Fibroscan无创检测慢性乙型肝炎病毒携带者肝纤维化的临床意义*

丁红方， 马 科， 宁 琴

华中科技大学同济医学院附属同济医院感染科，武汉 430030



Fibroscan无创检测慢性乙型肝炎病毒携带者肝纤维化的临床意义*

丁红方， 马 科， 宁 琴△

华中科技大学同济医学院附属同济医院感染科，武汉 430030

目的 探讨Fibroscan无创检测慢性乙型肝炎病毒携带者肝纤维化的临床意义。方法 回顾性分析195例慢性乙型肝炎病毒携带者的临床资料(肝功能、HBV DNA定量、肝脏硬度值、肝脾彩超、肝组织病理学等)，其中80例行肝脏组织学活检。结果 195例慢性乙型肝炎病毒携带者肝脏硬度值为(6.22±2.50)kPa；HBV DNA定量<500 copies/mL组和HBV DNA定量≥500 copies/mL组的肝脏硬度值比较无显著差异；病毒携带时间超过15年以上的患者肝脏硬度值明显高于病程≤5年者(P<0.01)；肝脏组织炎症坏死分级

慢性乙型肝炎病毒携带者； Fibroscan； 肝活检

乙型肝炎病毒(HBV)慢性无症状携带者(AsC)是一个广泛的群体，由于AsC自觉症状轻，病情进展可能被忽视。已证实乙肝病毒携带者尽管肝功能正常，但仍有相当一部分患者存在肝纤维化，如不能及时发现和治疗，将会导致病变继续加重。Fibroscan是新近开展的通过检测肝脏硬度值来诊断肝纤维化程度的一种无创检查技术，用于研究HBV AsC的临床资料尚少，本研究旨在通过联合Fibroscan和肝组织学检查来研究慢性乙型肝炎病毒携带者肝纤维化进程，希望为该类人群治疗时机的选择提供理论依据。

1 资料与方法

1.1 研究对象

选择2009年2月～2013年9月195例在华中科技大学同济医学院附属同济医院就诊的HBV AsC为研究对象，男131例，女64例，平均年龄(34.5±11.4)岁，其中80例行肝脏穿刺活检，诊断均符合《慢性乙型肝炎防治指南》中关于携带者的标准。测量每个研究对象的身高和体重，按照公式体重(kg)/身高2(m2)计算出体质量指数BMI(kg/ m2)，剔除BMI≥30的患者(按Fibroscan说明书的要求)。所有患者均排除其它病毒性肝炎及脂肪肝、自身免疫性肝病、酒精性肝病等。

1.2 肝脏硬度值的检测

Fibroscan为法国ECHOSENS公司产品，检测方法参照用户手册。选择右侧腋前线至腋中线第7、8、9肋间为检测区域，连续检测，要求成功检测10次，取中位数为最终测定结果，并以Liver Stiffness值(LS，kPa)表示。

1.3 肝组织病理学检查

使用美国巴德活检针在超声引导下获取肝组织，组织长度>1.0 cm，内部结构至少包含3个完整的汇管区，肝组织标本用10%中性甲醛溶液固定，石蜡包埋切片，苏木精-伊红染色，光学显微镜多视野观察。肝组织病理学诊断标准参照2000年《病毒性肝炎防治方案》中的慢性肝炎病理分级、分期标准，将炎症活动度(G)划分为0～4级，纤维化程度(S)划分为0～4期。

1.4 临床数据

使用全自动生化检测仪检测肝功能(ALT、AST、TBil、DBil)；ELISA方法检测乙肝两对半；荧光定量-聚合酶链反应(FQ-PCR)法检测HBV DNA定量(试剂购自上海科华生物有限公司，HBV DNA正常上限值<500 copies /mL)；彩超检测门静脉内径(PVD)及脾脏厚度(SPT)。

1.5 统计学方法

采用SPSS 13.0软件进行统计学分析。计量资料以均数±标准差表示，组间均数比较，符合正态分布的采用t检验，偏态分布采用秩和检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 一般情况

