肛愈膏镇痛抗炎作用的实验研究*

唐浩，李玉波，黄素，杨潇，刘明华

（1四川省宜宾市第三人民医院，四川宜宾644000；2四川医科大学药学院，四川泸州646000）

肛愈膏镇痛抗炎作用的实验研究*

唐浩1，李玉波1，黄素1，杨潇2，刘明华2

（1四川省宜宾市第三人民医院，四川宜宾644000；2四川医科大学药学院，四川泸州646000）

目的：研究自制肛愈膏的镇痛抗炎作用。方法：采用醋酸致小鼠扭体反应、小鼠热板性疼痛试验观察自制肛愈膏的镇痛作用。采用二甲苯致小白鼠耳廓肿胀和蛋清性大鼠足跖肿观察自制肛愈膏的抗炎作用。结果：肛愈膏能提高小鼠对热板性疼痛的痛阈值，减少扭体反应的平均次数，减轻二甲苯致小鼠耳廓肿胀度和蛋清性大鼠足跖肿胀值。结论：自制肛愈膏具有较强的镇痛抗炎作用。

肛愈膏；镇痛；抗炎；扭体反应

肛愈膏是由宜宾市第三人民医院自行研制的痔疮膏，主要成份有黄芪、白芷、槐米、当归、紫草、冰片，具有镇痛抗炎、活血化瘀等功效，用于治疗痔疮术后，促进创面愈合。随着社会的不断发展，人们的生活节奏越来越快，生活也不规律，导致痔疮等肛肠疾病在各年龄层的发生率都居高不下，剧烈的疼痛严重影响人们的正常生活工作质量[1]。本实验研究了自制肛愈膏对醋酸致小鼠扭体反应、小鼠热板性疼痛、二甲苯致小白鼠耳廓肿胀和蛋清性大鼠足跖肿的影响，为肛愈膏临床用于治疗痔疮提供科学的实验依据。

1 材料与方法

1.1 实验对象

SPF级SD大鼠，雌雄各半，体重：180～220 g；SPF级昆明种小鼠，雌雄兼有，体重：18～22 g。以上实验动物由四川医科大学动物实验中心提供，动物许可证号∶SCXK(川)2013-065。

1.2 受试品

肛愈膏：棕褐色膏药，由宜宾市第三人民医院提供。阳性对照∶市售马应龙麝香痔疮膏，批号∶150136。

1.3 仪器

9 mm打孔器（自制）；BSA-124S-CW电子天平（德国赛多利斯）；YLS-6B小鼠智能热板仪（淮北正华生物仪器有限公司）；大鼠PV-200足趾容积测量仪（四川成都泰盟科技有限公司）。

1.4 小鼠扭体反应实验

KM小鼠60只，雌雄各半，随机分成5组，每组12只。小鼠腹部备皮，24 h后给药，阴性对照涂抹辅料芝麻油0.2 g/只，阳性对照组涂痔疮膏0.2 g/只，低剂量组涂抹肛愈膏0.1 g/只，中剂量组涂抹肛愈膏0.2 g/只，高剂量组涂抹肛愈膏0.4 g/只。每天涂抹给药1次，连续10 d。于末次涂药30 min后，0.5%冰醋酸溶液腹腔注射，0.2 mL/只，记录小鼠出现第一次扭体反应（扭体反应判断∶腹部内凹，躯干与后肢伸展拉长，臀部高起）的时间和10 min内产生扭体反应的次数。

1.5 小鼠热板性疼痛实验[2]

雌性KM小鼠，测定痛阈值（热板温度55±0.5℃，以小鼠出现舔后足所需时间作为该鼠的痛阈值），凡小鼠舔后足时间小于5 s或大于30 s或跳跃者均弃之，筛选出60只合格的小鼠。阴性对照组于小鼠双后足足底涂抹辅料芝麻油0.2 g/只，阳性对照组涂痔疮膏0.2 g/只，低剂量组涂抹肛愈膏0.1 g/只，中剂量组涂抹肛愈膏0.2 g/只，高剂量组涂抹肛愈膏0.4 g/只。每天涂药1次，连续10 d。于末次涂药后60 min以温水清洁小鼠足底，分别测小鼠痛阈值，如超过60 s仍无反应，则以60 s计算。

1.6 小鼠二甲苯性耳廓肿胀实验

60只KM小鼠，雌雄各半，随机分为5组，每组12只。阴性对照组于小鼠左耳两面涂抹辅料芝麻油0.2 g/只，阳性对照组涂痔疮膏0.2 g/只，低剂量组涂抹肛愈膏0.1 g/只，中剂量组涂抹肛愈膏0.2 g/只，高剂量组涂抹肛愈膏0.4 g/只，各组小鼠右耳均不涂药。每天涂药1次，连续10 d。按照文献方法[3]，于末次涂药60 min后，以37℃温水清洁左耳耳面后，于左耳两面涂抹二甲苯25 μL/只，30 min后处死小鼠，用9 mm打孔器打下左右耳相同部位耳片称重，肿胀度为左右耳片重量之差。

