2013年上海市青浦地区革兰阳性菌耐药性监测

蔡红妹， 唐之俭， 费凤英

·论著·

2013年上海市青浦地区革兰阳性菌耐药性监测

蔡红妹1， 唐之俭2， 费凤英2

目的 了解2013年上海市青浦地区革兰阳性菌细菌耐药性监测结果，为临床合理使用抗菌药物提供依据。方法 采用自动化仪器对青浦地区2所医院临床分离的革兰阳性菌进行药敏试验，采用CLSI 2014年版标准判断结果。结果 315株革兰阳性菌中，肠球菌属细菌、金黄色葡萄球菌(金葡萄)和凝固酶阴性葡萄球菌分别占40.3%(127/315)、36.5%(115/315)、20.3%(64/315)。耐甲氧西林金葡菌(MRSA)和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)的检出率分别为48.7%和82.8%。甲氧西林耐药株对临床常用抗菌药物的耐药率均高于甲氧西林敏感株。葡萄球菌属和链球菌属细菌中未发现万古霉素和利奈唑胺耐药株。发现1株万古霉素耐药屎肠球菌和2株粪肠球菌。结论 细菌耐药性仍对临床构成严重威胁，应引起临床严重关注。

细菌耐药性监测； 药物敏感性试验； 万古霉素耐药肠球菌； 甲氧西林耐药葡萄球菌

随着抗菌药物在临床的广泛使用，细菌不可避免地出现了耐药性[1-2]。为了解本地区临床分离革兰阳性菌对常用抗菌药物的敏感性，为合理使用抗菌药物提供依据。现将青浦地区临床标本中分离培养出的革兰阳性菌，按统一监测方案进行细菌耐药性监测的结果报道如下。

1 材料与方法

1.1 细菌来源

收集 2013年1月1日—12月31日，上海市青浦区朱家角人民医院和复旦大学附属中山医院青浦分院临床分离的革兰阳性菌，剔除同一患者相同部位的重复菌株，剔除非无菌体液标本分离的凝固酶阴性葡萄球菌和草绿色链球菌，共315株，按统一方案进行药敏试验。

1.2 方法

1.2.1 药敏试验 采用VITEK 2 Compact自动化仪器进行药敏试验，测定革兰阳性菌对临床常用抗菌药物的敏感性。质控菌株为金黄色葡萄球菌(金葡萄)ATCC 25923、肺炎链球菌ATCC 49619和粪肠球菌ATCC 29212。药敏结果按CLSI 2014年版[3]标准判断执行。

1.2.2 耐药菌的检测 经苯唑西林纸片法测定抑菌圈直径≤19 mm的肺炎链球菌菌株，采用青霉素E试验条测定其最低抑菌浓度(MIC)值，脑膜炎株和非脑膜炎株分别按CLSI 2014年标准判定为青霉素敏感、中介或耐药株[3]。耐万古霉素肠球菌(VRE)检测，经万古霉素纸片法测定结果为非敏感株者，用万古霉素和替考拉宁E试验条测定MIC值。

1.2.3 统计分析 WHONET 5.6软件对数据进行处理和分析，统计细菌对临床常用抗菌药物的耐药率和敏感率，并按2014年版CLSI标准判断结果[3]。

2 结果

2.1 细菌分布

315株革兰阳性菌中，肠球菌属细菌、金葡菌和凝固酶阴性葡萄球菌分别占40.2%(127/315)、36.4%(115/315)和20.2%(64/315)，β溶血链球菌、克氏库克菌分别占2.2%(7/315)、0.6%(2/315)。住院患者分离株占95.2%(300/315)， 门急诊患者分离株占4.8%(15/315)。细菌在各类标本中的分布为尿液31.1%(98/315)、血液24.4%(77/315)、伤口脓液22.9%(72/315)、呼吸道分泌物 18.7%(59/315)、各种无菌体液(胆汁、胸腹水、脑脊液等)占2.9%(9/315)。呼吸道标本和伤口脓液标本中最常见的分离菌依次为金葡菌和肠球菌属细菌；尿液标本中为肠球菌属细菌和金葡菌；血液标本中为凝固酶阴性葡萄球菌、肠球菌属细菌和金葡菌。