临床资料显示，195例HBV AsC的年龄为(34.5±11.4)岁，肝功能显示ALT(26.95±11.27)U/L、TBil(14.83±5.61)g/L及ALB(45.45±4.66)g/L，均在正常范围，符合慢性乙型肝炎携带者的诊断标准。肝脏硬度值为(6.22±2.50)kPa(正常值<7.30 kPa)。彩超提示肝脏形态正常，门静脉宽度(1.12±0.10)cm，脾脏厚度(3.57±0.44)cm，未发现肝硬化。

2.2 HBV AsC病毒载量与肝脏硬度值关系

为了进一步明确HBV AsC病毒载量对肝脏硬度值是否有影响，将195例患者分为2组，即HBV DNA定量<500 copies/mL组和HBV DNA定量≥500 copies/mL组，分别检测各组的肝脏硬度(LS)值，经过统计分析两组的LS值无明显差异(图1)，由此可以得出结论HBV AsC病毒载量的多少对肝脏硬度值影响不大。

图1 HBV携带者病毒载量与肝脏硬度值关系Fig.1 Relationship between the LS value and HBV DNA quantitation in the HBV AsCs

2.3 HBV AsC病程与肝脏硬度值关系

按照HBV携带时间的长短，分成5个时间段，即病程≤5年、5年<病程≤10年、10年<病程≤15年、15年<病程≤20年和病程>20年，比较各时间段的LS、PVD及SPT，结果显示PVD及SPT在各组间并无显著差异(P>0.05)，提示HBV AsC病毒携带时间的长短对PVD及SPT影响不大。但通过各组间的肝脏硬度值比较，发现病毒携带时间超过15年以上的HBV AsC患者LS值明显高于病程≤5年(图2)，提示HBV AsC肝脏硬度值的动态监测较彩超更敏感。

1:病程≤5年;2:5年<病程≤10年；3:10年<病程≤15年；4:15年<病程≤20年；5:病程>20年P<0.05:15年<病程≤20年的LS值与病程≤5年的LS值比较P<0.01:病程>20年的LS值与病程≤5年的LS值比较

2.4 HBV AsC肝组织不同炎症坏死分级、纤维化分期的肝脏硬度值比较

我们随机抽取80例患者进行肝穿刺活检术，肝组织病理学检查显示肝细胞水变性及气球样水肿较常见，部分患者肝脏汇管区可见纤维组织增生及淋巴细胞浸润。按照肝组织学炎症坏死的分级及纤维化程度的分期进行分类，G0-1S0占11.3%(9/80)、G1S1占50.0%(40/80)，G1S2占10.0%(8/80)、G1S3占7.5%(6/80)、G1S4占2.5%(2/80)、G2S1占12.5%(10/80)、G2S3占1.2%(1/80)、G2S2占2.5%(2/80)、G3S3占2.5%(2/80)。其中肝脏炎症坏死分级

表1 肝组织病理学不同分级或分期的肝脏硬度值比较±s)

与

3 讨论

乙肝病毒(HBV)感染可发展为肝硬化、肝癌，不仅严重危害人体健康，而且给社会和家庭造成沉重的负担。2006年全国乙型肝炎流行病学调查结果显示我国HBsAg携带率为7.18%[1]，这类人群中大部分为慢性HBV携带者和非活动性HBsAg携带者。国内外各种防治指南都建议这类人群暂时不需抗病毒治疗，必要时肝组织学检查，若肝组织学显示炎症坏死≥G2、或纤维化≥S2才有抗病毒指征[2-3]。因此，对于那些暂时无抗病毒治疗适应证的乙肝病毒携带者，及早发现肝组织炎症活动及肝纤维化，并及时加以控制，是防止肝硬化发生、预防疾病恶化的关键。

肝活检是评价肝脏炎症及纤维化程度的金标准，但由于肝穿刺活检是有创检查，患者依从性及长期可重复性均有限，无法用于日常随访。近年来新兴的肝纤维化无创诊断技术Fibroscan又名瞬时弹性图，通过测量肝硬度值来定量肝纤维化程度，其检测的肝脏区域比标准肝活检标本大100倍以上，因而肝纤维化分期可能更准确[4-5]。再加上其特有的无创伤性，便于患者的随访，可重复性强，为HBV AsC是否需抗病毒治疗或抗纤维化治疗提供一个很好的无创检测方法。

