基质金属蛋白酶在涎腺良、恶性多形腺瘤中的表达

唐瑞平，伍爱民，郑本强，李 敬，邓 凌，何 红 (.荆楚理工学院医学院，湖北 荆门 448000;.湖北省荆门市第二人民医院口腔医院，湖北 荆门 448000;.湖北省荆门市第二人民医院口腔科，湖北 荆门 448000)

在涎腺上皮性肿瘤中多形腺瘤(pleomorphic adenoma，PA)是一种非常常见的肿瘤疾病，患者占比可以超过50%，在医学界将该类疾病归入良、恶性之间的肿瘤当中，一旦病患患上此类疾病非常容易出现反复发作等情况。在治疗效果不理想的情况下，超过90%的良性多形性腺瘤癌会恶化为恶性多形性腺瘤，此类疾病病患在涎腺恶性肿瘤中的人数占比超过15%。基质金属蛋白酶－2(matrix metalloproteinases－2，MMP－2)是通过肿瘤细胞中的无活性的酶原进行分泌产生的一种明胶酶，可以对病患机体中的弹性蛋白、纤连蛋白等进行分解，使其在明胶中进行充分溶解。组织抑制剂(tissue inhibitors of metalloproteinase，TIMPs)联合基质金属蛋白酶可以实现对病患体内的细胞外基质进行合成、降解的平衡效果。细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(extracellular matrix metalloproteinase inducer，EMMPRIN) 通 过 刺 激MMPs 的生成而促进肿瘤的侵袭，是免疫球蛋白的一种。本次实验将选取2012 年1 月～2013 年12 月期间来我院接受治疗的45 例患有多形性腺瘤的病患和42 例恶性多形性腺瘤病患，并对人体在正常情况下的涎腺组织，恶性的多形性腺瘤以及涎腺多形性腺瘤的相关EMMPRIN、TIMP－2 以及MMP－2 进行比较分析，现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料:选取2012 年1 月～2013 年12 月期间来我院接受治疗的45 例患有多形性腺瘤的病患和42 例恶性多形性腺瘤病患，同时选取同一时期在我院接受治疗的66 例正常涎腺切除术的病患进行比较。参与本次实验的所有病患其在治疗前均未进行过化疗和放疗等相关的肿瘤治疗。

1.2 方法

1.2.1 免疫组织化学SP 法:EMMPRIN、TIMP－2、MMP－2 以及MT1－MMP 制剂均选取有美国Santa Cruz 企业生产的制剂进行，SP 试剂选取有博士德生物公司生产的制剂进行。对病患的免疫组织进行染色处理，将标本进行封片处理。

1.2.2 结果判定:一般在细胞质上可检测到TIMP－2 和MMP－2，在细胞膜上可以检测到EMMPRIN 和MT1－MMP。通过对免疫组织细胞进行染色，若其出现均匀的棕黄色颗粒，且被上色的颗粒强度要高于非特异性的染色体，则可认定为阳性。在进行阳性的着色的染色体选择时，需要注意选择定位好、染色效果好且结构鲜明的颗粒进行对比分析。在每一张切片中选取5 个随机的区域进行观察，之后对其中的阳性细胞个数进行记录，计算出其阳性率。具体计算标准:0 分:阳性细胞数无，着色强度无色;1 分:阳性细胞数≤10%，着色强度淡黄色;2 分:阳性细胞数11%～50%，着色强度棕黄色;3 分:阳性细胞数51%～75%，着色强度棕褐色;4 分:阳性细胞数＞75%。当数量积分×着色强度积分＞3 分即为免疫反应阳性。

1.3 统计学方法:采用SPSS13.0 软件对本次使用的统计学数据进行分析，所有数据均以均数±标准差表示，计量资料采用t 检验，计数资料采用卡方检验，P ＜0.05 为差异具有统计学意义。

