TRPC1在TGF-β1诱导支气管上皮细胞间充质转化中的作用*

岳喜磊, 成 莹, 许继德, 钟长江, 杨春涛， 汪 鹏

(广州医科大学生理学教研室，广东 广州 510182)



TRPC1在TGF-β1诱导支气管上皮细胞间充质转化中的作用*

岳喜磊▲, 成 莹▲, 许继德△, 钟长江, 杨春涛， 汪 鹏

(广州医科大学生理学教研室，广东 广州 510182)

目的： 探究经典瞬时受体电位通道1(TRPC1)在转化生长因子β1(TGF-β1)诱导人支气管上皮细胞(16HBE)间充质转化(EMT)中的作用。 方法: 以16HBE细胞株为研究对象，免疫荧光、RT-PCR和Western blotting检测16HBE细胞EMT过程中TRPC1 mRNA和蛋白的表达；Western blotting检测TRPC1阻断剂和siRNA干扰对16HBE细胞EMT的影响。 结果: (1) TGF-β1刺激后细胞形态明显改变，E-钙黏蛋白表达减少 (P<0.01)，而α-SMA蛋白表达增加 (P<0.05)。(2) TRPC1广泛存在于16HBE细胞，且TGF-β1刺激后TRPC1 mRNA和蛋白的表达增加 (P<0.05)。(3) 与TGF-β1组相比，阻断剂和TGF-β1共同作用组或siRNA和TGF-β1共同作用组细胞形态改变受抑制，E-钙黏蛋白和α-SMA蛋白表达受抑制 (P<0.05)。结论: TGF-β1诱导16HBE 细胞发生EMT，其机制可能与其上调16HBE细胞TRPC1有关。

转化生长因子β1； 人支气管上皮细胞； 瞬时受体电位通道1； 上皮细胞间充质转化

支气管哮喘是一种包括气道上皮细胞等多种细胞及细胞组分参与的气道慢性炎症，是严重危害人类健康的常见病。气道炎症、气道高反应性和气道重塑是其主要3大病理特征，而气道重塑是与气道高反应和哮喘严重程度关系最为密切的因素。哮喘气道重塑时气道结构发生诸多改变，其中包括气道上皮损伤、上皮下纤维化和气道壁网状基底膜增厚等[1]。哮喘气道上皮细胞在发生局部损伤后诱发上皮细胞向肌纤维母细胞转分化，上皮细胞特征性E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达减少，间充质细胞特征性α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin，α-SMA)表达增加，即发生了上皮细胞间充质转化(epithelial-mesenchymal transition，EMT)。气道上皮细胞在转化生长因子β1(transforming growth factor-β1，TGF-β1)的作用下发生EMT，参与哮喘气道上皮下纤维化的发生，进而参与哮喘气道重塑和气道高反应性的发生发展[2-3]。目前参与哮喘气道上皮细胞转分化的关键机制尚不清楚。上皮细胞内Ca2+是调节细胞生长、增殖、分化、凋亡和基因表达的关键信号分子，而研究报道Ca2+内流参与多种细胞EMT的发生发展[4-6]。经典瞬时受体电位通道(canonical transient receptor potential channel，TRPC)基因家族编码的蛋白介导胞外Ca2+内流，是构成钙库操纵性Ca2+通道(store-operated Ca2+channels，SOCC)以及受体操纵性Ca2+通道(receptor-operated Ca2+channels，ROCC)的重要分子基础，在调节细胞钙离子浓度中发挥着重要作用，特别是TRPC1和TRPC6[7-9]。研究报道TGF-β1通过增加TRPC的表达调节胞外Ca2+的内流[10-11]，但目前尚未明确在TGF-β1诱导的气道上皮细胞发生EMT的机制中是否有TRPC1的参与。本实验研究TRPC1是否参与TGF-β1诱导的人支气管上皮细胞EMT的发生，探讨气道上皮细胞转分化的分子调控机制，为临床防治哮喘提出新的靶点。