我们选取195例HBV AsC予以Fibroscan检测肝脏硬度值，范围为(6.22±2.50)kPa，和正常值比较无明显差异。为了进一步明确HBV AsC病毒载量对肝脏硬度值是否有影响，按照HBV DNA定量<500 copies/mL和HBV DNA定量≥500 copies/mL分为2组，经过统计分析两组的LS值差异无统计学意义(图1)，由此可以得出结论HBV AsC病毒载量的多少对肝脏硬度值影响不大，和前期的研究结果一致[6-8]。

本研究按照HBV携带时间的长短，分成5个时间段，比较各时间段的LS、PVD及SPT，结果显示病毒携带时间超过15年以上的HBV AsC患者LS值明显高于病程≤5年者(图2)，而PVD及SPT却不受HBV携带时间的影响，提示随着乙肝病毒携带时间的延长，特别超过15年以上的，尽管肝功能正常，但肝脏的硬度值却呈上升趋势，并且HBV AsC肝脏硬度值的动态监测较彩超对肝纤维化的诊断更敏感。所以Fibroscan动态监测肝脏硬度值有助于监控肝纤维化的进展，对肝活检时机的选择有指导意义。在我们的临床研究中发现随着乙肝病毒携带时间的延长肝脏硬度值呈上升趋势，特别是超过15年者肝脏硬度值有明显上升，对上升趋势明显的患者，为进一步明确肝组织是否有炎症或肝纤维化，肝活检是非常有必要的。

本研究还发现无症状HBV携带者虽然血生化、彩超表现正常或基本正常，但的确存在相当比例的肝组织炎症活动及一定程度的纤维化，通过肝活检发现肝脏组织炎症坏死分级≥G2或纤维化≥S2占38.75%，和其他学者的研究结果一致[9-12]。其病理谱广泛，肝脏组织病理学改变亦可从无改变、轻微病变至肝硬化，通过Fibroscan也检测到这部分人群肝脏硬度值升高，为(9.95±4.00)kPa。因此通过Fibroscan动态监测HBV AsC肝脏硬度值是很有价值的，对肝脏硬度值升高的患者应及早行肝活检，为抗HBV及抗肝纤维化治疗提供临床依据[13]。

综上所述，动态检测慢性乙型肝炎病毒携带者肝脏硬度值有助于监测肝纤维化的发生，并对肝活检时机的选择有指导意义，为抗乙肝病毒治疗提供了依据。

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(2015-07-10 收稿)

Noninvasive Detection of Liver Fibrosis by Fibroscan in Asymptomatic Carriers with Chronic Hepatitis B Virus

Ding Hongfang，Ma Ke，Ning Qin△

DepartmentofInfectiousDiseases，TongjiHospital，TongjiMedicalCollege，HuazhongUniversityofScienceandTechnology，Wuhan430030，China

Objective To investigate the clinical application of Fibroscan to noninvasive detection of liver fibrosis in asymptomatic carriers(ASCs)with chronic hepatitis B virus(HBV).Methods Clinical data of 195 chronic HBV ASCs were retrospectively analyzed，including liver function，HBV DNA quantitation，liver stiffness(LS)，color Doppler ultrasound results of the liver and spleen and histopathological findings of the liver.LS was evaluated by transient elastography(Fibroscan).Liver biopsy was performed in 80 carriers for histological examination.Results The LS value was(6.22±2.50)kPa in 195 cases.There was no significant difference in the LS value between HBV DNA <500 copies/mL and HBV DNA≥500 copies/mL groups.The LS value in patients with HBV carrying duration>15 years was significantly higher than that in patients with HBV carrying duration≤5 years(P<0.01).It was (6.72±2.33) kPa in patients(n=49)with liver tissue inflammation and necrosis

chronic hepatitis B carriers； fibroscan； liver biopsy

*湖北省自然科学基金资助项目(No.2011CDB544)；中国肝炎防治基金会王宝恩肝纤维化研究基金资助项目(No.20090025)

R512.62

10.3870/j.issn.1672-0741.2015.05.017

丁红方，女，1974年生，副主任医师，医学博士，E-mail：wisedhf@163.com

△通讯作者，Corresponding author，E-mail：qning@tjh.tjmu.edu.cn