细穗红三七的生药学研究

岐琳??姜海??牛晓峰

[摘要] 目的 对细穗红三七Polygonum suffultum var. pergracile进行性状鉴别、显微鉴别和总蒽醌含量测定。 方法 性状鉴别及显微鉴别采用形态学和组织学鉴别方法，总蒽醌含量测定采用分光光度法。 结果 细穗红三七根茎和叶薄壁细胞中含草酸钙簇晶；粉末中可见纤维、不定式气孔、非腺毛和草酸钙簇晶。细穗红三七总蒽醌含量为1.0%～1.5%。 结论 上述性状及显微特征和总蒽醌含量测定可用于细穗红三七药材的质量鉴定。

[关键词] 细穗红三七；生药学；总蒽醌；含量测定

[中图分类号] R282.5 [文献标识码] A [文章编号] 2095-0616（2015）17-54-04

Study on the pharmacognosy of Polygonum suffultum var. pergracile

QI Lin JIANG Hai NIU Xiaofeng

School of Pharmacy， Xi'an Jiaotong University， Xi'an 710061，China

[Abstract] Objective To establish a microscope identification method and to determine total anthraquinones content of Polygonum suffultum var. pergracile. Methods Morphological and histological methods be used for microscope identification， Spectrophotometry be used for determination of total anthraquinones content. Results There are clusters crystals instems in rhizome and leaf of Polygonum suffultum var. pergracile； Anomocytic type stomas， fibers， non-glandular hairs and clusters crystals instems are visible in powder. The content of total anthraquinones was 1.0%-1.5%. Conclusion The microscopic character and the determination method of total anthraquinones content can be used for the quality determination of Polygonum suffultum var. pergracile.

[Key words] Polygonum suffultum var. pergracile； Pharmacognosy； Total Anthraquinones； Assaying

细穗红三七Polygonum suffultum Maxim. var. pergracile （Hemsl.）G. Sam.为蓼科蓼属植物，又称螺丝七、赶山鞭和九节犁等，主要分布于我国陕西、四川、云南省[1]。药用根茎或全草，为止痛、化瘀剂，主治胃痛，伤劳瘀血、红白痢及脱肛等症；又为收敛止血药，主治月经不凋、血崩、便血、淋症及劳伤等[2-4]。目前，细穗红三七目前研究报道很少，细穗红三七的生药学研究及有效部位总蒽醌的含量测定未见报道，为此我们对细穗红三七进行了生药学研究，为细穗红三七药材质量标准的建立提供了依据。

1 资料与方法

1.1 试药

2012年采于西安交通大学药学院药用植物园及陕西省户县，经鉴定为细穗红三七Polygonum suffultum Maxim. var. pergracile （Hemsl.）G. Sam.的全草。1，8-二羟基蒽醌对照品（中国药品生物制品检定所，批号： 110829-9702）。

1.2 方法

1.2.1 药材显微鉴别 采取新鲜药材，利用徒手切片、石蜡切片、表面装片以及粉末片进行药材显微组织结构观察。显微图采用44XIV型显微扫描

仪绘制。

1.2.2 总蒽醌含量测定 采用日本岛津UV-260型紫外可见分光光度计进行含量测定。

对照品溶液制备：取1，8-二羟基蒽醌对照品约10mg，精密称定，置于50mL量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得含1，8-二羟基蒽醌0.2mg/mL的对照品溶液。

供试品溶液制备：取细穗红三七药材粗粉约0.2g，精密称定，加氯仿30mL及12.5moL/mL硫酸溶液15mL，沸水浴回流水解2h，收集氯仿层，水浴蒸干，残渣用甲醇溶解并分次转移至10mL量瓶中，最终用甲醇稀释至刻度，摇匀后精密量取1mL，移至10mL量瓶中，用0.8%醋酸镁-甲醇溶液稀释至刻度，摇匀，即得。

