干姜黄芩黄连人参汤饮片与煮散干预2型糖尿病SD大鼠的药效学初步分析

彭智平张琳琳刘起华仝小林

干姜黄芩黄连人参汤饮片与煮散干预2型糖尿病SD大鼠的药效学初步分析

彭智平1张琳琳2刘起华3仝小林3

目的 观察干姜黄芩黄连人参汤饮片与煮散在2型糖尿病SD大鼠动物模型中的药效学关系。方法 将造模成功的72只大鼠按血糖值分六组：模型组、西药组、饮片组、煮散组、2/3饮片组、2/3煮散组，每组12只。另选12只作正常对照。模型组及正常组给予纯净水，西药组给予二甲双胍，饮片组、煮散组、2/3饮片组和2/3煮散组给予相应浓度的干姜黄芩黄连人参汤饮片和煮散剂。给药12周，监测大鼠体质量、血糖等变化。结果 ①对大鼠体质量的影响：实验组SD大鼠体质量较正常对照组明显下降（P均＜0.01），各给药组与模型组差异无统计学意义（P＞0.05）。②对大鼠血糖的影响：0、4、8周各给药组之间差异无统计学意义（P＞0.05），12周时2/3煮散组血糖值显著低于2/3饮片组 [（14.3±5.2比20.6±5.8）mmol/L，P＜0.01]，且与饮片组差异无统计学意义 [（14.3±5.2比14.9±6.5）mmol/L，P＞0.05]。结论 煮散可以节省约1/3的等量饮片。

大鼠；2型糖尿病；饮片；煮散；干姜黄芩黄连人参汤；药效学分析

煮散即是将中药饮片打成一定粒度的粗粉，经过煎煮滤过药渣获取药液的方法。复方煮散的应用在汉代张仲景《伤寒杂病论》中即得到了广泛的应用，如薏苡附子败酱散、半夏干姜散等，至宋代以《太平惠民和剂局方》的问世使煮散的应用达到了鼎盛，纵观其历史原因以其能节省药材、提高疗效。本研究以复方干姜黄芩黄连人参汤加味为示范，以2型糖尿病大鼠为实验模型，观察干姜黄芩黄连人参汤加味方传统饮片与煮散在2型糖尿病SD大鼠动物模型中的药效学关系[1]。

1 实验材料

1.1 动 物 选用健康4周龄雄性SPF级SD大鼠共112只，体质量（100±10）g，由北京华阜康生物科技股份有限公司提供，动物合格证号为SCXK（京）2009-0007。饲养于广安门医院实验动物中心，环境温度为20～25℃，湿度60%～80%，正常昼夜规律。实验过程中对动物的处置符合动物伦理学标准。

1.2 饲 料 动物饲料由北京华阜康生物科技股份有限公司提供，分为普通饲料和高脂饲料，高脂饲料即普通饲料中加入20%的脂肪（50%猪油和50%蛋黄粉）和20%蔗糖。

1.3 药 物 干姜黄芩黄连人参汤加味方：干姜9g，黄芩30g，黄连15g，知母30g，西洋参6g，以上药物经过相应剂型处理后浓煎至一定浓度冷藏保存。西药为二甲双胍。

2 实验方法

2.1 动物分组 按随机分配原则选取SD大鼠112只，分为正常组12只，高脂组100只。高脂组中造模的大鼠成功72只按血糖值分为模型组、西药组、饮片组、煮散组、2/3饮片组、2/3煮散组，共六组，每组12只。正常组自由摄食及饮水，高脂组给以高脂饲料。

2.2 模型制备 采用高脂饲料加小剂量STZ注射造模。高脂组大鼠在高脂饲料喂养4周后空腹腹腔注射低剂量STZ（35mg/kg，Sigma公司）1次，正常组腹腔注射等剂量柠檬酸缓冲液（STZ用0.1mmol/L柠檬酸配制稀释为pH4.2），所有大鼠自由饮水进食。模型不达标者，2天后补注STZ（10mg/kg腹腔注射）。造模时STZ应新鲜配制，分组时各组动物按血糖值高低分层后随机分组，各组血糖均值差异无统计学意义（P＞0.05），血糖值升高不符合要求的动物应剔除。糖尿病大鼠成模标准为STZ造模3d（72h）后取尾静脉测血糖，以随机血糖＞16.7mmol/L认为造模成功。

2.3 给 药 西药组配药浓度为30mg（/mL·d）；饮片组配液浓度为1.8g饮片生药/mL；2/3饮片组为1.2g饮片生药/mL；煮散组配液浓度为1.8g煮散生药/mL；2/3煮散组为1.2g煮散生药/mL；模型组及正常组按体质量给予纯净水。每天分早晚2次灌胃给药，观察12周。

2.4 观察指标与方法 每天记录大鼠一般生存生活状态，如进食、进水、排尿、大便、精神、活动度、皮、毛等变化；每7天测量1次大鼠体质量；给药0W、4W、8W、12W测空腹血糖。

