应用自体和同种异体半肌腱重建兔前交叉韧带对血管生成状态的初步研究

牟岩涛，郝建学，杜乔伟

应用自体和同种异体半肌腱重建兔前交叉韧带对血管生成状态的初步研究

牟岩涛1，郝建学2，杜乔伟3

兔；半肌腱重建前交叉韧带手术；自体；同种异体；血管生成

前交叉韧带的主要作用是稳定膝关节，一旦该韧带断裂，则导致膝关节稳定性丧失，临床上多采用前交叉韧带膝关节重建手术进行治疗[1]。手术过程中，重建材料多选择肌腱，肌腱的选择途径较为广泛，主要有自体肌腱与同种异体肌腱两种。而肌腱与骨骼的融合将直接影响血管的正常生长，对后期恢复意义重大[2]。本研究以兔作为试验对象，研究应用自体和同种异体半肌腱重建兔前交叉韧带过程中血管生成的变化，为临床治疗提供依据。

1 材料与方法

1.1 材料 选取健康新西兰种兔48只，雌雄不限，依次编号为1～48号，按照随机数字法将其平均分为自体组与异体组，每组24只。自体组兔月龄为3.5～5个月，平均(4.6±0.8)个月，体重2～3 kg，平均(2.6±0.3)kg；异体组兔月龄3～5个月，平均(4.3±0.6)个月，体重2～3.5 kg，平均(2.8±0.4)kg。两组月龄、体重差异无统计学意义。

1.2 肌腱摘取 自体组取胫骨结节内后，大腿内侧分离出的半腱肌腱，保留远端止点，剔除肌性部分，近端用3-0涤纶编织线缝编作为牵引备用。异体组移植所用材料：在手术开始实施前10 d时，无菌环境下将健康新西兰种兔趾长屈肌腱取出，长度5 cm左右，放置于无菌容器内保存，于-80～-70 ℃环境中冷冻备用。选用深圳瑞格尔仪器有限公司生产的RCT-10微机控制万能拉力试验机。

1.3 半肌腱重建前交叉韧带手术 在手术开始前1 h，将冷冻保存的同种异体肌腱取出，解冻备用，手术开始前30 min，采用苯巴比妥对种兔是实施全身麻醉，暴露后肢，将小腿近端正中央皮肤纵向切开，切口为3 cm，并将切口下组织剥离，暴露种兔的胫骨上端部分，取出8 mm×5 mm的骨膜块，做出清晰标记，放置在0.9%氯化钠溶液中留作备用；于同侧的干骺端，取胫骨平台5 mm位置做一2.5 mm直径的骨隧道，将同种异体的肌腱用取好的骨膜块包裹起来，间断缝合于肌腱的表面，固定；将肌腱间与骨膜两端缝合3～4针，确保骨膜不发生返转的状况；在处理好上述步骤后，将肌腱近端缝合于内侧的入口肌腱部位，准确固定好；创面采用0.9%氯化钠溶液冲洗手术创面，缝合切口，包扎，手术完毕。自体组手术方法同上。应用影像学手段，对两组种兔移植手术后的血管生成状态进行检测；同时，观察两组手术后3个月前交叉韧带的最大拉出或拉断强度情况，并记录分析。

1.4 观察指标 血管生成状态分为良好、一般、较差。良好：血管全部正常，血运状态良好；一般：血管部分恢复正常，血运状态一般；较差：血管未能正常生成，或生成后血运状态较差等。

2 结 果

2.1 两组种兔血管生成情况 异体组血管生成状态良好的种兔所占比例高于自体组，差异有统计学意义(χ2=6.28，P<0.05，表1)。

表1 两组半肌腱重建前交叉韧带种兔血管生成情况 (n；%)

注：与自体组相比，①P<0.05。

2.2 两组前交叉韧带的最大拉出或拉断强度情况 经方差齐性分析显示，两组力学参数服从正态分布，异体组种兔接受手术后3个月前交叉韧带的最大拉出强度(35.31±1.24)N/cm及拉断强度(43.13±1.57)N/cm，与自体组种兔前交叉韧带的最大拉出强度(31.64±1.42)N/cm或拉断强度(39.76±1.74)N/cm相比明显提高，差异有统计学意义(t=9.53、7.04，P<0.05)。

