肿瘤异常蛋白对头颈肿瘤的临床诊断价值

赵丽娜 张 雷

肿瘤异常蛋白对头颈肿瘤的临床诊断价值

赵丽娜 张 雷

肿瘤异常蛋白；头颈；肿瘤

恶性肿瘤是当今威胁人类健康和生命的主要疾病之一，头颈癌占全身恶性肿瘤的5%左右，国外报道其发病率位居全身第6位[1]，但其发病部位和病理类型之多，居肿瘤全身肿瘤之首。肿瘤异常蛋白（tumor abnormal protein，TAP）是细胞中癌基因和抑癌基因突变后表达的产物，是癌细胞在异常增生过程中的共同特征[2]。近年来，TAP已被广泛应用于消化系统、肺癌、乳腺癌等的早期筛查或临床治疗后效果评估。本研究通过检测头颈部恶性肿瘤患者手指末梢血TAP表达水平，探讨TAP与肿瘤病理类型、发病部位及临床分期的相关性。

1 资料与方法

1.1 临床资料 收集2012年8月—2014年11月我科收治的各种头颈部恶性肿瘤37例，男36例，女1例，年龄38～76岁，平均59.3岁；病程1个月～2年，平均7.4个月；有抽烟史34例，烟龄10～58年，平均36.4年；常年持续饮酒史31例，其中每天半斤以上白酒或黄酒者33例，酒龄18～49年，平均32.7年。37例中喉咽癌28例，鼻咽癌1例，舌癌4例，上颌窦癌3例，鼻背皮肤癌1例（具体临床分期及病理分型见表1）；均无远处转移。所有患者均行喉镜、颈部B超、头颈部CT或MRI检查提示恶性肿瘤，并给予术前活检，病理确认为恶性肿瘤，36例患者均行手术切除肿瘤组织，部分同时行转移皮瓣移植修复，鼻咽癌患者选择放疗。

1.2 方 法 采用浙江瑞生医疗科技有限公司提供的异常糖链糖蛋白检测试剂盒（凝集法）及瑞生TAP检测图文系统标准版，经我院病理科专人完成。

1.2.1 制 片 采指端末梢血，推至厚薄均匀的血片2张，干燥后移置操作水平净化台内（温度18～25℃；相对湿度45～60%）约10mins，使血片的温度和湿度达到工作条件。将凝聚助剂充分摇匀滴加3滴（每滴约50uL，液滴斑点直径10～12mm）。1.5～2h待血片上凝聚助剂自然干燥（TAP与凝聚助剂反应的过程）后，在滴过试剂的地方形成圆形“斑点”，即标本制作完成。

表1 37例头颈部恶性肿瘤患者临床分期、病理分型及TAP检测值（例）

1.2.2 检 测 将标本置于图像分析仪之显微镜下，用4×平场消色差物镜，在显示屏上依次扫描观察血片标本的三个斑点，寻找特异形态的凝聚物（有不规则类圆形晶体颗粒，颗粒呈淡绿色、淡黄色或棕色，中心有屈光性，四周因混合物较多而呈棕黑色或墨绿色，为阳性，无上述颗粒检出为阴性）。将有可疑图像的斑点转用高倍镜观察，在瑞生TAP检测图文系统中采集＞80μg以上的特异凝集物，面积总和× 0.62所得数值为检测特异凝集物的最终数值。

1.2.3 结果判定 以上数值在0～121μg为阴性，～225μg为可疑阳性，＞225μg为阳性。

2 结 果

37例中指端末梢血TAP检测值＞225μg确诊阳性22例（59.46%），121～225μg13例，呈现可疑阳性，占比35.14%，TAP阴性2例（5.4%），即TAP阳性+交界率为94.6%。鼻咽癌、舌癌、上颌窦癌、鼻背皮肤癌共9例，5例为TAP确诊阳性，3例为TAP可疑阳性，1例上颌窦腺样囊性癌（T3 N1 M0）显示TAP表达较低，呈现阴性结果。而28例喉咽癌中，17例为TAP确诊阳性，喉癌声门上型4例（2例T1 N0 M0，2例T2 N0 M0），声门型2例（T1b N0 M0，T2 N0 M0），跨声门型4例（3例T3 N0，2M0，1例T4 N1 M0），下咽癌7例（2例T2 N0，1M0，2例T3 N1，2M0，3例T4 N2，3M0）；10例TAP可疑阳性，喉癌声门型8例（2例T1ab N0 M0，3例T2 N0 M0，3例T3 N0，1M0），声门上型1例（T3 N2 M0），下咽癌1例（T4 N3 M0）；1例下咽癌（T3 N2 M0）TAP值＜121μg。

