匝迪-5味丸对急性应激所致行为绝望小鼠的抗抑郁作用研究*

呼日乐巴根　佟海英　莲花　乌兰其其格　白龙　阿古拉△

（1.北京中医药大学基础医学院，北京100029；2.内蒙古医科大学，内蒙古呼和浩特010110）

·研究报告·

匝迪-5味丸对急性应激所致行为绝望小鼠的抗抑郁作用研究*

呼日乐巴根1，2佟海英1莲花2乌兰其其格2白龙2阿古拉2△

（1.北京中医药大学基础医学院，北京100029；2.内蒙古医科大学，内蒙古呼和浩特010110）

目的初步观察匝迪-5味丸的抗抑郁作用。方法通过小鼠悬尾实验（TST）、小鼠强迫游泳实验（FST）及利血平致小鼠抑郁模型，并以盐酸氟西汀为对照，观察连续7 d给匝迪-5味丸后对急性应激所致行为绝望小鼠的影响及腹腔注射利血平诱发抑郁模型小鼠的眼睑下垂、运动不能及体温变化的影响。结果与空白组比较，阳性对照组、匝迪-5味丸高、中剂量组均能缩短小鼠TST不动时间（P＜0.01）；与空白组比较，阳性对照组，匝迪-5味丸高、中、低剂量组均能缩短小鼠FST不动时间（P＜0.05或P＜0.01）。与模型组比较，阳性对照组，匝迪-5味丸的高、中、低剂量组明显对抗利血平所致小鼠眼睑下垂、运动不能及体温降低（P＜0.05或P＜0.01）。结论匝迪-5味丸能改善急性应激所致行为绝望小鼠及利血平诱导小鼠抑郁状态，其作用机制值得进一步研究。

匝迪-5抗抑郁作用急性应激行为绝望

抑郁症是一类持久的心境低落状态为主要特征的复杂的情感障碍性精神疾病，其发病率较高且有逐年增加的趋势，危害性大，已成为医学界广泛关注的问题。本病也是急性脑血管病的常见并发症。蒙医学中无此病名，但从其发病外缘、主要临床表现及特征分析与人体“巴达干”、“赫依”和心脏有着密切相关。匝迪-5味丸（又称肉豆蔻-5味丸）是蒙医治疗心“赫依”病、心烦失眠、心神不安、胸闷气喘、心绞痛病的常用复方，对“赫依”病尤为有效。临床上主要用于治疗抑郁症、精神分裂症、心烦失眠等疾病。本药方出自于蒙医经典著作《蒙医成方集》［1］，并收载于《蒙医百科全书·蒙医学》和《中华人民共和国卫生部药品标准·蒙药分册》等［2-3］。本实验研究选择急性应激所致行为绝望小鼠行为学指标的基础上药物诱导抑郁模型，初步探索匝迪-5味丸的抗抑郁效应。现报告如下。

1　材料与方法

1.1实验动物ICR小鼠，雄性，体质量（20±2）g，由内蒙古大学实验动物中心［SCXK（蒙）2002-0001］提供。

1.2药物及试剂匝迪-5味丸（乌兰浩特中蒙制药有限公司，国药准字Z15021785）；盐酸氟西汀（山西仟源制药股份有限公司，国药准字H20073985）；利血平注射液（广东邦民制药厂有限公司，国药准字H44021982）；0.9%氯化钠注射液（安徽丰原淮海制药有限公司，国药准字H34021875）。

1.3仪器TD-200电子体温计（新乡金象科技有限公司）；FA-1104电子天平（上海精科天美科学仪器有限公司）；数码相机；自制小鼠悬尾支架；定时器；秒表；注射器等。

1.4小鼠悬尾实验（TST）［4］将正常小鼠适应性饲养5 d后随机分为空白组（予等量去离子水），阳性对照组（予盐酸氟西汀3.6 mg/kg），匝迪-5味丸高、中、低剂量组（分别为匝迪-5味丸0.8、0.4、0.2g/kg），每组10只。各组小鼠均按0.2 mL/10 g体质量给药，连续给药7 d。于末次给药1 h后将小鼠距尾尖部约1 cm处用橡皮膏贴固定于悬挂支架上，头部离台面约5 cm，一次悬挂2只小鼠，中间用纸板隔开避免互相干扰。小鼠为克服不正常体位而挣扎一段时间后出现断性不动，显示绝望状态。倒挂6 min，记录后4 min内累计不动时间（不动标准为小鼠停止挣扎，除呼吸外所有肢体均不动）。

