皮肤晚期糖基化终末产物与2 型糖尿病周围神经病变的相关性研究

刘 茜 吴佳佳 王菊梅 董 林 陈若平 叶山东

糖尿病周围神经病变(diabetic peripheral neurophathy，DPN)是糖尿病常见的慢性并发症之一，其具体发病机制目前尚不明确，一些动物模型及临床研究结果提示晚期糖基化终末产物(advanced glycation end products，AGEs)的形成、多元醇通路、氧化应激反应、蛋白激酶C 通路的激活等均参与了DPN 的发生发展过程，其中AGEs 的增加起到了重要的作用。Misur等［1］对2 型糖尿病(type 2 diabetes，T2DM)合并周围神经病变的患者外周神经进行病理检查，发现该类患者周围神经组织中均含有大量AGEs。本研究旨在观察皮肤AGEs 与DPN 的相关性，并探讨其临床意义，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料将2012 年1 月至2012 年6 月在安徽省立医院内分泌科住院的99 例T2DM 患者纳入DM组，女性34 例，男性65 例，平均年龄(60.18±14.57)岁。所有患者的诊断均符合美国糖尿病协会2010 年T2DM的诊断标准。根据患者是否合并周围神经病变分为两组:合并神经病变组(DPN 组)42 例，未合并神经病变组(非DPN 组)57 例。需排除:合并糖尿病其他急慢性并发症及其他内分泌系统疾病的患者;非糖尿病引起的肢体感觉、运动障碍及肝肾疾病患者;曾接受甲钴胺、硫辛酸等营养神经药物治疗的患者。同期选择35 例同期体检的健康人群作为正常对照组(NC 组)。

1.2 方法记录DM 组、NC 组所有研究对象的年龄、体质量和身高，计算体质量指数(bodymass index，BMI)，同时测量血压。禁食8 ～10 h 抽取静脉血5 mL，检测血糖、糖化血红蛋白(hemoglobin A1c，HbA1c)、血清总胆固醇(total cholesterol，TC)和甘油三脂(triglyceride，TG)。HbA1c 测定采用HPLC 法并参照卫生部规定的质控。皮肤AGEs 测定［2］:患者站立位，将皮肤AGEs 荧光光谱仪(中科院安光所提供)探头置左前臂内侧皮肤，扫描3 次，取平均值。

1.3 糖尿病合并神经病变的诊断采用神经缺陷评分(neuropathy disability score，NDS)判断:根据温度觉、针刺觉、大拇指振动觉及踝反射进行评分，温度觉减弱或消失记1 分，正常记0 分;针刺觉减弱或消失记1分，正常记0 分;单侧大拇指振动觉(0.28 Hz 音叉)减弱或消失记1 分，正常记0 分;单侧踝反射消失记2分，重叩击出现记1 分，正常记0 分。总分≥6 分诊断为PPN［3］。

1.4 统计学方法采用SPSS 19.0 进行统计分析，计量资料以±s 表示，两组均数比较采用t 检验，计数资料以例表示，计数资料比较采用χ2检验，相关性分析采用Pearson 相关分析，以P ＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 DM 组与NC 组相关指标比较两组研究对象的年龄、BMI、TG 差异无统计学意义(P ＞0.05)。与NC 组比较，DM 组空腹血糖(fasting blood glucose detection，FBG)、HbA1c、收缩压(systolic blood pressure，SBP)、舒张压(diastolic blood pressure，DBP)、TC 和皮肤AGEs 值升高，差异有统计学意义(P ＜0.05)。见表1。

表1 DM 组与NC 组相关指标比较(±s)

表1 DM 组与NC 组相关指标比较(±s)

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2.2 DPN 组与非DPN 组相关指标比较两组患者的年龄、性别、FBG、HbA1c 水平、尿酸、TG、TC、BMI、SBP和DBP 差异无统计学意义(P ＞0.05)。与非DPN 组比较，DPN 组患者糖尿病病程、皮肤AGEs 水平显著增高，差异有统计学意义(P ＜0.05)。见表2。

2.3 DM 患者皮肤AGEs 水平与NDS 相关性分析

糖尿病患者皮肤AGEs 水平与NDS 评分呈显著正相关(r=0.965，P ＜0.05)。

表2 非DPN 组与DPN 组相关指标比较

3 讨论

DPN 是慢性高血糖状态及其各种病理生理改变引起的神经系统损伤，可累及全身神经系统任何部分，是糖尿病常见的慢性并发症之一，累及超过50%的糖尿病患者。其发病机制目前尚不完全明确。神经胶质细胞和轴突联系异常、神经元组织细胞的代谢异常、神经细胞营养因子缺乏、非酶糖基化产物增强氧化应激反应及蛋白激酶C 的激活等可能均参与其发病过程。王绍欣等［4］认为晚期糖基化终末产物及其受体系统在DPN 中起重要的作用。