线性关系考察：精密吸取浓度为0.216mg/mL的1，8-二羟基蒽醌对照品溶液0.2，0.6，1.0，1.4，1.8和2.0mL，分别移至25mL量瓶中，水浴蒸干甲醇，用0.8%醋酸镁甲醇溶液溶解并稀释至刻度。照紫外-可见分光光度法（中国药典2010版一部，附录ⅤA），以0.8%醋酸镁甲醇溶液为空白，在516nm波长处测定溶液的吸光度值。以1，8-二羟基蒽醌对照品的浓度Y为横坐标，被测溶液吸光度值X为纵坐标，进行线性回归。

精密度实验：精密量取已配制好的1，8-二羟基蒽醌对照品溶液1.0mL，按线性关系考察项下方法操作，然后在516nm波长处测定溶液的吸光度值，连续6次。

稳定性实验：将同一批号已制备好的供试品溶液，立即在0，15，30，60，90和120min的时间点，在516nm波长处测定溶液的吸光度值。

重复性实验：精密称取同一批号药材粉末约0.2g，分别制备6份供试品溶液，然后在516nm波长处测定溶液的吸光度值，采用标准曲线法计算出6份药材的总蒽醌含量。

加样回收率实验：分别精密称取已测定含量的药材粉末0.1g，精密加入一定浓度的1，8-二羟基蒽醌对照品溶液，水浴挥干甲醇，按照供试品溶液制备项下的方法，共制备药材供试品溶液6份，以0.8%醋酸镁甲醇溶液为空白，照紫外-可见分光光度法，在516nm波长处测定溶液吸光度值，采用标准曲线法计算样品含量，并计算回收率。

样品测定：取西安交通大学药学院药用植物园及陕西省户县所采集的6个批次细穗红三七药材，按照供试品溶液制备项下的方法，共制备药材供试品溶液6份，按线性关系考察项下方法操作，然后在516nm波长处测定溶液的吸光度值，计算药材总蒽醌含量。

2 结果

2.1 植物形态

多年生草本植物，植株高10～35cm。根状茎粗短，具残留的老叶柄，生有须根。茎丛生或单生，细弱，直立，不分枝，无毛或在近节处被稀疏柔毛。基生叶和下部茎生叶具长柄，叶片草质，卵形或团卵形，长4～10cm，宽3～6cm，先端渐尖，基部心形，表面无毛或被稀疏毛，茎生叶3～5枚，具短叶柄至近于无柄，叶片渐小，托叶鞘膜质，褐色，管状；花序为稀疏的穗状花序，顶生和腋生，长1～3cm，直径约1cm，苞片褐色，膜质，卵形或卵状披针形，长约2mm，光端渐尖，内含1朵花，花被白色，或初期带粉红色，长约3mm，5深裂，裂片椭圆状倒卵形或长圆形，先端钝，雄蕊8枚，露出花被外；花柱3枚，线形，露出于花被外，桂头小，头状。果实椭圆状三棱形，长约3mm，两端尖，黑褐色。花期4～5月，果期5～7月。产于我国陕西、四川、云南省。

2.2 药材性状

根茎呈结节状圆柱形，稍弯曲，长2～8cm，直径0.3～1.5cm。表面棕褐色至紫褐色，结节处被有叶柄残基、须根或须根痕，有时可见细长的节间。质硬，易折断，断面浅粉红色至棕红色，近边缘处有黄白色维管束小点9～30个，排列成断续环状。气微、味涩。

2.3 显微特征

2.3.1 根茎横切面 最外层为木栓层，由4～5列扁长方形细胞构成，细胞壁较薄且微栓化；皮层由大的薄壁细胞组成；韧皮部由数层小型扁平状薄壁细胞构成，在其外侧存在有少量的单个纤维或纤维束，纤维壁略增厚；维管束为无限外韧型，形成层由3～4层长方形状薄壁细胞组成；木质部可见导管多数多径向排列，内侧偶见木纤维；根茎的薄壁细胞中含有草酸钙簇晶及小型淀粉粒。结果见图1。

2.3.2 茎横切面 最外层为表皮，由2～3列排列紧密的类方形栓化细胞构成，细胞壁稍增厚。皮层由数列多角形的薄壁细胞组成，细胞排列较紧密。维管束为有限外韧型，环状排列，约为16束，韧皮部较窄小，其外侧有较多成群分布的韧皮纤维，形成层2～3列，不明显；木质部导管呈不明显的径向排列，其内侧偶有木纤维；髓部由大型薄壁细胞构成；茎的薄壁细胞中偶见草酸钙簇晶。结果见图2。