材 料 和 方 法

1 细胞系和主要试剂

人支气管上皮细胞系16HBE由广州医科大学实验医学研究中心保存和复苏。胎牛血清(fetal bovine serum，FBS)和1640培养基购自Hyclone；rhTGF-β1购自R&D；兔抗人E-钙黏蛋白单克隆抗体购自Cell signaling；小鼠抗人α-SMA单克隆抗体、牛血清白蛋白、TRPC通道阻断剂SKF96365和Triton X-100购自Sigma;兔抗人TRPC1多克隆抗体购自Abcam；β-actin单克隆抗体和ECL试剂盒购自杭州联科生物科技有限公司；全蛋白提取试剂盒购自南京凯基生物科技发展有限公司；PrimeScriptTMRT master Mix Kit和SYBR® Premix Ex TaqTMPerfect Real Time试剂盒购自TaKaRa。

2 方法

2.1 细胞培养与形态学变化的观察 16HBE细胞用含10% FBS的培养基体外培养。取第3代细胞接种于6孔板，10% FBS 培养24 h后，换1% FBS培养24 h，实验分2组处理：①对照组；② 10 μg/L TGF-β1组。细胞培养72 h后在倒置显微镜下观察细胞形态变化。

2.2 间接免疫荧光法检测E-钙黏蛋白和α-SMA在16HBE细胞上的表达 将各组细胞用10% FBS培养48 h后，4%多聚甲醛溶液固定，室温下0.3% Triton X-100通透，5% BSA 37 ℃封闭30 min后分别加入稀释比例为1∶100的兔抗人E-钙黏蛋白Ⅰ抗以及小鼠抗人α-SMA的I抗100 μL，以PBS为对照，4 ℃孵育过夜。次日，于37 ℃复温30 min，分别加入稀释比例为1∶100的FITC标记的山羊抗兔和山羊抗鼠的Ⅱ抗100 μL，37 ℃避光孵育1 h，DAPI溶液室温孵育5～10 min，荧光显微镜下观察并拍片。

2.3 Western blotting检测E-钙黏蛋白及α-SMA蛋白的表达 各组细胞培养24 h、48 h和72 h后按RIPA细胞裂解液说明书提取细胞蛋白。用BCA 蛋白定量试剂盒进行蛋白定量。加入SDS-PAGE 蛋白上样缓冲液，置沸水煮5 min变性蛋白质；选用5% 浓缩胶，12% 分离胶进行电泳，分别用80 V和100 V电压。然后在200 mA恒流、4 ℃条件下电转2 h；5%脱脂奶粉室温封闭1 h；TBST洗膜3次，每次10 min；分别孵育1∶1 000的兔抗人E-钙黏蛋白Ⅰ抗、1∶500小鼠抗人α-SMA的I抗和1∶2 000小鼠β-actin单克隆抗体，4 ℃孵育过夜。TBST 洗膜3次，每次10 min；再室温分别孵育与其I抗相对应的HRP标记的羊抗兔IgG及HRP标记的羊抗小鼠IgG 1 h；TBST 洗膜3次，每次10 min；加入ECL反应，用凝胶成像系统曝光成像，并用ImageJ软件对所得到的条带进行分析。以β-actin为内参照，分析各组E-钙黏蛋白以及α-SMA 蛋白的相对含量。

2.4 间接免疫荧光、RT-PCR和Western blotting检测TRPC1 mRNA和蛋白在16HBE细胞上表达 将第3代细胞接种于6孔板，10% FBS 培养24 h后，换1% FBS培养24 h，实验分组为：(1)1% FBS对照组；(2)10 μg/L TGF-β1+1% FBS培养基组。细胞培养48 h后，4%多聚甲醛溶液固定，室温下0.3% Triton X-100通透细胞，5% BSA 37 ℃封闭30 min后加入稀释比例为1∶100的兔抗人TRPC1的I抗100 μL，4 ℃孵育过夜。次日，于37 ℃复温30 min，加入稀释比例为1∶100的FITC标记的山羊抗兔的Ⅱ抗100 μL，37 ℃避光孵育1 h，DAPI溶液室温孵育5～10 min，实验中，用PBS代替I抗作为阴性对照，在荧光显微镜下观察并拍片。

细胞分组培养24 h、48 h和72 h后提取总RNA，合成cDNA，再进行PCR扩增反应，TRPC1上游和下游的引物序列分别为5’-GATGTTTGGCCAGTCCAGCTC-3’和5’-ATTCCGGGCTTGTGCAAGTAA-3’，以18S为内参照，逆转录条件: 37 ℃ 15 min；85 ℃ 5 s。然后再按照SYBR® Premix Ex TaqTMⅡ Perfect Real Time试剂盒说明书用荧光定量PCR仪进行PCR扩增反应。反应条件为 95 ℃ 30 s，95 ℃ 5 s，60 ℃ 34 s，循环40次，熔解曲线分析95 ℃ 15 s，60 ℃ 1 min，95 ℃ 15 s。2-ΔΔCt法计算各组TRPC1的相对表达量。