3 讨 论

前交叉韧带断裂是骨科常见损伤，其断裂后造成的原发性关节不稳和继发性关节损害正引起临床重视。笔者以新西兰种兔为研究对象，对其进行自体和同种异体肌腱移植手术发现，异体组血管生成状态良好的种兔所占比例(75.00%)明显高于自体组，差异有统计学意义(P<0.05)。分析原因为异体组种兔的血管生成状态良好，由冷冻条件下取出的肌腱，均未使用任何免疫抑制药，且后续恢复过程中未出现炎性反应、组织坏死及液体渗出等，且经过冷冻保存后，对肌腱表面的抗原物质进行破坏，降低了移植过程的抗原抗体反应，安全性较高[3]。同种异体肌腱移植后，促进血管的正常生成，有利于血液循环的恢复，进而增加了肌腱组织的血液供给[4]。

本研究显示，与自体组相比，异体组种兔手术后3个月前交叉韧带的最大拉出强度或拉断强度明显增高，差异有统计学意义(P<0.05)。异体组种兔在接受手术治疗后，经过3个月的恢复，其韧带拉伸强度恢复较好。笔者认为，种兔的同种异体肌腱移植过程中，对骨膜起到了保护的作用，同时，确保了肌腱与骨膜的正常融合，促进了软骨组织的生成，并使其进一步生长分化成为骨组织等[5]。同种异体肌腱的应用，可提高前交叉韧带中纤维组织的能力，有利于纤维组织发挥其正常的作用，为骨间滑液的形成奠定了坚实的基础，导致肌腱与骨间组织的充分融合，其作用相当于强大的诱导剂，提高纤维组织的能力，缩短成骨组织形成的时间，加速肌腱与骨骼组织的愈合[6]。

综上所述，在半肌腱重建前交叉韧带手术中采用同种异体移植，疗效十分显著，能够改善血管生成状态，对韧带拉伸强度有较大提升，提高了治疗过程的安全性。同种异体肌腱的移植术其主要的优点在于减少了治疗后膝关节的并发症，对膝关节的正常屈伸活动有一定的保护作用，手术时间大大缩短，降低了膝关节僵硬的发生率，使膝关节治疗后的外观得到了较大的改善等[7]。随着医学技术水平的提高，同种异体肌腱移植技术还有待进一步研究，以改善手术中存在的问题，避免治疗后并发症的发生，满足患者对治疗效果的要求，提高患者治疗后的生活质量。

[1] 卢启贵，王 平，黄东红，等.镜下自体梋绳肌与同种异体半腱肌重建膝前交叉韧带对比研究[J].实用骨科杂志，2013，19(8)：709-712.

[2] Samsell B J，Moore M A.Use of controlled low dose gamma irradiation to sterilize allograft tendons for ACL reconstruction：biomecbanical and clinical perspective[J].Cell Tissue Bank，2012，13(2)：217-223．

[3] 李 皓，王大平，陆 伟，等.关节镜下前交叉韧带重建300例临床研究[J].中华临床医师杂志(电子版)，2012，6(8)：2020-2023.

[4] 刘远宏.56例关节镜下同种异体肌腱重建膝关节前后交叉韧带的临床观察[J].局解手术学杂志，2013，22(1)：91-92.

[5] 张 明，王岩峰，韩晓锐，等.关节镜下膝关节前交叉韧带断裂同种异体肌腱重建的临床研究[J].中国矫形外科杂志，2011，272(6)：10-12.

[6] 刘晓晖，周 敏，朱建平，等.关节镜下自体半腱肌腱移植重建前交叉韧带的疗效[J].江苏医药，2013，39(18)：2203-2204.

[7] 董向辉，凌 鸣，冯伟楼，等.关节滑液对兔前交叉韧带重建后腱骨愈合生物力学和组织学的影响[J].中国组织工程研究，2012，16(11)：1937-1940.

(2015-08-20收稿 2015-09-20修回)

(责任编辑 尤伟杰)

牟岩涛,本科学历，主治医师，E-mail:63404202@qq.com

1.071000，保定市骨科医院骨二科；2.071000，保定市第一医院；3.400038 重庆，第三军医大学

郝建学，E-mail:13833047882@163.com

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