏分泌的一种低分子量蛋白，主要功能是将视黄醇从肝细胞转运到上皮细胞，血浆中的RBP约有90%与甲状腺素结合前蛋白结合，形成高分子蛋白复合物[2]，因此不被肾小球滤过膜滤过，当视黄醇被转运到靶细胞后，RBP便游离到血浆中，迅速被肾小球滤过，几乎全部被肾近曲小管重吸收而分解。正常情况下，RBP在尿中稳定性强，不易分解，不受PH和血压干扰，RBP排量很少，但在肾近曲小管损伤时，尿排量明显增加，所以RBP排量可作为肾近曲小管损伤的标志物[3]。mAlb生理条件下出现于尿液中的量极微，是反映肾小球滤过膜受损的早期敏感指标[4]。正常人体内的β2-MG的生成和释放速度是非常恒定的，且能自由通过肾小球滤过膜，原尿中的99.9%的β2-MG可被肾小管上皮细胞重吸收和降解，当肾近曲小管轻微受损时，对β2-MG重吸收下降，使尿中β2-MG含量增加[5]。NAG酶是大分子糖蛋白，其主要合成和贮存器官是肾脏，以近曲小管上皮细胞含量最高，可反映近曲小管功能的改变[6]。

在对DN患者的研究发现混合性蛋白尿同肾小球和肾小管的损伤密切相关，联合监测尿微量白蛋白和RBP对于诊断更有意义[7]。如表二所示，两项联合检测中，RBP和mAlb的联合检测阳性率可达65%，比其他的两项联合检测阳性率要高。因此多项目检测相对于单个项目检测，能够涵盖肾小球损伤、肾小管损伤、感染及氧化应激等多个方面，对于DN患者早期肾损伤的诊断和治疗有积极意义。有研究显示，在对年轻糖尿病患者尤其是有微血管病变的患者进行尿的NAG分泌速率测定时发现，患者的前天夜间和第二天上午的尿NAG和肌酐比值测定的结果显示，糖尿病患者第二天上午的尿NAG和肌酐比值显著高于前天夜间的比值，并且有并发症的患者其第二天上午的尿NAG和肌酐比值也显著高于前天夜间的比值，但是比值本身同血压、性别、疾病进展、胰岛素依赖及尿糖无关[8]。在DN患者的早期尿液标志物中研究发现对NAG和尿白蛋白的排泄率进行联合监测能够鉴别DN患者的易感性，联合监测比起单个项目监测能够得出一个更好的预测模型[9]。在对糖尿病患者尿液进行蛋白质组学研究发现，在经过硫胺素治疗后，发现只有34%患者中尿白蛋白含量降低，但其他尿液蛋白质标志物没有显著变化[10]，证实多项目检测对于DN患者早期肾损伤的诊断和治疗有一定意义。从表2可看出单项检测这四项指标的阳性率较低，两项联合检测阳性率提高不明显，三项联合检测阳性率较高，四项联合检测阳性率最高，可达89%。

因此糖尿病肾病患者的早期肾损伤的生物标记指标多，采用单个指标检测容易受到运动、尿路感染、昼夜排泄量、高血压、心功能不全和急性发热等影响，各个指标的影响因素众多，单个指标的应用不能起到应有的作用，我们课题组希望通过对患者和正常人群的尿中视黄醇结合蛋白、尿微量白蛋白、β2微球蛋白、NAG酶联合检测，确定糖尿病肾病患者早期肾损伤的危险因素，并进一步建立糖尿病肾病患者早期肾损伤的诊断模型，从而在糖尿病肾病早期诊断、疗效评估及预后等方面发挥作用。

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A

1674-1129(2015)06-0756-03

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江西省上饶市卫生计生委资助课题（20151CZD10）