将上面分组细胞处理24 h、48 h和72 h后提取细胞蛋白，进行蛋白定量、电泳、转膜和封闭，分别孵育1∶1 000的兔抗人TRPC1的I抗及1∶2 000小鼠β-actin单克隆抗体，4 ℃孵育过夜。再室温分别孵育与其I抗相对应的HRP标记的羊抗兔IgG及HRP标记的羊抗小鼠IgG 1 h；加入ECL反应，用凝胶成像系统曝光成像，并用ImageJ软件对所得到的条带进行分析，以β-actin为内参照，分析各组TRPC1蛋白的相对含量。

2.5 倒置显微镜和Western blotting检测TRPC1阻断剂和siRNA转染对EMT的影响 通过Ambion 公司网站，获取沉默TRPC1基因(GenBank No.NM-00125 1845.1)的靶序列，合成正义和反义RNA链，序列分别为5’-CCACCUGUAAGAAGAUAAUTT-3’和5’-AUUAUCUUCUUACAGGUGGTT-3’，提交序列给上海吉玛公司合成siRNA。第3代细胞接种于6孔板中，10% FBS培养12～18 h，细胞密度30%～50%时，再按照以下分组处理：(1)mock transfection(转染试剂)对照组；(2)mock transfection +TRPC1 siRNA组；(3)10 μg/L TGF-β1；(4)10 μg/L TGF-β1 + mock transfection +TRPC1 siRNA组；(5)mock transfection + negative siRNA阴性对照组；(6)10 μg/L TGF-β1+ mock transfection + negative siRNA组；(7)GAPDHsiRNA + mock transfection 阳性对照组。按转染试剂盒说明书操作进行转染48 h后，提取细胞总RNA，RT-PCR检测各组细胞中mRNA的表达情况，结果提示转染组mRNA抑制率达80%左右，合成的siRNA序列有效。接种第3代细胞，实验分为：(1)对照组；(2)15 μmol/L SKF96365对照组；(3)siRNA-TRPC1 +对照组；(4)10 μg/L TGF-β1组；(5)15 μmol/L SKF96365 + 10 μg/L TGF-β1组；(6)siRNA-TRPC1 + 10 μg/L TGF-β1组, 处理48 h后在显微镜下观察细胞形态变化，并提取细胞蛋白，Western blotting分析各组E-钙黏蛋白以及α-SMA蛋白的相对含量。

3 统计学处理

实验结果均为3次以上独立重复实验所得，实验数据均以均数±标准差(mean±SD)表示，采用SPSS 16.0软件进行统计学分析。所有计量资料间比较在确定方差齐后采用单因素方差分析(one-way ANOVA)，各组间的多重比较采用LSD法；如果方差不齐则采用Welch法，组间多重比较采用Dunnett’s T3检验。以P<0.05为差异有统计学意义。

结 果

1 16HBE细胞的形态学改变

在倒置显微镜下观察到16HBE细胞培养72 h后，形成融合的单层细胞，呈立方形或小鹅卵石形, 胞间连接紧密，具有典型的上皮细胞铺路石样特征。TGF-β1 (10 μg/L) 刺激细胞72 h 后，部分细胞肥大，伸长呈梭形，细胞间隙增大，丧失其原有铺路石样生长方式，见图1。

Figure 1.Morphologic changes induced by TGF-β1 for 72 h observed under inverted microscope (×100).

2 E-钙黏蛋白及α-SMA在16HBE细胞的定位

免疫荧光检测结果显示，E-钙黏蛋白在正常16HBE细胞中高表达， TGF-β1 (10 μg/L) 刺激细胞48 h后，E-钙黏蛋白表达明显减弱。正常16HBE细胞微量表达α-SMA，而TGF-β1刺激细胞48 h后，α-SMA表达明显增加，见图2。

Figure 2.Immunofluorescence staining for E-cadherin and α-SMA (green) as well as DAPI-stained nucleus (blue) in 16HBE cells treated with TGF-β1 for 48 h (×200).

