常州老年人载脂蛋白E基因型与胆囊结石病的相关性研究

崔文贤，陈桂金

（常州市第七人民医院检验科，江苏常州213011）

常州老年人载脂蛋白E基因型与胆囊结石病的相关性研究

崔文贤，陈桂金

（常州市第七人民医院检验科，江苏常州213011）

载脂蛋白E是机体内最主要的载脂蛋白，具有遗传上的多态性［1，2］。在分析胆囊结石的研究中发现载脂蛋白E基因多态性与胆囊结石具有一定的相关性［3，4］。本研究对2010年2月至2014年2月期间诊治的120例胆囊结石患者进行分析，采用聚合酶链式反应－限制性片段长度多态性分析患者载脂蛋白E基因型与胆囊结石的相关性，并分析不同载脂蛋白E基因型与患者血脂水平的关系。

1 资料与方法

1.1 一般资料

对本院2010年2月至2014年2月期间诊治的胆囊结石患者进行分析。120例患者男性67例，女性53例，年龄51－69岁，平均（58.7±6.9）岁。所有胆囊结石患者均经过手术证实。排除标准：糖尿病、高脂血症、肥胖、心脑血管疾病及肝肾功能异常和恶性肿瘤患者。以同期健康体检者120例为对照组。两组一般资料差异无统计学意义（P＞0.05）。

1.2 仪器与试剂

PCR扩增仪购自美国BIO－RAD公司；凝胶成像仪购自美国BIO－RAD公司；离心机购自德国Eppendorf公司；HhaI限制性内切酶购自TAKARA公司；引物由上海生物工程公司合成；其余试剂为市售分析纯。

1.3 聚合酶链式反应－限制性片段长度多态性分析

DNA提取试剂盒购自北京天根生物有限公司。PCR扩增引物序列：F－5’－TAAGCTTGGCACGGCTGTCCAAGGA－3’，R－5’－ACAGAATTCGCCCCGGCCTGGTACAC－3’。扩增程序：95℃－5 min；94℃－30s，63℃－30s，72℃－30s，30个循环；72℃延伸5min。PCR产物经琼脂糖凝胶电泳纯化后用HhaI限制性内切酶酶切，分析酶切片段。

1.4 血清脂蛋白分析

高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、总胆固醇和甘油三酯检测试剂盒购自南京建成生物工程中心。所有的检测过程均按照说明书进行操作。

1.5 统计学分析

统计数据采用SPSS19.0处理。计量资料以均数±标准差表示，两组间比较采用单因素方差分析。P＜0.05认为具有统计学差异性。

2 结果

2.1 胆囊结石患者载脂蛋白E基因型频率分析

在对胆囊结石患者载脂蛋白E基因型频率分析时发现胆结石组患者E3／4基因型频率明显高于健康对照组，有明显的统计学意义（P＜0.05），而其余基因型频率在两组之间无统计学差异性（P＞0.05），见表1。

表1 胆囊结石患者载脂蛋白E基因型频率分析

2.2 胆囊结石患者载脂蛋白E等位基因频率分析

在对胆囊结石患者载脂蛋白E等位基因频率分析时发现E4基因型频率明显高于E2和E3等位基因频率，具有显著的统计学意义（P＜0.05），见表2。

表2 胆囊结石患者载脂蛋白E等位基因频率分析

2.3 不同载脂蛋白E基因型与血清脂蛋白水平相关性分析

分析不同载脂蛋白E基因型与血清脂蛋白水平相关性发现E3／4基因型患者血清中高密度脂蛋白明显低于其他基因型患者，而低密度脂蛋白、总胆固醇和甘油三酯水平明显高于其他基因型患者（P＜0.05，P＜0.01），见表3。

表3 不同载脂蛋白E基因型与血清脂蛋白水平相关性分析

3 讨论

载脂蛋白E主要在肝脏细胞内合成，且其基因在人类体内具有多态性。载脂蛋白E可能通过调节机体内血脂水平参与了胆结石的发病过程。本研究在对常州老年人载脂蛋白E基因型与胆囊结石病的相关性进行研究时发现胆结石组患者E3／4基因型频率明显高于健康对照组，且胆结石组患者的E4基因型频率明显高于E2和E3等位基因频率；E3／4基因型患者血清中高密度脂蛋白明显低于其他基因型患者，而低密度脂蛋白、总胆固醇和甘油三酯水平明显高于其他基因型患者。因此，载脂蛋白E3／4基因型与胆囊结石发病密切相关，且E4等位基因可能是胆结石发生的易感因子。

载脂蛋白及血脂的异常与胆囊功能及胆结石密切相关［5，6］。在分析载脂蛋白B基因EcoRI多态性与胆石症关系的相关性研究中发现波兰人群中载脂蛋白B基因与胆结石的发病密切相关，且其等位基因E－／－是胆结石的保护因子［7］。在对异常黑胆质与载脂蛋白E基因多态性的关联分析中也发现载脂蛋白E多态性位点rs405509与异常黑胆质密切相关［8］。分析载脂蛋白B基因XbaI多态性与胆石症相关性的研究中也证实亚洲人群中胆结石的发病与载脂蛋白B基因Xbal多态性密切相关，且X＋是胆结石独立的危险因素［9］。本文在对胆囊结石患者载脂蛋白E基因型频率分析时发现胆结石组患者E3／4基因型频率明显高于健康对照组，且两组之间有明显的统计学意义，而其余基因型频率在两组之间无统计学差异性，表明载脂蛋白E多态性也与本地区胆囊结石患者的发病相关。

载脂蛋白是机体内最主要的载脂蛋白，且与胆固醇、高密度脂蛋白和低密度脂蛋白的代谢过程相关。本文在分析不同载脂蛋白E基因型与血清脂蛋白水平相关性时也发现E3／4基因型患者血清中高密度脂蛋白明显低于其他基因型患者，而低密度脂蛋白、总胆固醇和甘油三酯水平明显高于其他基因型患者，表明E3／4基因型可能是通过调节血脂水平异常参与了胆结石的发病过程。在对血脂水平与胆囊结石发病关系的研究中也发现血糖及血脂水平异常是慢性胆囊炎合并胆结石发病的重要原因，且可以作为疾病诊断和严重性判断的重要指标［10］。

因此，载脂蛋白E3／4基因型与胆囊结石发病密切相关，且E4等位基因可能是胆结石发生的易感因子。

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2015－03－29）

1007－4287（2015）10－1775－03