1.5小鼠强迫游泳实验（FST）［5］将正常小鼠适应性饲养5 d后随机分为空白组（予等量去离子水）、阳性对照组（予盐酸氟西汀3.6 mg/kg）、匝迪-5味丸高、中、低剂量组（分别为匝迪-5味丸0.8、0.4、0.2 g/kg），每组10只。各组小鼠均按0.2 mL/10 g体质量给药，连续给药7 d。于末次给药15 min后将小鼠单个放入水深10 cm，直径12 cm的烧杯内，水温保持在（25±1）℃。置水中2min游泳后开始记录5min内的累计不动时间（不动标准为小鼠停止挣扎或小鼠呈漂浮状态，四肢有轻微动作以保持头部在水面）。

1.6小鼠利血平拮抗实验［6］将正常小鼠在室温安静环境下适应性饲养5 d后随机分为空白组（予等量去离子水）、模型组（予等量去离子水）、阳性对照组（予盐酸氟西汀3.6 mg/kg）、匝迪-5味丸高、中、低剂量组（分别为匝迪-5味丸0.8、0.4、0.2 g/kg），每组10只。各组小鼠均按0.2 mL/10 g体质量给药，连续给药7 d。于末次给药后立即腹腔注射4 mg/kg利血平注射液，其中空白组小鼠注射等量0.9%氯化钠注射液。（1）腹腔注射利血平2 h后将小鼠放入直径7.5 cm的白纸圆圈内观察15 s，并记录各组小鼠的出圈率，计算运动不能抵抗百分率=（1-运动不能只数/动物总数）×100%，作组间比较。（2）腹腔注射利血平2 h后观察小鼠眼睑不能睁开的个数，计算眼睑下垂抵抗百分率。眼睑下垂对抗百分率=（1-睁眼不能只数/动物总数）×100%，作组间比较。（3）注射利血平3 h后将体温计探头插入小鼠肛门内约1 cm测量体温，并记录各组体温数据，作组间比较。

1.7统计学处理应用SPSS17.00统计软件。所有数据均以（±s）表示，选用单因素方差分析。P＜0.05为差异有统计学意义。

2　结果

2.1各组小鼠TST不动时间的比较见表1。与空白组比较，阳性对照组、匝迪-5味丸高、中剂量组显著缩短小鼠TST不动时间（P＜0.01）。

表1　各组小鼠TST 4 min累计不动时间比较（s，±s）

表1　各组小鼠TST 4 min累计不动时间比较（s，±s）

与空白组比较，*P＜0.05，**P＜0.01。下同。

组别n不动时间空白组10107.17±21.54阳性对照组1061.01±24.19**匝迪-5味丸高剂量组1057.07±23.32**匝迪-5味丸中剂量组1064.27±19.58**匝迪-5味丸低剂量组1096.55±31.31

2.2各组小鼠FST不动时间影响的比较见表2。与空白组比较，阳性对照组、匝迪-5味丸高、中、低剂量组均显著缩短小鼠FST不动时间（P＜0.05或P＜0.01）。

表2　各组小鼠FST 5 min累计不动时间比较（s，±s）

表2　各组小鼠FST 5 min累计不动时间比较（s，±s）

组别n不动时间空白组1079.66±6.54阳性对照组1050.79±10.23**匝迪-5味丸高剂量组1054.71±16.45**匝迪-5味丸中剂量组1056.86±7.36**匝迪-5味丸低剂量组1058.15±10.04*

2.3各组利血平所致小鼠的眼睑下垂、运动不能、体温下降影响的比较见表3。与模型组比较，阳性对照组、匝迪-5味丸的高、中、低剂量组均明显抵抗小鼠眼睑下垂和运动不能。与空白组比较，模型组小鼠体温显著低于空白组（P＜0.01）；与模型组比较，阳性对照组、匝迪-5味丸高、中、低剂量组均能抵抗利血平引起小鼠体温降低（P＜0.05或P＜0.01）。

表3　各组利血平所致小鼠眼睑下垂、运动不能及体温下降影响的比较

3　讨论

抑郁症是一种由生物、心理、社会等多种因素作用而致的复杂性疾病，并引起人体多个系统、多个层次的病理反应。目前，对于抑郁症的药物治疗，尚未研制出一种理想的西药。槟榔-13味丸、匝迪-5味丸等传统蒙药在临床上用于治疗本病具有一定的疗效［7］。从传统的方药中挖掘临床有效而毒副作用少的复方，是治疗精神类疾病值得探索的新途径。