2.2 耐药菌的检出率

甲氧西林耐药葡萄球菌：甲氧西林耐药金葡菌(MRSA)的检出率占金葡菌的48.7%(56/115)。凝固酶阴性葡萄球菌中甲氧西林耐药凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)的检出率为82.8%(53/64)。

VRE：127株肠球菌属细菌中粪肠球菌73株、屎肠球菌48株，其他肠球菌属6株。发现3株VRE，其中粪肠球菌2株、屎肠球菌1株。MIC测定结果显示，VRE菌株对替考拉宁也呈耐药，提示其基因型可能为vanA型耐药。

表1 葡萄球菌属细菌对临床常用抗菌药物耐药率和敏感率

2.3 革兰阳性菌对各类抗菌药物的耐药率

葡萄球菌属： MRSA对各类受试抗菌药物的耐药率较甲氧西林敏感金葡菌(MSSA)显著为高。MSSA除对青霉素的耐药率高(83.1%)以及对红霉素和四环素的耐药率分别为30.5%和13.6%外，对其他抗菌药物如β内酰胺类、利福平、氟喹诺酮类、庆大霉素和甲氧苄啶-磺胺甲口恶唑的耐药率均<6%。MRCNS对上述抗菌药物的耐药率亦均较甲氧西林敏感凝固酶阴性葡萄球菌(MSCNS)显著为高。MSCNS除对青霉素的耐药率高(72.7%)以及对红霉素和克林霉素的耐药率相对较高外，对其他抗菌药物如β内酰胺类、氟喹诺酮类、利福平、庆大霉素和甲氧苄啶-磺胺甲口恶唑的耐药率均<10%。金葡菌和凝固酶阴性葡萄球菌中均未发现对万古霉素、替考拉宁和利奈唑胺耐药菌株。见表1。

肠球菌属：127株肠球菌属细菌中粪肠球菌和屎肠球菌分别占57.5%和37.8%，其他肠球菌占4.7%。粪肠球菌对绝大多数受试抗菌药物的耐药率较屎肠球菌为低。两者对高浓度庆大霉素和高浓度链霉素的耐药率均在40%以上。屎肠球菌对氨苄西林的耐药率高达93.6%，而粪肠球菌仅为24.7%。发现1株万古霉素耐药屎肠球菌和2株万古霉素耐药粪肠球菌。见表2。

表2 肠球菌属对抗菌药物的耐药率和敏感率

溶血链球菌：7株β溶血链球菌除对呋喃妥因和四环素分别有5株和4株敏感外，对其他抗菌药物均敏感。未发现万古霉素或利奈唑胺耐药株。

3 讨论

2013年监测的315株临床分离革兰阳性菌中，肠球菌属、金葡菌和凝固酶阴性葡萄球菌居前3位。分离菌株分布以住院患者为主，占95.2%，门急诊患者占4.8%。

金葡菌和凝固酶阴性葡萄球菌中甲氧西林耐药株的检出率分别为48.7%和82.8%，MRSA检出率低于2012年上海市细菌耐药监测结果，高于2013年中国CHINET细菌耐药监测结果；而MRCNS的检出率均高于上述两监测网的结果[4-5]。

本组资料发现3株VRE，从标本来源看，尿液标本中分离到万古霉素耐药的粪肠球菌和屎肠球菌各1株，伤口脓液标本中分离到1株万古霉素耐药粪肠球菌。从科室分布看，3株VRE菌株来源于3个不同的科室，提示此3株VRE菌株可能不存在克隆相关性。根据万古霉素和替考拉宁MIC结果表型推测，3株VRE菌株对万古霉素的耐药机制可能为vanA型。

CLSI明确规定[3]，甲氧西林耐药菌株必须报告对所有的β内酰胺类药物耐药，即使是体外药敏试验结果显示敏感者，其原因是因为在该菌的基因组中含有耐药决定因子mecA基因，mecA基因编码一种对β内酰胺类亲和力很低的青霉素结合蛋白(PBP)2a，所以当正常PBP被抗生素结合而失活时，PBP2a可取代正常PBP而发挥催化细胞壁合成的作用[6]。本组资料显示，甲氧西林耐药菌株对β内酰胺类药物的耐药率≥90%，且对多数其他抗菌药物的耐药率也在60%以上。提示此类耐药菌株引起的感染将给临床抗感染治疗带来挑战。

