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升麻萃取物对大鼠离体肠肌运动的影响研究*

2015-04-12张建英左爱学刘羿晨

中国药业 2015年23期
关键词:水提液生药升麻

张建英,左爱学,刘羿晨

(云南中医学院,云南 昆明 650500)

升麻萃取物对大鼠离体肠肌运动的影响研究*

张建英,左爱学,刘羿晨

(云南中医学院,云南 昆明 650500)

目的 探索升麻提取物对SD大鼠小肠动力影响的有效部位。方法 采用SD大鼠小肠平滑肌离体试验,观察升麻水提取物及其氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取物对平滑肌收缩波形的影响。结果 升麻水提物和氯仿萃取部分对试验大鼠离体小肠平滑肌有显著降低基线和幅值的作用,给药前后差异有统计学意义(P<0.05)。结论 升麻水提物具有抑制小肠运动的作用,其主要有效成分存在于氯仿萃取部分。

升麻;离体肠肌;小肠动力

升麻为毛茛科升麻属植物升麻 Cimicifuga foetida.的根茎[1],具有发表、透疹、解毒的功效,临床用于治疗中气下陷[2-3]、久泻久痢、脱肛、妇女崩、带,子宫下坠等症[4]。本研究旨在探索升麻对小肠动力的影响及其作用的有效部位,现报道如下。

1 材料与方法

1.1 材料

动物:SD大鼠8只,雌性,体重约200 g,由昆明医科大学提供,生产许可证号为SCXK(滇)2011-0004。

试剂与药品:氯化钠,无水氯化钙,氯化钾,氯化镁,碳酸氢钠,磷酸二氢钠,葡萄糖,均为分析纯,用于配制台氏液(Tyrode)。升麻(产地四川,批号20130404),每1 kg升麻分别用8,8,6 kg纯净水煎煮3次,去渣后加热浓缩至1 g/mL生药浓度,制得升麻水提液。根据需要配制相应质量浓度。取质量浓度为1 g/mL的升麻水提液3 000 mL,依次用氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取,分别回收溶剂得氯仿萃取物A 17.9 g,乙酸乙酯萃取物B 27.8 g,正丁醇得萃取物C 13.8 g。将A,B,C分别配制为100%和50%生药浓度备用。

仪器:Powerlab多功能生理记录仪(澳大利亚,ADInstrument;Model:ML 118;Name:Quad Bridge);Chart 5分析软件,SPSS分析软件。

1.2 方法

大鼠正常饲养,禁食不禁水18 h,脱颈处死,迅速剖开腹腔找到胃,以幽门部与十二指肠交界处为起点剪下8~10 cm大鼠小肠,立即浸入台氏液中,将其剪成1~2 cm小段,用眼科镊和眼科剪轻轻除去肠内容物,并除净肠系膜。取活性较好的4段肠段,一端通过细线连接张力换能器,另一端固定于浴槽底部,用Powerlab多功能生理记录仪描记离体平滑肌的收缩曲线,加药0.1 mL,前后各观察20 min,用Chart 5分析软件记录并分析大鼠小肠离体平滑肌的收缩幅值、频率、最小值。

1.3 统计学处理

给药前后比较采用配对 t检验。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

结果见表1。可知,50%和100%生药浓度的升麻水提液对大鼠离体小肠平滑肌具有抑制幅值和最小值的作用,但平均频率增加,且差异均有统计学意义(P<0.05)。50%生药浓度的升麻水提液氯仿萃取物对大鼠离体小肠平滑肌具有抑制幅值和最小值的作用,但频率增加,且差异均有统计学意义(P<0.05)。100%生药浓度的升麻水提液氯仿萃取物对大鼠离体小肠平滑肌具有抑制幅值、频率、最小值的作用,且差异有统计学意义(P<0.05)。加入升麻水提液正丁醇萃取物、乙酸乙酯萃取物后离体小肠平滑肌波形未见明显变化,加药前后的幅值、频率、最小值比较差异无统计学意义(P>0.05)。

表1 各种药液对离体小肠平滑肌的影响(±s,n=8)

表1 各种药液对离体小肠平滑肌的影响(±s,n=8)

注:与给药前比较,βP<0.05。

药液(含生药浓度)升麻水提液(50%)升麻水提液(100%)氯仿萃取物(50%)氯仿萃取物(100%)正丁醇萃取物(100%)乙酸乙酯萃取物(100%)时间给药前给药后给药前给药后给药前给药后给药前给药后给药前给药后给药前给药后平均幅值(g)0.24±0.07 0.18±0.08β0.57±0.22 0.31±0.14β0.56±0.12 0.40±0.07β0.47±0.05 0.39±0.11β0.37±0.12 0.36±0.15 0.37±0.18 0.37±0.18平均频率(Hz)0.34±0.01 0.42±0.02β0.24±0.06 0.39±0.08β0.31±0.02 0.39±0.03β0.37±0.04 0.29±0.07β0.25±0.03 0.29±0.05 0.34±0.04 0.32±0.04平均最小值(g)0.42±0.06 0.26±0.08β0.51±0.19 0.40±0.19β0.67±0.05 0.55±0.12β0.42±0.17 0.36±0.12β0.66±0.20 0.71±0.17 0.33±0.17 0.33±0.14