3讨 论

肿瘤异常糖蛋白（TAP）是肿瘤细胞在新陈代谢过程中分泌的一种糖链结构异常的糖蛋白和钙-组蛋白复合物，存在肿瘤的生成和发展的全过程中，可通过指端血液中检出。由于TAP是细胞中癌基因和抑癌基因突变后表达的产物，故在肝癌、肺癌及乳腺癌等研究中被作为一种肿瘤标志物，用来检测其在肿瘤诊断中的特异性及敏感性。有研究[3]显示，TAP对恶性肿瘤的敏感度达93.2%或86.4%，特异性为92.4%或98.1%（前者视临界值定为阳性，后者视临界值为阴性）。

本研究病例数虽少，但仍能发现TAP敏感性较高，TAP阳性+交界率达到94.6%，只有2例恶性肿瘤患者 TAP检测＜121μg，1例为复发性喉咽癌T3N2M0，病理性质为高分化腺癌，1例为上颌窦恶性肿瘤，低分化鳞状细胞癌，这两例患者恶性程度均较高，且其中1例为晚期复发患者，据文献显示，TAP与肿瘤大小无一定关系，在晚期肿瘤中的表达反而下降或阴性，认为此现象与终末期时癌细胞代谢下降，所分泌的糖蛋白下降有关[4-5]。而喉咽癌中TAP确诊阳性患者17例，声门上型癌、跨声门癌、声门癌及下咽癌所占比分别为 23.5%、23.5%、11.6%和41.2%，声门癌占比较低，然而在TAP可疑阳性的10例患者中，声门癌占到80%，这也是使TAP阳性交界率较高（35.7%）的主要因素所在，这一数值高于以往文献报道的全身其他系统恶性肿瘤中TAP表达的交界率，因此，笔者推测可能与头颈部恶性肿瘤的早期血行转移较全身其他系统低有关。肿瘤异常蛋白在头颈部恶性肿瘤患者的指端末梢血中表达低于全身其他系统恶性肿瘤，常表现为可疑阳性，故对于临床检测TAP呈现可疑阳性的患者应予进一步喉镜、B超、头颈部CT或MRI等更加全面的检查，降低漏诊率，早查找到原发肿瘤，并采取积极治疗措施。

［1］Cohen EE，Lingen MW，Vokes EE.The expanding role of systemic therapy in head and neck cancer［J］.允Clin Oncol，2004，22（9）：1743-1752.

［2］施南峰.肿瘤异常蛋白（TAP）筛查早期恶性肿瘤应用研究［允］.中国公共卫生管理，2010，26（2）：188.

［3］张锐.肿瘤异常蛋白与AFP mRNA检测在肝癌诊断中的价值［J］.吉林医学，2010，4（31）：1355-1357.

［4］Matsumura M，Niwa Y，Kato N，et al.Detection of alphafetoprotein mRNA，an indicator of hematogenous spreading hepatocellular carcinoma，in thecirculation：a possible predictor of metastatic hepatocellular carcinoma［J］.Hepatology，1994，20（6）：1418-1425.

［5］Peng SY，Lai PL，Chu允S，et al.Expression and hypomethylation of alpha-fetoprotein gene in unicentric and multicentric human hepatocellular carcinomas［J］.Hepatology，1993，17（1）：35-41.

（收稿：2015-03-23 修回：2015-05-18）

浙江大学医学院附属邵逸夫医院耳鼻咽喉头颈外科（杭州310000）

赵丽娜，Tel：（0571）86002160；E-mail：nalong914@163.com