3 E-钙黏蛋白及α-SMA蛋白的表达

Western blotting检测结果显示，对照组的16HBE细胞表达E-钙黏蛋白；TGF-β1 (10 μg/L) 刺激细胞48 h和72 h组后，E-钙黏蛋白表达量明显减少，与对照组比差异有统计学意义(P<0.01)，见图3。对照组的16HBE细胞表达微量α-SMA蛋白，TGF-β1 (10 μg/L) 刺激48 h和72 h后，α-SMA蛋白表达量明显增加，与对照组比差异有统计学意义(P<0.05)，见图4。

Figure 3.The protein expression of E-cadherin in 16HBE cells. The 16HBE cells were treated with TGF-β1 for 24 h, 48 h and 72 h. The relative expression levels of E-cadherin protein were normalized to β-actin in the same sample. Mean±SD. n=4. **P<0.01 vs control group.

Figure 4.The protein expression of α-SMA in the 16HBE cells. The 16HBE cells were treated with TGF-β1 for 24 h, 48 h and 72 h. The relative expression levels of α-SMA protein were normalized to β-actin in the same sample. Mean±SD. n=4. *P<0.05 vs control group.

4 TRPC1在16HBE细胞的表达

RT-PCR检测结果显示，对照组的16HBE细胞表达TRPC1 的mRNA，TGF-β1 (10 μg/L) 刺激细胞24 h、48 h和72 h后，TRPC1的 mRNA表达明显增加，与对照组比较有显著差异(P<0.05)。用兔抗人TRPC1抗体进行间接免疫荧光检测，可见TRPC1广泛存在于16HBE细胞，见图5。

Figure 5.The mRNA expression of TRPC1 in the 16HBE cells detected by real-time PCR (A) and the protein expression of TRPC1 in the 16HBE cells detected by immunofluorescence cytochemistry (B). Mean±SD. n=4. *P<0.05 vs control group.

5 TRPC1蛋白在16HBE细胞的表达

Western blotting检测结果显示：对照组的16HBE细胞表达TRPC1蛋白；TGF-β1 (10 μg/L) 刺激24 h、48 h和72 h后，TRPC1蛋白表达量明显增加，与对照组比较有显著差异(P<0.05)，见图6。

Figure 6.The protein expression of TRPC1 in the 16HBE cells. The 16HBE cells were treated with TGF-β1 for 24 h, 48 h and 72 h. The relative expression levels of TRPC1 protein were normalized to β-actin in the same sample. Mean±SD. n=4. *P<0.05 vs control group.

6 SKF96365和siRNA干扰对EMT的影响

倒置显微镜下观察显示，TGF-β1(10 μg/L)与SKF96365(15 μmol/L)共同作用于16HBE 细胞48 h或用siRNA干扰24 h再加入TGF-β1刺激细胞48 h，16HBE细胞的形态改变均受抑制，见图7。Western blotting结果显示：TGF-β1(10 μg/L)与SKF96365(15 μmol/L)共同作用于16HBE 细胞48 h或用siRNA干扰 24 h再用TGF-β1刺激细胞48 h，由TGF-β1诱导的E-钙黏蛋白表达量减少受抑制，与TGF-β1组比较显著增加(P<0.05)，见图8；而细胞的α-SMA蛋白表达量增加受抑制，与TGF-β1组比较显著减少(P<0.05)，见图9。

讨 论

支气管哮喘是常见的慢性气道炎症，严重危害人类的身心健康，而且，近年来哮喘发病率和死亡率呈逐年增高的趋势。经实验研究和临床观察分析发现，气道重塑与哮喘患者的预后关系密切。因而，研究气道重塑的机制对于提高哮喘的治疗效果具有重要的现实意义。

EMT是指上皮细胞形态和生物功能向间充质细胞转分化的现象，其特征主要表现为上皮E-钙黏蛋白或紧密连接蛋白表达减少或丢失，失去细胞间紧密连接，导致上皮失去极性，获得浸润性和游走迁移能力。临床研究发现上皮下纤维化的主要原因是壁网状基底膜下肌纤维母细胞数量增多，而肌纤维母细胞可由气道上皮细胞转分化而来。气道上皮细胞在发生局部损伤或缺氧或生长因子等作用下，上皮细胞的黏附分子如E-钙黏蛋白表达减少，间充质细胞特征性α-SMA表达增加，即发生EMT。上皮细胞向表达α-SMA的肌纤维母细胞转分化，可作为肌纤维母细胞一个新的来源，参与气道重塑。这提示气道上皮可以作为治疗哮喘的重要靶点，有效抑制气道上皮细胞的间质化可能改善哮喘症状。