3 讨论

近年来,学者们对升麻进行了大量研究。李从军等[5]及Sakurai等[6]领导的研究小组对升麻的化学成分进行了系统研究,从升麻中提取分离了200余个化合物,主要含有三萜及其苷类、酚酸类及其衍生物、色元酮和挥发油等化合物。马凌志等[7]采用水蒸汽蒸馏法提取升麻中的挥发油,并通过毛细管柱气相色谱/质谱联用技术分析其成分,发现升麻挥发油中的主要成分为棕榈酸,占所鉴定化合物的55.01%。刘蓓蓓等[8]研究发现,升麻对多种癌细胞如人肝癌细胞(HepG2)、人乳腺细胞(MCF-7,MDA-MB231)等均具有良好的抑制作用。刘方舟等[9]研究发现,升麻各提取物SMT75%醇提物(SMT1)、SMT总皂苷(SMT2)、SMT总有机酸(SMT3)体外均具有明显抗乙型肝炎病毒(HBV)活性。

目前对升麻的研究主要集中于成分分析及抗癌作用方面,对升麻影响胃肠动力方面的临床和药理研究则很少。临床采用加减升麻葛根汤治疗婴幼儿腹泻,疗效良好[10]。余胜珠等[11]观察补中益气汤联合四神丸加减治疗老年大肠癌术后腹泻的临床疗效,与盐酸洛哌丁胺胶囊及双歧三联活菌胶囊进行比较,治疗组总有效率为88.89%,显著高于对照组的50.00%(P<0.05)。本课题组在对中医名方“补中益气汤”进行试验研究的过程中,亦发现升麻是补中益气汤止泻作用的重要药物之一,单味升麻亦具有较好的止泻功效[12]。

本研究发现,升麻水提液对离体小肠平滑肌运动具有抑制作用,其氯仿萃取物对波形幅值和最小值的抑制作用与原水提液相似,且抑制作用稳定,但对频率的影响有兴奋和抑制2种倾向,推测可能与剂量相关。升麻水提液乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物对离体小肠平滑肌的影响则并不明显。由此可知,升麻对胃肠运动有一定的抑制作用,且该作用的有效部位存在于氯仿萃取部分。

[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[M].北京:中国医药科技出版社,2010:68.

[2]高雪枝.升麻升提作用的临床应用[J].陕西中医学院学报,1996,19(4):10-11.

[3]贾海荣.枳实、升麻、柴胡伍用治胃下垂效果好[J].神经药理学报,1997(3):94-95.

[4]文 魁,丁国华.中医临床必读丛书-脾胃论[M].北京:人民卫生出版社,2005:33.

[5]李从军,陈迪华,肖培根.中药升麻的化学成分(V)[J].中草药,1995,26(6):288-289,318.

[6]Sakurai N,Kozuka M,Tokuda H,et al.Antitumor agents 220.Antitumorpromoting effects of cimigenol and related compounds on Epstein-Barr virus activation and two-stage mouse skin carcinogensis[J].Biol Med Chem,2003,11(6):1 137-1 140.

[7]马凌志,何丽娟,高毓涛.中药升麻的挥发油成分分析[J].首都医药,2007,14(2X):41.

[8]刘蓓蓓,陈胜璜,陈四保.升麻化学成分及其抗肿瘤活性研究进展[J].中南药学,2012,10(1):53-58.

[9]刘方舟,时宇静,郭姗姗,等.升麻提取物SMT体外抗乙肝病毒作用研究[J].世界中西医结合杂志,2014,9(5):534-536

[10]江英能.加减升麻葛根汤治疗婴幼儿秋季腹泻39例[J].新中医,1998,30(6):14-16.

[11]余胜珠,杨光华,陈连生,等.补中益气汤联合四神丸加减治疗老年大肠癌术后腹泻18例[J].中国药业,2013,22(8):99-100.

[12]张建英,梁 玲,聂 坚,等.补中益气汤水提物及萃取物对肠肌的作用[J].辽宁中医杂志,2015,42(2):411-412.

Influence of Extracts from Cimicifuga Foetida on the Motility of Ex Vitro Intestine in Rats

Zhang Jianying,Zuo Aixue,Liu Yichen
(Yunnan University of TCM,Kunming,China 650500)

s:Objective To investigate the effective part of intestinal motility in SD rats by Cimicifuga foetida extracts.Methods Based on the variation of amplitude,frequency and baseline of excised intestinal smooth muscle of rats,the effectiveness of the water extracts of C.foetida,and its chloroform extract,ethyl acetate extract,n-butanol its were compared.Results The water extracts of C.foetida restrained the amplitude,baseline significantly(P<0.05),furthermore its chloroform extract had the same effect.Conclusion The water extracts of C.foetida restrained the movement of the isolated intestinal smooth muscle,and its effective part is chloroform fraction.

Cimicifuga foetida;Ex vitr intestine;intestinal motility

R285.5;R282.71

A

1006-4931(2015)23-0016-02

张建英(1980-),女,满族,河北青龙人,硕士研究生,讲师,主要从事中医脾胃病临床与试验研究,(电子信箱)zhangjianyingyn@126.com;左爱学(1978-),男,汉族,云南富源人,博士研究生,主要从事中药化学及质量控制研究工作,本文通讯作者,(电话)0871-65919635(电子信箱)zuoax@163.com。

2015-02-05;

2015-09-03)

β国家自然科学基金项目,项目编号:81260514;云南省科技厅应用基础研究项目,项目编号:2011FZ160。

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