实时超声造影定量分析在肝脏疾病诊断中的应用价值

闫　娟　李　岗

实时超声造影定量分析在肝脏疾病诊断中的应用价值

闫娟李岗

目的探讨实时超声造影定量分析在肝脏疾病诊断中的应用价值。方法选择2013年6月至2014年12月我院收治的肝纤维化患者80例，其中轻度肝纤维化40例（轻度组），中度肝纤维化30例（中度组），重度肝纤维化10例（重度组），均行血清肝纤维化四项检测与实时超声造影定量分析。结果随着肝纤维化程度的加重，造影剂达到肝静脉时间（HVAT）和肝-门静脉过渡时间（VVT）呈现明显降低的趋势（P＜0.05），而造影剂达到肝动脉时间（HAAT）与到达门静脉时间（PVAT）无明显变化（P＞0.05），血清透明质酸（HA）、层粘连蛋白（LN）、Ⅳ型胶原（C-Ⅳ）和Ⅲ型前胶原肽（PⅢP）含量都呈现明显增加的趋势（P＜0.05）。Spearman相关分析显示HVAT和VVT与肝脏纤维化程度呈现明显负相关（P＜0.05），而血清HA、LN、C-Ⅳ和PⅢP含量与肝脏纤维化程度呈现明显正相关（P＜0.05）。结论实时超声造影定量分析可用于肝纤维化患者的诊断，能有效判定肝脏纤维化程度，与血清学分析的联合使用能指导疾病诊断与治疗，值得推广应用。

实时超声造影定量分析；肝纤维化；血清肝纤四项；相关性

肝纤维化是我国常见的肝病类型，多因肝炎不能及时有效控制和治疗，逐渐进展而成，严重时进展为肝癌［1-2］。肝纤维化是肝炎向肝硬化转变的过渡环节，是进展为肝癌必经的阶段。肝纤维化是指肝脏内过量的胶原沉积，是细胞外基质合成过多、降解不足的直接后果，可导致肝纤维组织的过度沉淀［3-4］。血清纤维化四项测定是近年来应用较多的一种无创性肝病诊断方法，其检测指标包括透明质酸（HA）、层粘连蛋白（LN）、Ⅲ型前胶原肽（PⅢP）和Ⅳ型胶原（Ⅳ-C），但是临床发现其与病理学并不完全一致，应用上存在不足［5-6］。近年来随着超声诊断技术的发展，实时超声造影定量分析在临床诊断中得到了广泛的应用，通过结合数字信号处理或数字图像处理技术评估组织内部的相应情况，间接或直接反映疾病状况［7-8］。本文旨在探讨实时超声造影定量分析在肝脏疾病诊断中的应用价值，现报告如下。

资料和方法

一、研究对象

选择2013年6月至2014年12月我院收治的肝纤维化患者80例，纳入标准：患者均行肝穿刺活体组织检查确诊为肝纤维化；年龄20～80岁；血总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白检查正常；所有患者均签署知情同意书。排除标准：合并精神疾病、恶性肿瘤、心脏病、高血压、心力衰竭及严重心律失常患者。其中轻度肝纤维化患者40例（轻度组），中度肝纤维化30例（中度组），重度肝纤维化10例（重度组）。轻度组男22例，女18例；年龄29～76岁，平均（56.21±3.21）岁；中度组男16例，女14例；年龄29～78岁，平均（56.55±3.55）岁；重度组男6例，女4例；年龄29～78岁，平均（56.44±3.42）岁。三组年龄、性别等一般资料差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。

二、实时超声造影定量分析

所有患者于肝穿刺前1周内，使用Philips IU Elite彩色多普勒超声诊断仪进行检查，探头频率3～7 MHz。患者取仰卧位，探头置于肝区，检查时探头朝向肝脏方向，嘱患者屏住呼吸后依靠心脏搏力形成弹性成像的波形图，扫描中进行组织弥散定量分析。造影剂采用六氟化硫微泡造影剂SonoVue，开启弹性成像定量分析功能，对选定区域（ROI）进行弥散定量分析。记录造影剂达到肝动脉时间（HAAT）、肝-门静脉过渡时间（VVT）、到达门静脉时间（PVAT）和达到肝静脉时间（HVAT），由图像采集工作站进行动态记录。