在机体的不同组织器官中，如肝脏、肾脏、血管和皮肤等均有AGEs 的存在。AGEs 是由蛋白质和脂类等非酶糖基化反应形成的终产物，其水平变化可反映患者长期的糖代谢控制状态，并参与糖尿病慢性并发症的病理过程。研究［5］证实糖尿病小鼠的神经组织中AGEs 积聚可引起小鼠的脱髓鞘病变，继而促进神经元细胞和雪旺氏细胞的死亡，导致DPN 的发病。另有研究［6］表明AGEs 水平的升高可改变诱导型一氧化氮合酶的表达水平并最终导致DPN。

皮肤荧光光谱法检测AGEs 是一种无创光谱检测技术，其利用AGEs 的荧光特性，首先由探头发出激发光源，直接照射到测试者的皮肤组织上，通过收集被激发出的荧光，根据所测试数据结果计算皮肤AGEs 水平，可间接反映体内AGEs 水平［7］。Araszkiewicz 等［8］应用自体荧光光谱法对1 型糖尿病患者进行皮肤AGEs 测定，结果提示合并周围血管病变患者的皮肤AGEs 水平较未合并周围血管病变者明显增高，并与微血管并发症发生率增加相关。目前国内对皮肤AGEs与DPN 发生的相关性研究较少。本研究采用皮肤自体荧光光谱仪测定所有研究对象的皮肤AGEs 水平，结果显示DM 患者皮肤AGEs 水平显著高于糖代谢正常人群，且合并DPN 的患者较未合并DPN 患者皮肤AGEs 水平明显升高，提示AGEs 水平升高可能与DPN的发生有关。本研究结果未显示DPN 组与非DPN 组间HbA1C 存在明显差异，可能与均为住院患者、血糖控制不佳有关。另外，本研究的样本量较小，尚待大样本量研究结果进一步证实。但两组皮肤AGEs 水平存在显著差异，提示AGEs 较HbA1c 更能反映长期的血糖控制情况。

综上所述，糖尿病患者皮肤AGEs 水平升高在DPN 发生发展中可能起到重要作用，而有关AGEs 参与DPN 发病的深层机制有待继续研究。皮肤荧光光谱法检测AGEs 无创、快速、不需试剂，是一种简单实用检测皮肤AGEs 的方法。

［1］ Misur I，Zarkovic K，Barada A，et al.Advanced glycation endproducts in peripheral nerve in type 2 diabetes with neuropathy［J］.Acta Diabetologica，2004，41(4):158－66.

［2］ 叶成松，叶山东，王贻坤，等.皮肤晚期糖基化终末产物与糖尿病慢性肾脏疾病的相关性研究［J］.中国糖尿病杂志，2013，21(10):877－879.

［3］ 杨三梅，余峰，王贻坤，等.晚期糖基化终末产物荧光光谱检测法在糖尿病筛查中的应用研究［J］.生物学报，2011，20(1):66－68.

［4］ 王绍欣，谢云.AGE-RAGE 系统与糖尿病周围神经病变［J］.中国糖尿病杂志，2008，16(6):379－381.

［5］ Sekido H，Suzuki T，Jomori T，et al.Reduced cell replication and induction of apoptosis by advanced glycation end products in rat Schwann cells［J］. Biochem Biophys Res Commun，2004，320(1):241－248.

［6］ Samborski P，Naskret D，Araszkiewicz A，et al.Assessment of skin autofluorescence as a marker of advanced glycation end product accumulation in type 1 diabetes［J］.Polskie Archiwum Medycyny Wewntrznej，2011，121(3):67－72.

［7］ Papanas N，Papatheodorou K，Papazoglou D，et al.A comparison of the new indicator test for sudomotor function(Neuropad)with the vibration perception threshold and the clinical examination in the diagnosis of peripheral neuropathy in subjects with type 2 diabetes［J］.Exp Clin Endocrinol Diabetes，2008，116(2):135－138.

［8］ Araszkiewicz A，Naskret D，Niedzwiecki P，et al.Increased accumulation of skin advanced glycation end products is associated with microvascular complications in type 1 diabetes［J］.Diabetes Technol Ther，2011，13(8):837－842.