2 结果

一般MMP－2 主要存在于多形性腺瘤肿瘤细胞质当中，在正常的细胞中含量较少，TIMP－2 则主要存在于正常的涎腺上皮细胞和多形性腺瘤细胞当中，MT1－MMP 主要存在于肿瘤细胞膜中，EMMPRIN 主要也存在于肿瘤细胞膜中。通过对比恶性多形性腺瘤患者、良性多形性性腺瘤患者以及正常的涎腺组织者进行TIMP－2、MMP－2 和EMMPRIN 的相关比较，实验结果显示MMP－2 在三类患者中均有升高的迹象，比较差异具有统计学意义(P ＜0.05);TIMP－2 在正常涎腺患者中要低于患有涎腺多形性腺瘤的病患，比较差异具有统计学意义(P ＜0.05);EMMPRIN 在正常涎腺病患中要低于患有多形性涎腺腺瘤的病患，比较差异具有统计学意义(P ＜0.05);MT1－MMP 在三类患者中均出现上升的趋势，比较差异具有统计学意义(P ＜0.05)，具体情况见表2。

表2 MMP－2、TIMP－2、MT1－MMP 及EMMPRIN 在人正常涎腺组织和涎腺良、恶性多形性腺瘤中的阳性表达情况(例)

3 讨论

若病患的涎腺肿瘤细胞基质和基底膜需要得到有效的降解，起到关键作用的为MMP－2，而TIMPs 可以与MMPs 进行相互的促进，对基质的降低起到控制其速度的作用，使肿瘤细胞出现转移或侵润等。但在此过程当中，MMPs 在发挥作用时还会受到其他因素的影响，如EMMPRIN 等，这些因子相互作用，共同控制着整个过程。MT1－MMP 可以对大分子的物质进行直接的降解，同时还对纤维蛋白等均可达到降解的作用。通常情况下MMP－2 主要存在于多形性腺瘤肿瘤细胞质当中，在正常的细胞中含量较少，TIMP－2 则主要存在于正常的涎腺上皮细胞和多形性腺瘤细胞当中，MT1－MMP 主要存在于肿瘤细胞膜中，EMMPRIN 主要也存在于肿瘤细胞膜中，在分析该类疾病的侵袭性时主要通过研究分析EMMPRIN、TIMP－2、MMP－2、MT1－MMP 的数值进行判断。在本次实验中，通过对比45 例患有多形性腺瘤的病患、42 例恶性多形性腺瘤病患和66 例正常涎腺切除术的病患，发现MMP－2 在三类患者中均有升高的迹象;TIMP－2 在正常涎腺患者中要低于患有涎腺多形性腺瘤的病患;EMMPRIN 在正常涎腺病患中要低于患有多形性涎腺腺瘤的病患;MT1－MMP 在三类患者中均出现上升的趋势。该结果表明，目前多形性腺瘤仍然是一种较难治疗的疾病，其临界在良性和恶性肿瘤当中，通过观察病患的EMMPRIN、TIMP－2、MMP－2、MT1－MMP 的数值可以对病患的涎腺良、恶性多形性腺瘤的相关情况进行判断，具有良好的表达效果，值得在实际临床中进行推广。

［1］ 冯晓洁，罗 欣.Cyclin D1，CyclinE，C－Myc 在涎腺良恶性多行性腺瘤中的表达研究［J］.口腔医学研究，2011，27(12)∶ 1089.

［2］ 张 斌，孙 瑶，赵尔飏，等.CD105 和MMP－2 在腺样囊性癌中表达及预后判断的临床意义［J］.口腔颌面外科杂志，2007，17(1):50.

［3］ Sampieri CL，de la Pena S，Ochoa－Lara M，et al.Expression of matrix metalloproteinases 2 and 9 in human gastric cancer and superficial gastritis［J］.World J Gastroenterol，2010，16(12):1500.

［4］ Peng B，Cao L，Ma X，et al.Meta－analysis of association between matrix metalloproteinases 2，7 and 9 promoter polymorphisms and cancer risk［J］.Mutagenesis，2010，25(4):371.

［5］ Toden S，Belobrajdic DP，Bird AR，et al.Effects of dietary beef and chicken with and without high amylose maize starch on blood malondialdehyde，interleukins，IGF －1，insulin，leptin，MMP－2，and TIMP－2 concentrations in rats［J］.Nutr Cancer，2010，62(4):454.

［6］ 陈 宇，田 鲲，耿 宁，等.基质金属蛋白酶及其组织抑制剂在涎腺多形性腺瘤生物学行为中的意义［J］.中华口腔医学杂志，2005，40(1):58.