2.5 统计学方法 应用SPSS17.0统计软件包进行数据分析，实验数据均以均值±标准差（±s） 表示。采用重复测量的方差分析,当P＜0.05时差异有统计学意义。

3 实验结果

3.1 各组大鼠体质量比较 实验期间模型组、西药组、饮片组、煮散组、2/3饮片组和2/3煮散组大鼠体质量较正常对照组明显下降（P＜0.05或P＜0.01），但进食量、进水量却较正常组明显增多，且多数大鼠在4周左右开始出现多尿的情况。自给药0～12周各给药组体质量与模型组比较，差异无统计学意义（P＞0.05）,提示各给药组对血糖升高引起的体质量下降无明显改善作用。见表1。

3.2 各组大鼠血糖比较 实验过程中，各给药组与模型组SD大鼠血糖维持在较高水平，明显高于正常组大鼠（P均＜0.01），0～12周期间各给药组、模型组与正常组比较始终存在显著性差异。0、4周时，各给药组之间差异无统计学意义（P＞0.05）；8周时，西药组、饮片组、煮散组、2/3煮散组血糖有下降趋势，2/3饮片组与模型组血糖仍处于较高水平；12周时，2/3煮散组优于2/3饮片组，且与饮片组差异无统计学意义（P＞0.05），提示煮散可以节省约1/3的等量饮片。见表2。

表1 各组大鼠体质量比较（g，±s）

表1 各组大鼠体质量比较（g，±s）

注：与正常组比较，#P＜0.05，##P＜0.01

组别正常组模型组西药组饮片组煮散组2/3饮片组2/3煮散组只数12 12 12 12 12 12 12 0周480.8±40.1 460.4±36.0 461.9±38.1 462.1±53.8 448.5±24.3 453.8±39.4 472.5±49.2 2周510.5±42.8 472.8±35.0#455.1±44.1##454.0±43.2##450.6±29.3##451.2±47.3##456.0±38.1##4周547.1±45.7 450.6±56.3##445.4±58.8##450.0±68.3##445.2±43.0##420.2±48.5##438.0±34.5##6周580.0±49.1 458.4±67.2##455.7±66.0##455.3±85.7##451.7±54.9##431.8±79.4##445.5±42.6##8周603.3±52.9 433.5±82.5##436.1±75.6##455.3±95.0##447.0±64.6##414.5±86.8##414.2±56.8##10周564.5±93.6 464.3±99.0#439.8±76.1##441.2±107.2##441.7±79.1##424.8±100.0##437.8±49.6##12周614.0±45.7 437.8±112.5##448.5±74.6##428.7±121.6##451.4±83.6##428.0±104.2##424.4±59.0##

表2 各组大鼠0～12周血糖比较（mmol/L±s）

表2 各组大鼠0～12周血糖比较（mmol/L±s）

注：与正常组比较，##P＜0.01；与模型组比较，*P＜0.05，**P＜0.01；与西药组比较，△P＜0.05；与饮片组比较，□P＜0.05；与煮散组比较，○P＜0.05；与2/3饮片组比较，☆P＜0.05，☆☆P＜0.01

组别正常组模型组西药组饮片组煮散组2/3饮片组2/3煮散组只数12 12 12 12 12 12 12 0周5.9±0.4 19.6±5.8##19.6±6.2##19.7±6.0##19.6±6.1##19.5±5.9##19.7±5.9##4周5.8±0.5 17.3±3.1##17.4±5.3##17.5±5.0##18.1±5.3##19.9±5.8##17.6±3.8##8周4.8±0.7 18.0±5.1##13.9±7.9##16.0±7.3##15.6±6.0##19.6±6.3##16.4±6.4##12周4.8±0.3 19.9±4.5##△12.8±6.0##**☆☆14.9±6.5##14.7±7.9##☆20.6±5.8##△□○14.3±5.2##*☆☆

4 讨论

“丸散膏丹”不同剂型是传统中医药的工艺形式，具有“减、便、廉、验”的特点。特别是宋代因战乱频繁，药材资源匮乏，从官方到民间都大力提倡“煮散”，当时官修方书《太平惠民和剂局方》记载了大量煮散的方剂[2]，煮散作为中药传统工艺之一，在宋代四百年间得到空前的发展。但随着药材资源的发展，人们又重新开始大力使用饮片，煮散又逐渐衰退下来，现今又面临药源紧缺的现状，但关于煮散的很多工艺操作未能很好地继承下来，以致现今大多人对煮散这一工艺形式还比较陌生，导致煮散的推行也存在一定难度。一些医家开始认识到煮散的重要性，展开了一些研究，如梁少瑜等[3]研究干燥对煮散颗粒粉体学特性的影响、文谨等[4]研究黄芩煮散与传统饮片有效成分的煎出效果比较、穆兰澄等[5]研究复方煮散与传统饮片汤剂煎出率的比较等等，虽然他们的研究获得了一些成果，但总体而言研究仍相对较少，对煮散的疑惑还很多。