三、血清肝纤维化指标检测

所有患者在入院后次天清晨抽取静脉血，放置干燥管中离心分离血清，-20℃冰箱保存，1周内检测完毕。采用酶促化学发光免疫分析方法检测血清纤维化四项：血清透明质酸（HA）、层粘连蛋白（LN）、Ⅲ型前胶原肽（PⅢP）、Ⅳ型胶原（Ⅳ-C），试剂盒由北京源德生物医学工程有限公司提供。

四、统计方法

应用SPSS14.0统计学软件处理数据，计量资料以x±s表示，采用t检验，计数资料以%表示，采用字2检验，相关性检验采用Spearman相关分析，P＜0.05为差异有统计学意义。

结果

一、造影结果分析

造影结果显示，随着肝纤维化程度的加重，HVAT和VVT值呈现明显降低的趋势（P＜0.05），而HAAT与PVAT值无明显变化（P＞0.05），见表1。

表1　三组患者的造影指标对比

表1　三组患者的造影指标对比

组别nHAATPVATHVATVVT轻度组4014.13±1.4316.39±1.3631.22±2.4514.29±1.83中度组3013.87±1.3216.37±0.9327.39±1.8210.68±1.30重度组1013.18±1.3216.00±1.3923.09±1.39　7.33±1.02 F值-0.4530.2989.11312.032 P值-＞0.05＞0.05＜0.05＜0.05

二、肝纤维化指标对比

随着肝纤维化程度的加重，血清HA、LN、C-Ⅳ和PⅢP含量都呈现明显增加的趋势（P＜0.05），见表2。

表2　三组患者的血清肝纤维化指标检测对比

表2　三组患者的血清肝纤维化指标检测对比

组别nHA（ng/mL）LN（ng/mL）C-Ⅳ（μg/L）PⅢP（U/mL）轻度组40　59.53±12.04　60.84±10.93　74.66±25.00　5.54±2.45中度组30 103.87±11.32 116.34±32.93 127.45±21.4410.44±2.22重度组10 135.44±14.93 159.54±32.51 164.18±24.5213.12±2.36 F值-9.51210.5428.5549.118 P值-＜0.05＜0.05＜0.05＜0.05

三、相关性分析

将所有患者纳入Spearman相关分析，HVAT和VVT与肝脏纤维化程度呈现明显负相关（P＜0.05），而血清HA、LN、C-Ⅳ和PⅢP含量与肝脏纤维化程度呈现明显正相关（P＜0.05），见表3。

表3　血清肝纤和造影指标与肝纤维化的相关性分析

讨论

肝纤维化是肝脏内胶原过度沉积、细胞外基质合成过多或降解不足导致的肝纤维组织的过度沉淀，是我国常见的疾病和主要死亡原因之一［9］。肝纤维化一旦发展为肝硬化，患者预后欠佳，故准确判断肝纤维化分期对了解患者肝病进展程度具有重要意义［10］。