医院重症监护病房(ICU)由于患者多，病室人员进出频繁，病床间隔距离小，隔离措施往往不到位，没有严格遵守消毒隔离措施或ICU通风设施不完备等，容易引起耐药菌株的大量滞留；加上医务人员在实施各项诊疗操作过程中， 通过手接触医疗器械、床头柜、物品等，致病原菌黏附在以上物品表面，相互接触而传播，发生医院感染[7]。本组资料显示，56株MRSA和53株MRCNS菌株中，分别有32%和30%菌株分离自ICU，提示ICU内可能存在MRSA或MRCNS克隆菌株的流行播散。临床应加强医务人员医院感染防控意识，严格各项诊疗规范， 防止患者和医务人员的交叉感染。

[1] Report of the ASM task force on antibiotic resistance[J]. Antimicrob Agents Chemother, 1995, (Suppl): 1-23.

[2] Words Health Organization. WHO global strategy for containment of antimicrobial resistance[EB/OL]. WHO/CDS/CSR/DRS/ 2001. 2.

[3] Clinical and Laboratory Standads Institute.Performance Standards for Antimicrobial Susceptibility Testing[S].Twenty-fourth Informational Supplement,2014,M100-S24.

[4] 朱德妹，汪复，郭燕，等. 2012年上海地区细菌耐药性监测[J].中国感染与化疗杂志, 2013, 13(6): 409-419.

[5] 胡付品，朱德妹，汪复，等. 2013年中国CHINET细菌耐药性监测[J].中国感染与化疗杂志, 2014, 14(5): 369-378.

[6] 章锐锋，徐志江. 社区获得性MRSA感染的临床特征和耐药性分析[J]. 中华微生物学和免疫学杂志, 2004, 24(7): 573-576.

[7] 薛利霞，周铁丽，石娜，等. 重症监护病房MRSA感染暴发调查及对策[J]. 中华医院感染学杂志, 2009, 19(18): 2410-2412.

Surveillance of bacterial resistance in the gram-positive bacteria isolated from hospitals in Qingpu, Shanghai during 2013

CAI Hongmei, TANG Zhijian, FEI Fengying

. (Zhujiajiao People′s Hospital of Qingpu, Shanghai 201713, China)

Objective To investigate the antibiotic resistance of clinical gram-positive bacteria isolated from hospitals in Qingpu District from January through December of 2013. Methods Antimicrobial susceptibility testing was carried out for the clinical gram-positive isolates according to an agreed protocol using automated system. Results were analyzed according to the CLSI breakpoints released in 2014. Results Of the 315 isolates,Enterococcusspp.,Staphylococcusaureus, and coagulase-negativeStaphylococcusaccounted for 40.3% (127/315), 36.5% (115/315), and 20.3% (64/315), respectively. The overall prevalence of methicillin-resistant strains was 48.7% inS.aureus(MRSA), and 82.8% in coagulase-negativeStaphylococcus. MRSA strains were more resistant to antimicrobial agents than methicillin-sensitive strains. NoStaphylococcusorStreptococcusstrains were found resistant to vancomycin or linezolid. Overall, one strain ofE.faeciumand 2 strains ofE.faecaliswere found resistant to vancomycin. Conclusions Antibiotic resistance poses a serious threat to clinical practice, to which more attention should be paid.

bacterial resistance surveillance; antimicrobial susceptibility testing; vancomycin-resistantEnterococcus; methicillin-resistantStaphylococcus

上海市青浦区科学技术委员会青发科2013-18。

1. 上海市青浦区朱家角人民医院检验科，上海 201713； 2. 复旦大学附属中山医院青浦分院。

蔡红妹(1970—)，女，学士，主管技师，主要从事临床微生物检验。

蔡红妹，E-mail: dianhushan@163.com。

R378

A

1009-7708(2015)04-0368-04

2014-12-24

2015-02-11