1.7 蛋清性大鼠足跖肿胀实验

60只SD大鼠，雌雄各半，随机分成5组，每组12只。阴性对照组于大鼠右后足涂抹辅料芝麻油0.2 g/只，阳性对照组涂痔疮膏0.2 g/只，低剂量组涂抹肛愈膏0.1 g/只，中剂量组涂抹肛愈膏0.2 g/只，高剂量组涂抹肛愈膏0.4 g/只。每天涂药1次，连续10 d。于末次涂药1 h后以37℃温水清洁大鼠右后足，用成都泰盟PV-200足趾容积测量仪测正常右后足跖容积，于右后足跖皮下注入新鲜鸡蛋清，0.1 mL/爪，然后分别于致炎1、3、6 h后测右后足跖容积，计算足跖肿胀度和足跖肿胀抑制率。

足肿胀度=[致炎后足跖容积(mL)-致炎前足跖容积(mL)]/致炎前足跖容积(mL)。

足肿胀抑制率=阴性对照组足跖肿胀度–给药组足跖肿胀度/对照组足跖肿胀度。

1.8 统计学分析

2 结果

2.1 对小鼠扭体反应的影响

肛愈膏中、高剂量组和阳性对照组能延长小鼠出现扭体反应的平均时间，减少扭体反应的次数，与阴性对照组比较，差异有统计学意义（P＜0.05），表1。

表1 肛愈膏对小鼠扭体反应的影响（±s，n=12）

表1 肛愈膏对小鼠扭体反应的影响（±s，n=12）

注：a.表示与阴性对照组比较，P＜0.05

组别阴性对照阳性对照低剂量组中剂量组高剂量组剂量（g/只）0.2 0.2 0.1 0.2 0.4 F P平均扭体次数20.87±8.37 13.89±7.29a17.87±9.58 15.14±7.85a13.75±6.78a26.899 0.018出现扭体反应的平均时间（min）3.36±2.78 6.36±3.87a4.24±2.89 5.84±3.03a7.04±3.47a39.965 0.011

2.2 对热板性疼痛的影响

结果表2，肛愈膏高剂量组和阳性对照组均能提高小鼠的痛阈值（s），与阴性对照组比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。

表2 肛愈膏对小鼠痛阈值的影响±s，n=12）

表2 肛愈膏对小鼠痛阈值的影响±s，n=12）

注：a.表示与阴性对照组比较，P＜0.05

组别阴性对照阳性对照低剂量组中剂量组高剂量组剂量（g/只）0.2 0.2 0.1 0.2 0.4 F P给药后60 min痛阈值（s）26.69±11.44 46.74±23.82a30.4 3±12.53 38.52±19.87a45.66±24.25a24.179 0.013

2.3 对小鼠耳廓肿胀的影响

结果表3，肛愈膏中、高剂量组和阳性对照组均能明显减轻二甲苯致小鼠耳廓肿胀度，与阴性对照组比较（P＜0.05）。

表3 肛愈膏对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的影响（±s，n=12）

表3 肛愈膏对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的影响（±s，n=12）

注：与阴性对照组比较，a.表示P＜0.05，b.表示P＜0.01

组别阴性对照阳性对照低剂量组中剂量组高剂量组剂量（g/只）0.2 0.2 0.1 0.2 0.4 F P耳片肿胀度（mg）9.89±1.75 6.55±1.31b8.67±1.85 7.83±1.45a6.21±1.25b45.875 0.002

2.4 对大鼠足跖肿胀的影响

结果表4，肛愈膏低、中、高剂量组和阳性对照组皮下注射蛋清3、6 h后均能在一定程度上减轻大鼠足跖肿胀度，与阴性对照组比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。

3 讨论

痔疮是肛门直肠底部及肛门粘膜的静脉丛发生曲张而形成的一个或多个柔软的静脉团，是一种常见慢性病。中医认为痔疮多因饮食不节，易生湿积热，湿热下注肛门，使肛门充血灼痛，引发痔疮，或劳累过度，久坐则血脉不行，久行则气血纵横，瘀血流注肛门而生痔疾，亦或是便秘，久忍大便，大肠积热，引发痔疮。痔疮包括内痔、外痔、混合痔，常见症状有疼痛、出血、流脓、脱出等，治则应以祛风除湿、清热解毒、镇痛抗炎、收敛止血等方法[4]。

黄芪，又名绵芪，为豆科植物荚膜黄芪或蒙古黄芪的干燥根，味甘，微温，具有利尿排毒、补气固表、益气补中、敛疮生肌的功效，也有较广泛的抗菌作用[5]。白芷（Angelica dahurica）为伞形科当归属的植物，具有祛风散寒，通窍止痛，消肿排脓，燥湿止带等功效，用于头痛、牙痛、肠风痔漏、痈疽疮疡、皮肤瘙痒等，现代药理研究表明白芷具有抗炎、镇痛、解痉、降血和抗菌作用[6]。槐米为豆科植物槐（Sophora japonica L）的干燥花蕾及花，槐米性微寒、味苦，具有润肠通便、止血凉血的功效，现代药理研究表明槐米具有抗炎、抗病毒、祛痰、止咳等作用[7]。当归是最常用的中药之一，具有补血、活血、调经止痛、润燥滑肠的作用，能主治血虚诸证、月经不调、经闭、痛经等诸症。紫草是一种中药材，性味甘、咸，具有清热凉血、活血、解毒透疹等功效，具有抗菌、抗炎、避孕、抗肿瘤和降血糖等作用[8]。冰片为龙脑香的树脂和挥发油加工品提取获得的结晶，可用于用于闭证神昏、用于目赤肿痛，喉痹口疮、用于疮疡肿痛，溃后不敛等。