Figure 7.The effects of SKF96365 and TRPC1 silencing on the morphological changes of the 16HBE cells induced by TGF-β1 (×100). A: the 16HBE cells treated without TGF-β1 for 48 h; B: the 16HBE cells treated with TGF-β1 for 48 h; C: the 16HBE cells treated with SKF96365 for 48 h; D: the 16HBE cells treated with TGF-β1 and SKF96365 for 48 h; E: the 16HBE cells treated with TRPC1 siRNA for 48 h; F: the 16HBE cells treated with TRPC1 siRNA for 24 h, then treated with TGF-β1 for 48 h.

Figure 8.The effects of SKF96365 and TRPC1 silencing on the E-cadherin protein expression in the 16HBE cells induced by TGF-β1. The relative expression levels of E-cadherin protein were normalized to β-actin in the same sample. Mean±SD. n=4. *P<0.05 vs control group; #P<0.05 vs TGF-β1 group.

Figure 9.The effects of SKF96365 and TRPC1 silencing on the α-SMA protein expression in the 16HBE cells induced by TGF-β1. The relative expression levels of α-SMA protein were normalized to β-actin in the same sample. Mean±SD. n=4. *P<0.05 vs control group; #P<0.05 vs TGF-β1 group.

TGF-β超家族是一类由2个结构相同或相近的二硫键相连形成的二聚体多肽，哺乳动物TGF-β 家族至少包括TGF-β1、TGF-β2和TGF-β3 共3种亚型，其中TGF-β1所占比例最高，生物活性最强。根据不同的结构和功能，TGF-β 受体分为I 型受体(Tβ RI)和II 型受体(TβRII)两大类。TGF-β 与Tβ RII结合后使Tβ RI 发生磷酸化，使TGF-β 发挥调控EMT 的生物学作用。抑制TβRII可逆转和抑制EMT的发生，TβRII缺失和EMT的下调密切相关。此外，抑制TβRI受体也可阻断TGF-β 诱导的EMT，使用TβRI化学受体阻滞剂和干扰TβRI基因都能阻断EMT的发生并促进上皮细胞表型的表达。研究认为，TGF-β 诱导的EMT主要通过Smads 依赖性信号转导通路发挥作用。许多研究证明Smads 信号在TGF-β 诱导的EMT中起重要作用。TGF-β 通过胞内丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶结构域磷酸化而激活，导致 Smad2 和Smad3 磷酸化，再与 Smad4 结合，形成三聚体复合物进入细胞核，调节靶基因的表达，进而调控 EMT的发生[12]。作为一个重要的致纤维化因子，TGF-β1能够诱导上皮细胞形态和生物学功能向间质细胞表型转分化，促进上皮细胞向肌纤维母细胞转分化，从而参与气道纤维化而导致病理生理改变。研究发现哮喘患者肺泡灌洗液及气道壁内TGF-β1增高，而体外的实验研究亦表明损伤的气道上皮细胞分泌TGF-β1增多[13]。他们的研究证实气道上皮细胞在TGF-β1的作用下发生EMT，参与哮喘气道上皮下纤维化的发生，进而参与哮喘气道重塑的发生发展[11]。

Ca2+是多种受体激活后信号转导过程中的关键信号分子，参与调节细胞的功能。Berridge等[14]的研究表明Ca2+内流的改变在EMT的发生过程中发挥重要作用，而且主要是SOCC的改变引起的Ca2+内流，其确切的激活机制及涉及的通道尚需更多研究确认。越来越多的研究表明TRPCs通道蛋白参与钙库操纵性Ca2+内流(store-operated Ca2+entry，SOCE)调节，引起细胞外Ca2+内流增加，特别是TRPC1通道。Vergara等[15]研究显示当TRPC1基因沉默或者TRPC1蛋白表达降低，钙离子内流减少，细胞内自由Ca2+浓度降低。反之，TRPC1蛋白表达增多，钙离子内流增加，细胞内自由Ca2+浓度升高。因此，研究TRPC1通道与气道上皮细胞EMT的关系具有十分重要的意义和应用前景。

