乙肝病毒大蛋白与HBV-DNA相关性分析

陕西省人民医院检验科(西安 710068)

袁 军 陈立娟△ 解 娟 张利侠▲ 奚逢瑜 党小军

乙肝病毒大蛋白与HBV-DNA相关性分析

陕西省人民医院检验科(西安 710068)

袁 军 陈立娟△解 娟 张利侠▲奚逢瑜 党小军

目的：探讨血清乙肝病毒大蛋白(HBV-LP)表达与HBV复制的关系。方法：用ELISA法检测299份HBV患者血清HBV-LP和HBV免疫标志物，用FQ-PCR法检测其HBV-DNA含量。结果：299份血清中HBV-LP阳性率68.6%，HBV-DNA阳性率72.9%，二者相比无统计学差异；299份血清132中份HBeAg阳性，167份HBeAg阴性；HBeAg阳性血清中HBV-LP阳性率93.1%，HBV-DNA阳性率97.7%，二者相比无统计学差异；HBeAg阴性血清标本HBV-LP的阳性率49.1%，HBV-DNA阳性率53.3%，二者阳性率相比无统计学差异；在乙肝的不同表型模式上HBV-LP 和HBV-DNA的检出率比较无统计学差异；在HBV-DNA≥106IU/ml时，HBV-LP阳性率较高(92.7%)；100例健康对照组血清标本HBV-LP全部为阴性。 结论：HBV-LP与HBV-DNA有良好的相关性，是HBV复制的重要标志，检测HBV-LP对判断HBV复制，特别是对基层单位指导HBeAg阴性患者的治疗有重要的临床意义。

乙型肝炎病毒大蛋白(HBV-LP)是乙型肝炎病毒包膜的构成部分，它不仅存在于Dnae颗粒上，也存在于管状病毒颗粒(亚病毒颗粒)上，其前S区具有激活病毒复制作用，当血液中HBV-LP高滴度存在时，会导致病毒复制作用重新激活，在判定HBV复制与疾病活动方面有重要意义。本研究旨在通过同步检测299例不同病期乙型肝炎患者血清HBV-LP和HBV-DNA，揭示它们的相关性以探讨HBV-LP对判断乙型肝炎患者体内HBV复制的临床意义。

对象与方法

1 研究对象 选择2013年1月～2014年1月之间陕西省人民医院感染科门诊及住院患者299例，其中男174例，女125例，年龄12～65岁，平均42.5岁。100例健康对照者来源于健康体检者(乙肝二对半全阴)，年龄18～65岁，平均32.8岁。

2 方 法

2.1 HBV检测： HBV乙肝两对半试剂购于英创新科(厦门)科技有限公司，HBV-LP试剂购于北京热景生物技术有限公司。

2.2 HBV-DNA检测：试剂购于中山大学安达基因股份有限公司，HBV-DNA检测值≥103IU/ml为阳性，检测值<103IU/ml为阴性。PCR仪采用ABI公司的7500荧光定量仪，所有的操作均按照试剂和仪器操作说明检测。

2.3 统计学方法：采用SPSS17.0统计学软件，计算资料以χ2检验，以P<0．05认为有统计学意义。

结 果

1 HBV-LP和HBV-DNA的检出率 在299份血清样本中HBV-LP阳性率68.6%，HBV-DNA的阳性率72.9%，二者相比无统计学差异；299份样本中132份HBeAg阳性， 167份HBeAg阴性； HBeAg阳性患者血清中HBV-LP阳性率93.1%(123/132)，HBV-DNA阳性率97.7%(129/132)，二者相比无统计学差异(P>0.05)；HBeAg阴性患者血清标本HBV-LP的阳性率49.1%(82/167)，HBV-DNA阳性率53.3%(89/167)，二者相比无统计学差异(P>0.05)。100例健康对照血清标本HBV-LP全部为阴性。

2 不同乙肝表型中HBV-LP和HBV-DNA的检出率 HBV-LP和HBV-DNA在不同乙肝表型中的检出率不同，血清学模式中以HBsAg、HBeAg、抗HBc三者均为阳性(大三阳)，其HBV-LP和HBV-DNA的检出率相比无统计学差异(P>0.05)；血清学模式HBsAg、抗HBe、抗HBc三者阳性(小三阳)，其HBV-LP和HBV-DNA的检出率相比无统计学差异(P>0.05)；其他表型及比例，见表1。

3 HBV-DNA不同含量时HBV-LP的阳性率 299例患者测定HBV-DNA拷贝数与HBV-LP阳性率成正相关，HBV-DNA≥106IU/ml时，HBV-LP阳性率的阳性率较高位92.7%，见表2。

表1 不同表型HBV-LP和HBV-DNA检出率(%)