肝活检虽然是各种肝纤维化诊断的金标准，但其为有创性检查，不宜作为常规检查及随访的方法。血清纤维化四项测定是近年来应用较多的一种无创性肝纤维化诊断方法，其中PⅢP为Ⅲ型胶原的前体，主要由肝星状细胞（HSC）合成，在肝纤维化的晚期合成速度减慢，能够有效反映肝脏纤维化程度［11］。Ⅳ型胶原（C-Ⅳ）肝纤维化早期可增生，血清中C-Ⅳ含量的升高反映了肝血窦基底膜的形成加快［12］。层粘连蛋白（LN）主要来源于HSC，肝纤维化时，LN大量沉积于肝窦内皮细胞间隙，降低内皮细胞的通透性，使其毛细血管化［13］。透明质酸（HA）是一种糖胺多糖，由HSC合成后经血循环到达肝血窦内皮细胞降解，HA是反映肝纤维化比较有价值的血清学标志物，并与组织学病变的严重程度呈正相关［14］。本研究结果显示，随着肝纤维化程度的加重，血清HA、LN、C-Ⅳ和PⅢP含量都呈现明显增加的趋势（P＜0.05）。但血清纤维化四项指标仅显示体内细胞外间质代谢的异常，不表示已沉积的肝纤维化程度，与病理学结果有一定差异［15］。

超声造影目前在临床上应用已较为广泛，其能通过造影剂的作用改变声波与组织间的相互作用，提高灰阶成像的对比分辨率和空间分辨率，达到疾病诊断的目的［16］。而实时超声造影定量分析就是在超声造影的基础上专门针对肝脏弥散性病变开发的新技术，可对患者进行解析区域设定，并可计算得到多种参数，从而有利于判定疾病状况［17］。本研究经过造影分析，随着肝纤维化程度的加重，HVAT和VVT值都呈现明显降低的趋势（P＜0.05），而HAAT与PVAT值无明显变化（P＞0.05）。

本研究采用的超声造影剂为血池性示踪剂，其血流动力学效应与红细胞相似，可真实地反映出组织的血流灌注情况［18］。我们将所有患者纳入Spearman相关分析，HVAT和VVT与肝脏纤维化程度呈现明显负相关（P＜0.05），而血清HA、LN、C-Ⅳ和PⅢP含量与肝脏纤维化程度呈现明显正相关（P＜0.05）。而超声造影还可增强肝损伤部位与相应正常组织的对比度，发现常规检测不易发现的损伤，实现对体内组织器官微观病变分子水平的探测［19-20］。

总之，实时超声造影定量分析用于肝纤维化患者的诊断能有效判断肝脏纤维化程度状况，与血清学分析的联合应用能指导疾病诊断与治疗，值得推广应用。

1Ahn JM，Paik YH，Kim SH，et al.Relationship of liver stiffness and controlled attenuation parameter measured by transient elastography with diabetes mellitus in patients with chronic liver disease.J Korean Med Sci，2014，29（8）：1113-1119．

2贾春梅，陈敏，徐宇雪，等.实时超声造影定量分析评价大鼠肝纤维化病理分期的实验研究.中国超声医学杂志，2014，30（10）：940-943.

3张炎晶，刘利平，鲁琴，等.超声造影评价兔脂肪肝及正常肝背景炎性假瘤血流灌注的研究.中华超声影像学杂志，2013，22（6）：525-529.

4Tahiri M，Drighil A，Jalal Y，et al.Chronic permanent hypoxemia predisposes to mild elevation of liver stiffness.World J Gastroenterol，2014，20（30）：10564-10569.

5贾春梅，李廷廷，康春松，等.肝硬化结节与小肝癌实时超声造影定量比较研究.中华超声影像学杂志，2013，22（2）：123-126.

6Vukobrat-Bijedic Z，Husic-Selimovic A，Mehinovic L，et al.Analysis of effect of antiviral therapy on regression of liver fibrosis in patient with HCV infection.Mater Sociomed，2014，26（3）：172-176.

7土继政，王兴华，聂宏娟，等.肝纤维化不同部位超声造影定量参数差异性的研究.中国中西医结合影像学杂志，2013，11（3）：268-270.

8Bessone F.Re-appraisal of old and new diagnostic tools in the current management of chronic hepatitis B.Liver Int，2014，34（7）：991-1000．

9王志会，胡向东，钱林学.人肝癌裸鼠模型的超声造影峰值强度与血管生成关系的研究.中国超声医学杂志，2012，28（12）：1060-1062.