2.3.3 叶横切面 叶的上下表皮均由1列横向延长的薄壁细胞构成。叶上表皮下具有1列短柱状栅栏细胞，未通过主脉；叶主脉的维管束1～2束，为有限外韧型，木质部由数个放射状排列的导管和木薄壁细胞构成；叶薄壁细胞中可见到草酸钙簇晶；叶表皮上偶见1～5细胞构成的非腺毛。结果见图3。

1.木栓层；2.草酸钙簇晶；3.皮层；4.韧皮部；

5.形成层；6.纤维；7.木质部；8.髓部

图1 细穗红三七根茎横切面图（×200）

1.表皮；2.纤维；3.韧皮部；

4.木质部；5.髓部

图2 细穗红三七茎横切面图（×300）

1.上表皮；2.栅栏组织；3.海绵组织；4.木质部；

5.韧皮部；6.草酸钙簇晶；7.下表皮

图3 细穗红三七叶横切面图（×300）

2.3.4 粉末 非腺毛1～5细胞，直径6～21?m，长26～151?m；叶表皮气孔为不定式，其副卫细胞3～4个；纤维壁稍增厚，细胞壁的纹孔及孔沟有时不明显，直径6～22?m，长42～220?m；导管主为网纹和梯纹导管，少为具缘纹孔，直径14～32?m；薄壁细胞中含有草酸钙簇晶，直径20～76?m，棱角明显且较尖（图4）。

1.非腺毛；2.气孔；3.网纹导管；4.纤维；5.螺纹导管；

6.具缘纹导管；7.木栓细胞；8.草酸钙簇晶

图4 细穗红三七粉末图（×350）

2.4 总蒽醌含量测定

2.4.1 方法学考察 线性关系考察实验中，计算得回归方程为Y=0.0343X+0.0362，r=0.9998。实验结果显示，对照品浓度在1.728～17.280μg/mL范围内，1，8-二羟基蒽醌的对照品浓度与溶液的吸光度值之间呈现良好的线性关系；精密度实验的RSD为0.55%，实验结果显示，所使用的仪器精密度良好；稳定性实验的RSD为0.92%，实验结果显示，制备的供试品溶液在120min内，有着良好的稳定性；重复性实验的RSD为1.83%，实验结果显示，所建立的含量测定方法的重复性良好；加样回收率实验中，6份样品的平均回收率为97.9%，其RSD为2.2%。

2.4.2 样品测定 户县3批野生的细穗红三七药材总蒽醌含量分别为1.3%、1.5%和1.2%，药圃栽培的3批细穗红三七药材总蒽醌含量分别为1.2%、1.1%和1.0%。

3 讨论

细穗红三七药材显微鉴别中可见，根茎及叶的薄壁细胞中含草酸钙簇晶；粉末中可见到不定式气孔、细胞壁稍增厚的纤维、1～5细胞的非腺毛和草酸钙簇晶；以上显微特征可作为细穗红三七的鉴别要点。

蒽醌类化合物有多种药理活性，如抗氧化[5]、抗菌消炎[6]、抗病毒[7-9]、抗癌[10-11]及利胆明目[12-13]等，细穗红三七药材中含有蒽醌类化合物，为了进一步控制药材质量，我们参考文献进行了不同采集地点和不同批次药材中总蒽醌的含量测定[14-17]。在测定过程中，对细穗红三七总蒽醌的测定波长选择进行了实验，实验方法为吸取1，8-二羟基蒽醌对照品溶液、细穗红三七药材供试品溶液适量，分别置于25mL量瓶中，水浴蒸干甲醇，用0.8%醋酸镁甲醇溶液溶解并稀释至刻度，照紫外-可见分光光度法，以0.8%醋酸镁甲醇溶液为空白，在300～600nm波长范围内进行扫描，分别得到对照品溶液和药材样品溶液的紫外吸收图谱。实验结果显示，对照品溶液和药材样品溶液在516nm处均具有最大吸收，故实验中选用516nm为样品测定波长。

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（收稿日期：2015-04-07）