目前临床常用中药约400余味，究竟哪些中药适合煮散，哪些中药仍适合于饮片，甚至还有哪些药物适用超微粉、服散、免煎颗粒等工艺，尚待进一步研究。就煮散而言，不同类别煮散制备工艺包括粉碎器械、方法、粒径的选择；煎煮工艺参数的选择包括时间、加水量、次数的选择；如何规范煎煮工艺以及如何建立煮散质量评价方法体系等。

尽管煮散还有很多地方需要不断完善，但煮散工艺形式的推广已成为时代的迫切要求，相信不久的将来煮散将为国家卫生医药事业做出重要贡献。仝小林等[6]研究指出，煮散所具有的煎出率高，节省药材，煎煮时间短，节省能源等优势应得到不断发掘，这一研究不仅对祖国医学的传承与发展有着重要的意义，也对解决中医界目前面临中药材缺乏的重大问题，有着不可忽视的作用。

本实验结果显示，在降血糖方面，西药组与模型组之间差异有统计学意义（P＜0.05），西药组优于模型组，饮片组与煮散组差异无统计学意义（P＞0.05），但通过3个月（即0周、4周、8周）血糖的变化情况，煮散组差异具有优于饮片组的趋势，2/3饮片组与2/ 3煮散组差异有统计学意义（P＜0.05），2/3煮散组优于2/3饮片组，表明在同等条件下煮散工艺优于饮片工艺，煮散能有效节省药材。

［1］彭智平，刘起华，文谨.基于临床疗效探讨传统中药服散与煮散的临床推广价值［J］.中医杂志，2014，55（13）：1090-1093.

［2］刘起华，孙玉雯，刘凤麟，等.浅析《太平惠民和剂局方》中“散”的运用［J］.辽宁中医杂志，2015，42（2）：369-371.

［3］梁少瑜，曾永长，朱咸阳，等.干燥对煮散颗粒粉体学特性的影响［J］.中国实验方剂学杂志，2014，20（13）：38-40.

［4］文谨，刘起华，彭智平，等.黄芩煮散与传统饮片有效成分的煎出效果比较［J］.中国实验方剂学杂志，2014，20（11）：34-36.

［5］穆兰澄，牟稽征，何怡，等.复方煮散与传统饮片汤剂煎出率的比较［J］.辽宁中医药大学学报，2012，14（3）：211-212.

［6］仝小林，张家成，穆兰澄，等.恢复煮散节省药材［J］.中国新药杂志，2012，21（5）：470-474.

（收稿：2015-05-20 修回：2015-08-10）

Pharmacodynamics of Yinpian (Tablets)and Powder of Ganjiang Huangqin Huanglian Rensen Decoction in Type 2 Diabetic Mellitus in Rats

PENG Zhiping1,ZHANG Linlin2,LIU Qihua3,TONG Xiaolin3.1Department of Geriatrics,Hangzhou Traditional Chinese Medical Hospital,Hangzhou(310007),China;2 Zhejiang Institute for Food and Drug Control,Hangzhou(310052),China;3Department of Endocrinology,Guang'anmen Yiyuan,China Academy of Chinese Medical Sciences,Beijing(100053),China

Objective To investigate the pharmacodynamics of yinpian（tablets） and powder of Ganjiang Huangqin Huanglian Renshen Decoction in treatment of type 2 diabetics in rats.Methods Type 2 diabetics model was successfully established in 72 SD rats.Model rats were randomly divided into 6 groups:model groups,western medicine group,yinpian group,2/3 yinpian group,powder group,2/3 powder group,with 12 rats in each group.Another 12 rats served as control.Model group and control group were given still water,western group was given DMBG,yinpian group and 2/3 yinpian group were given crude drug 1.8 g/mL and 1.2 g/mL yinpian,respectively, and powder group and 2/3 powder group were given crude drug 1.8 g/mL and 1.2 g/mL,respectively.The treatment course was 12 weeks.The body weight and blood glucose of rats were monitored during the period.Results The body weight of rats in model group was significantly decreased compared with that in control group (P＜0.01);no significant difference was found between drug groups and model group(P＞0.05).At 0,4,and 8 weeks,the level of blood glucose in drug groups did not differ (P＞0.05);at 12 weeks,the level of blood glucose in 2/3 powder group was significantly lower than that of 2/3 yinpian group (14.3±5.2 mmol/L vs 20.6±5.8 mmol/L,P＜0.01)but similar to that of yinpian group (14.9±6.5 mmol/L,P＞0.05).Conclusion Powder of Ganjiang Huangqin Huanglian Renshen Decoction may save 1/3 usage of equivalent volume of yinpian to achieve the same therapeutic effect in treatment of type 2 diabetics.

rats;type 2 diabetics;yinpian（tablet）;powder;ganjiang huangqin huanglian renshen decoction; pharmacodynamic analysis

北京市科技计划资助项目（No.Z121102001112010）

1杭州市中医院老年病科（杭州 310007）；2浙江省食品药品检验研究院（杭州 310052）；3中国中医科学院广安门医院内分泌科（北京 100053）

仝小林，Tel：15306582205；E-mail:pengzhiping136826@126.com