10 Lu Y，Wei J，Tang Y，et al.Evaluation of fatty liver fibrosis in rabbits using real-time shear wave elastography.Exp Ther Med，2014，8（2）：355-362.

11包中涛.超声功能性成像评估肝脏纤维化程度的研究现状.医学综述，2012，18（2）：275-277.

12 Nightingale KR，Rouze NC，Rosenzweig SJ，et al.Derivation and analysis of viscoelastic properties in human liver：impact of frequency on fibrosis and steatosis staging.IEEE Trans Ultrason Ferroelectr Freq Control，2015，62（1）：165-175.

13 Lee SH，Cheon GJ，Kim HS，et al.Comparison on the Efficacy and Safety of Biphenyl Dimethyl Dicarboxylate and Ursodeoxycholic Acid in Patients with Abnormal Alanine Aminotransferase：Multicenter，Double-blinded，Randomized，Active-controlled Clinical Trial.Korean J Gastroenterol，2014，64（1）：31-39．

14王健，康春松，史凯玲，等.肝硬化患者肾血流灌注的超声造影研究.中华超声影像学杂志，2012，21（3）：213-216.

15李知轩，赵玉珍，郝美娜，等.肝硬化患者声强定量与血清纤维化指标的相关性研究.中国超声医学杂志，2013，29（3）：242-244.

16 Jeong WK，Lim HK，Lee HK.Principles and clinical application of ultrasound elastography for diffuse liver disease.Ultrasonography，2014，33（3）：149-160．

17 Cocciolillo S，Parruti G，Marzio L.CEUS and Fibroscan in non-alcoholic fatty liver disease and non-alcoholic steatohepatitis.World J Hepatol，2014，6（7）：496-503.

18张海清，王兴华，聂宏娟，等.超声造影评价肝纤维化血流灌注特征的初步研究.中国中西医结合影像学杂志，2013，11（2）：146-148.

19 Lukenda V，Mikolasevic I，Racki S，et al.Transient elastography：a new noninvasive diagnostic tool for assessment of chronic allograft nephropathy.Int Urol Nephrol，2014，46（7）：1435-1440.

20张立平，杨斌.实时超声造影在肝脏占位性病变鉴别诊断中的应用.安徽医学，2012，33（10）：1353-1355.

The value of quantitative real-time ultrasound image analysis for the diagnosis of liver disease

YAN Juan， LI Gang.
Ultrasonography，The Affiliated Hospital of Yan，an University，Yan，an Shaanxi，716000

Objective To investigate the application value of quantitative real-time ultrasound image analysis for the diagnosis of liver disease.Methods Eighty patients with hepatic fibrosis were selected in our hospital from June 2013 to December 2014 which included 40 patients with mild hepatic fibrosis（mild group），30 patients with moderate hepatic fibrosis（moderate group），and 10 patients with severe liver fibrosis（severe group）.All patients had detection of four indexes of serum fibrosis and quantitative real-time ultrasound image analysis.Results With the increase of liver fibrosis severity，HVAT and VVT showed significant decreased（P＜0.05）.As for HAAT and PVAT，there were no significant differences among three groups（P＞0.05）.The contents of serum HA，LN，C-Ⅳand PⅢP were significantly increased（P＜0.05）.Spearman correlation analysis showed that the serum HVAT and VVT were significant negatively correlated to the liver fibrosis degree（P＜0.05），while the serum HA，LN，C-Ⅳand PⅢP contents were significant positively correlated to the liver fibrosis degree（P＜0.05）.Conclusion Quantitative real-time ultrasound image analysis could effectively determine the degree of liver fibrosis，and guide the diagnosis and treatment when combined with serological analysis for the patients with liver fibrosis.

Quantitative real-time ultrasound image；Liver fibrosis markers；Correlation

2015-04-08）

（本文编辑：何美蓉）

10.3969/j.issn.1672-2159.2015.04.009

716000延安大学附属医院超声科