表2 HBV-DNA不同含量时HBV-LP的检出率

讨 论

目前，乙型肝炎的诊断主要以血清学指标(两对半)及肝功能、临床表现来确定。临床常以HBeAg和HBV-DNA水平来反映患者体内HBV复制情况。以HBV-DNA定量检测结果作为抗病毒疗效监测及预后判断的主要依据[1]。研究表明，在HBeAg阴性的慢性乙肝患者中，由于病毒DNA发生了C区或BCP区的变异，导致了HBeAg合成障碍而出现假阴性。HBV-LP有Pre-S1、Pre-S2和S三部分组成，是HBV Dane颗粒和亚病毒颗粒。

本研究显示，血清HBV-LP和HBV-DNA检测的阳性率无统计学差异，与秦峰等研究的结果一致[2]; HBV-LP阳性率与HBV-DNA的拷贝数成正相关，与罗志琴等研究结果一致[3,4]，因而HBV-LP可以作为反映病毒复制的血清学指标。

本研究提示：无论哪种HBV 表型模式都有不同程度的HBV-LP检出，检出率与HBV-DNA的符合率92.2%，说明二者具有良好的一致性，能够准确反映出乙肝患者体内病毒的复制情况[5]；其次，其阳性率随着HBV-DNA浓度(IU/ml)的升高而增加，这一点不仅说明HBV-LP是HBV复制的可靠指标，同时也证明了HBV病毒包膜的形成需要HBV-LP参与的理论；再次，HBeAg阴性患者血清标本HBV-LP的阳性率高达42.1%，表明检测HBV-LP有助于患者体内HBV复制程度的判定，特别对于还难以开展HBV-DNA检测的广大基层医疗单位，通过检测HBV-LP有助于诊断HBeAg阴性患者的治疗和疗效评估。本研究还显示：HBV-LP和HBV DNA的检出率无差异，故HBV-LP的检出情况在一定程度上可辅助乙肝的诊断；加之酶联免疫检测乙肝病毒外膜大蛋白对诊断乙肝，具有操作简单、结果可靠、快捷方便、具有较高的临床价值等优点，适合在各级医院推广。

[1] 中华医学会肝病学分会. 慢性乙型肝炎防治指南[M].北京:人民卫生出版社，2005:7-8.

[2] 秦 峰，黄旭东. 乙肝患者血清中乙肝病毒大蛋白含量及其与病毒复制的关系[J].常州实用医学，2011，27(6):353.

[3] 罗志勤，周 欣，乐爱平，等.乙肝病毒大蛋白与Hbeag、HBV-DNA相关性的临床意义[J].江西医学检验，2006，24(6):512.

[4] 王连跃，张 岱，葛颜文，等.血清乙型肝炎病毒大蛋白检测及其临床意义[J].中华实验和临床病毒学杂志，2010，24(5):349-351.

[5] 庄 鹏，吴正林，刘 键，等.慢性HBV患者血清乙肝病毒表面大蛋白检测与临床意义[J]，广东医学，2009，30(2):211-212.

(收稿：2015-03-20)

Correlation analysis of Hepatitis B virus large proteins and HBV - DNA Department of Clinical Laboratory，Shaanxi Provincial People’s Hospital

(Xi’an 710068)

Yuan Jun Chen Lijuan Xie Juan et al

Objective: To study the serum hepatitis b virus large protein (HBV - LP) expression and the relationship between HBV replication.Methods: Enzyme linked immunosorbent test (ELISA) method for detecting the specimens of 299 patients with HBV serum HBV - LP and HBV immune markers， at the same time by fluorescence quantitative PCR (FQ - PCR) method to detect HBV - DNA content. Results: In 299 serum samples of HBV - LP positive rate was 68.6%， the HBV - DNA positive rate was 72.9%， the positive rate compared with no statistical difference，299 serum samples from 132 HBeAg positive， 167 HBeAg negative;HBV - LP in HBeAg positive serum samples the positive rate of 93.1%， HBV DNA - the positive rate of 97.7%， the positive rate compared with no statistical difference.HBeAg negative serum specimens - LP HBV positive rate 49.1%， HBV - DNA positive rate of 53.3%， the positive rate compared with no statistical difference.In different phenotypes of the hepatitis B mode of HBV - LP and HBV - DNA detection rate had no statistical difference;In HBV - DNA acuity 106IU/ml， HBV - LP higher positive rate was 92.7%;100 cases of healthy controls - LP all negative for HBV serum specimen. Conclusion: HBV - LP had good correlation with HBV - DNA， is the important symbol of HBV replication， detection of HBV - LP to determine HBV replication， especially for grass-roots unit to guide the treatment of HBe Ag negative patients has important clinical significance.

Hepatitis Bviruis HBN-DNA Vorus replication

乙肝肝炎病毒 HBN-DNA 病毒复制

R575.1

A

10.3969/j.issn.1000-7377.2015.12.011

△内蒙古自治区赤峰市敖汉旗医院

▲通讯作者