本课题组用TGF-β1诱导细胞发生EMT，结果提示16HBE细胞培养72 h，具有典型的上皮细胞铺路石样特征。TGF-β1 作用细胞72 h后，细胞伸长呈梭形，丧失其原有铺路石样生长方式，而且上皮细胞表型标志物E-钙黏蛋白表达明显减弱，肌纤维母细胞的表型标志物α-SMA表达明显增加。实验结果与文献报道一致，即气道上皮细胞在TGF-β1的作用下发生EMT。检测TRPC1在16HBE细胞上的表达，结果提示TRPC1在16HBE细胞上广泛表达。用RT-PCR和Western blotting检测了TGF-β1作用后TRPC1 mRNA和蛋白在16HBE细胞上表达变化，结果显示TGF-β1作用后TRPC1的mRNA和蛋白表达均明显上升，而且其改变具有时间依赖性，推测TRPC1可能在TGF-β1诱导16HBE细胞发生EMT中发挥了重要作用。

为证实这个推论，我们用TGF-β1与SKF96365 共同作用于细胞，结果与TGF-β1组比较，显著抑制了TGF-β1诱导的16HBE细胞间质化的作用；用siRNA干扰16HBE细胞的TRPC1基因，再用TGF-β1刺激16HBE细胞48 h，结果与TGF-β1组比较，显著抑制了TGF-β1诱导的16HBE细胞间质化的作用，这证实了TRPC1参与TGF-β1诱导的气道上皮细胞间质转化。

本研究表明，TGF-β1上调了TRPC1的表达，TRPC1阻断剂SKF96365和干扰16HBE细胞的TRPC1基因均抑制TGF-β1诱导的16HBE细胞的EMT，提示TRPC1参与了TGF-β1诱导16HBE细胞EMT过程，且这一过程可能与其影响胞浆内钙离子浓度有关。当然，若进一步明确TRPC1通道参与TGF-β1诱导16HBE细胞间质化与胞浆内钙离子浓度这两者之间的关系，尚需深入研究。

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Effects of TRPC1 on TGF-β1-induced epithelial-mesenchymal transition of human bronchial epithelial cells

YUE Xi-lei, CHENG Ying, XU Ji-de, ZHONG Chang-jiang, YANG Chun-tao, WANG Peng

(DepartmentofPhysiology,GuangzhouMedicalUniversity,Guangzhou510182,China.E-mail:xujide@163.com)

AIM: To investigate the role of canonical transient receptor potential channel 1 (TRPC1) in the epithelial-mesenchymal transition (EMT) of human bronchial epithelial (HBE) cells induced by transforming growth factor-β1 (TGF-β1). METHODS: EMT of 16HBE cells induced by TGF-β1 were identified by microscopy, immunofluorescence and Western blotting. Immunofluorescence, real-time PCR and Western blotting were applied to detect the mRNA and the protein expression of TRPC1 in the 16HBE cells. The influence of SKF96365 (a TRPC1 blocker) and siRNA-mediated silencing ofTRPC1 on the EMT of the 16HBE cells were detected by microscopy and Western blotting. RESULTS: Treatment with TGF-β1 induced significant morphological changes of the 16HBE cells. Exposure to TGF-β1 decreased the expression of E-cadherin protein (P<0.01) and increased the expression of α-SMA protein (P<0.05) in the 16HBE cells. Immunofluorescence observation indicated that TRPC1 expression in the 16HBE cells was positive. The expression of TRPC1 at mRNA and protein levels was significantly increased in the 16HBE cells after stimulation with TGF-β1 (P<0.05). The morphological changes of the 16HBE cells induced by TGF-β1 were inhibited by SKF96365 andTRPC1 silencing compared with TGF-β1 group. The protein expression of E-cadherin and α-SMA induced by TGF-β1 were inhibited by SKF96365 andTRPC1 silencing compared with TGF-β1 group (P<0.05). CONCLUSION: TGF-β1 induces EMT with the mechanism of up-regulating TRPC1 in human bronchial epithelial cells.

Transforming growth factor-β1; Human bronchial epithelial cell; Transient receptor potential channel 1; Epithelial-mesenchymal transition

1000- 4718(2015)03- 0492- 07

2014- 07- 23

2014- 12- 16

广东省科技计划(No. 2012145)； 广州市高校科技项目(No. 10A149)

△通讯作者 Tel: 020-81340199; E-mail: xujide@163.com

▲并列第1作者

R363.2； R562.25

A

10.3969/j.issn.1000- 4718.2015.03.019