肛愈膏是由宜宾市第三人民医院自行研制的痔疮膏，主要成份有黄芪、白芷、槐米、当归、紫草和冰片，用于治疗痔疮术后，促进创面愈合。本实验选用疼痛和炎症两个模型，观察肛愈膏的镇痛抗炎作用。实验结果表明，肛愈膏能明显减少扭体反应的平均次数，提高小鼠对热板性疼痛的痛阈值，减轻小鼠耳廓肿胀度和蛋清性大鼠足跖肿胀值，显示出较强的镇痛抗炎作用，对于痔疮术后能改善局部炎症，缓解疼痛，具有较好的临床应用前景。

表4 肛愈膏对大鼠蛋清性足跖肿胀的影响（±s，n=12）

注：与阴性对照组比较，a.表示P＜0.05，b.表示P＜0.01

组别剂量（g/只）致炎前足跖容积(mL)致炎后不同时间的足跖肿胀度和抑制率/% 1 h3 h6 h阴性对照阳性对照低剂量组中剂量组高剂量组0.2 0.2 0.1 0.2 0.4 F P 1.14±0.29 1.08±0.25 0.99±0.24 1.03±0.33 1.09±0.27 3.876 0.987 0.99±0.36（-）0.87±0.34（12.12）0.97±0.28（2.02）0.92±0.26（7.07）0.95±0.17（4.04）6.765 0.638 1.15±0.41（-）0.84±0.32a（26.95）0.96±0.17a（16.52）0.88±0.35a（23.48）0.77±0.22b（33.04）75.782 0.001 0.85±0.19（-）0.39±0.15b（54.12）0.56±0.21b（34.11）0.49±0.24b（42.35）0.45±0.18b（47.06）97.547 0.000

1.蔡晓松，韩翼，龙启军.黄柏片辅助预防痔疮手术后感染的临床研究[J].中华医院感染学杂志，2014，24(16)：4064-4065，4068.

2.叶绿萍，庞黎明，李德钢，等.痔疮消炎膏抗炎镇痛及促溃疡面愈合的药效学研究[J].环球中医药，2014，7(10):752-755.

3.李海清，吕圭源，陈素红，等.复方乌连提取物镇痛、抗炎、止泻的药效学研究[J].浙江中医药大学学报，2014，38 (4):456-460.

4.谭静范，秦澎湃.痔的治疗技术现状与展望[J].中国临床医生，2014，42(5):23-24.

5.郭宪清，张丽香，姜秉荣.黄芪皂苷类组分的现代药理研究进展[J].中国药业，2006，15（12）：66-67.

6.朱艺欣，李宝莉，马宏胜，等.白芷的有效成分提取、药理作用及临床应用研究进展[J].中国医药导报，2014，11(31): 159-162,166.

7.李飞，李秋红，李廷利，等.槐米有效成分含量测定方法研究进展[J].中医药信息，2008，25(4):19-21.

8.王恒，谭勇，李国玉，等.复方紫草烧烫伤涂膜剂的制备及质量控制[J].中国药师，2014，(4):673-674,675.

（2015-05-27收稿）

Studies on the analgesia and anti-inflammation effect of Gang-Yu ointment

Tang Hao1,Li Yubo1，Huang Su1，Yang Xiao2，Liu Minghua21The 3rdPeople’s Hospital of Yibin city,Yibin 644000,Sichuan province;2School of Pharmacy of Sichuan Medical University,Luzhou 646000,Sichuan Province,China

Objective：To observe the analgesia and anti-inflammation effect of Gang-Yu ointment. Methods：The analgesic effect was evaluated by hot plant test and wrest body test in mice.The antiinflammation effect was evaluated on mouse auris-swell model induced by dimethylbenzene and rat toe-swell model induced by egg albumin.Results：Gang-Yu ointment can significantly increase the threshold of pain, decrease the number of times of wrest body,and inhibit the swellingness on mouse auris-swell and toe-swell models.Conclusion：Gang-Yu ointment has significant analgesia and anti-inflammatory effect.

Gang-Yu ointment；Analgesia；Anti-inflammation；Wrest body

R285.5

A

10.3969/j.issn.1000-2669.2015.06.009

*四川省宜宾市科技局重点项目（NO:2012SF009）

唐浩(1975-)，男，副主任医师，硕士。

刘明华(1972-)，男，教授，硕士研究生导师。E-mail：99053808@qq.com。