行为学实验在筛选具有抗抑郁效应的药物方面发挥着非常重要的作用。其中TST和FST实验是常用的行为绝望动物模型，使动物在不可逃避性应激状态下，因绝望致不动时间的改变可反映药物的抗抑郁效应。这种行为绝望模型对绝大多数抗抑郁药物敏感，实验操作简单而快捷，被广泛应用于抗抑郁药的初步筛选［8］。本研究采用TST和FST实验，经7 d给药后观察到匝迪-5味丸高、中剂量和盐酸氟西汀均能显著缩短行为绝望小鼠的不动时间。结果提示，匝迪-5味丸具有一定的抗抑郁效应，并与临床应用一致。匝迪-5味丸低剂量组对TST不动时间的影响不明显，而FST不动时间的影响相比之下弱于高、中剂量组，这可能与用药剂量有一定的关系。抗高血压药物利血平拮抗实验是最早建立的抑郁症动物模型，经利血平处理的动物出现眼睑下垂、运动不能及体温下降［9］。最早上世纪50年代的提出的“单胺假说”认为抑郁症与脑内单胺能神经递质（NT），即5-HT、NE、DA等水平的降低有关，并抑郁症发病机制及抗抑郁药的研制和应用中起主导作用［10］。利血平是一种囊泡再摄取抑制剂，其作用与单胺氧化酶的抑制有密切相关。利血平拮抗是能阻止单胺递质的代谢而增加单胺递质的含量，其拮抗实验反映了药物对单胺能神经系统的兴奋作用［11］。研究显示，与空白组比较，模型组小鼠眼睑下垂、运动不能及体温下降有显著性差异（P＜0.01）；与模型组比较，匝迪-5味丸高、中、低剂量组均能显著低抗腹腔注射利血平后小鼠眼睑下垂、运动不能及体温下降（P＜0.05或P＜0.01）。结果提示，匝迪-5味丸改善利血平所致动物抑郁状态，其作用机制可能与单胺递质含量有关。

蒙医药迄今已有几千年的历史，其理论体系的基本特点是整体观和辨证施治理论。蒙医学认为，胸部属于“巴达干”区，心位于胸腔之中，故而心居于“巴达干”的总位。心又是“赫依”的窜行之道，因此心脏与“赫依”、“巴达干”有着密切关系。当“赫依”的功能紊乱时，影响心主精神、意志、思维活动等正常生理功能，故蒙医学古籍经典著作《蒙医药选编》中记载，心“赫依”者出现神志不清，睡眠减少，头晕，叹气等表现，临床上可出现记忆力减退，思维迟钝等抑郁症状［12］。当“巴达干”功能紊乱时，临床上可见反应迟钝，意识模糊等“巴达干”异常的症状，这与抑郁症的临床表现一致。蒙医学理论中心脏与脑有着不可分割的关系，心脏和脑主要以黑白脉相连。蒙医学古籍经典著作《医宗要旨》中对白脉的一段描述：从脑部脉的海洋里，像树根一样向下延伸的十九条白脉［13］。白脉的起源是脑，脑是白脉之海，从脑出发的白脉像彩带一样延伸到心脏连接与脑。当心“赫依”和“巴达干”功能紊乱时，将影响白脉的传导功能，临床可出现意识模糊、精神紊乱、烦躁不安等抑郁症状。因此，从蒙医学理论分析抑郁症的病因，可认为心“赫依”、“巴达干”功能紊乱，进而影响白脉的传导功能而引起。

总之，本实验研究根据匝迪-5味丸的复方特点及临床应用，结合目前抑郁症研究进展利用3种方法，从动物整体行为学角度评价匝迪-5味丸的抗抑郁作用，为其临床应用及进一步研究提供科学依据。

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Antidepressant Effect of Zadi-5 Pill on Mouse Models with Depressant

Hurilebagen1，2，TONG Haiying1，Lianhua2，et al.1 Basic Medicine College，Beijing University of Chinese Medicine，Beijing 100029，China；2 Inner Mongolia Medical Universit，Inner Mongolia，Hohhot 010110，China

Objective:To discuss the antidepression effect of Zadi-5 Pill.Methods:Depressant model was establised by the conduct forced swimming test，tail suspension test on mice and reserpine test to make depression model.The effect of Zadi-5 Pill on acute stress caused despair behavior of mice after 7d and recorded rectal temperature change and blepharoptosis and akinesia after ip resperine.Meanwhile，these indicators were compared to Fluoxetine Hydrochloride group.Results:Compared with blank group，positive control group and Zadi-5 Pill high，middle，low dose groups significantly shortened the immobility time in forced swimming test（P＜0.05）and tail suspension test（P＜0.01）.Compared with the model group，positive control group and Zadi-5 Pill high，middle，low dose groups can reverse the blepharoptosis，the akinesia and abnormally low body temperatures induced by reserpine（P＜0.05 or P＜0.01）.Conclusion:Zadi-5 Pill can significantly reduce acute stress caused despair behavior and reverse depressive state induced by reserpine，and then have anti-depression affect.The pharmacologic mechanism of Zadi-5 Pill may concerned with preventing monoamine metabolites to increase monoamine content.

Zadi-5 Pill；Antidepression effect；Acute stress；Behavioral despair

R285.5

A

1004-745X（2015）01-0056-03

10.3969/j.issn.1004-745X.2015.01.019

内蒙古医科大学“英才培育”项目（2014YCPY003）

（电子邮箱：agula372000@126.com）

2014-09-15）