TLR4及Hs-CRP对早产亚临床绒毛膜羊膜炎的诊断价值

光瑾 谢穗

TLR4及Hs-CRP对早产亚临床绒毛膜羊膜炎的诊断价值

光瑾 谢穗

目的：检测Hs-CRP及TLR4在早产亚临床绒毛膜羊膜炎孕妇外周血、脐血血清中的表达，探讨两者与早产亚临床绒毛膜羊膜炎的关系，评价其预测早产亚临床绒毛膜羊膜炎的可行性。方法：应用流式细胞术检测孕妇外周血、脐血血清中的CDl4+单核细胞上TLR4分子的表达率和平均荧光强度；用胶乳增强免疫比浊法检测外周血及分娩后脐血Hs-CRP含量。结果：早产亚临床绒毛膜羊膜炎孕妇外周血清及脐血中CDl4+单核细胞上TLR4分子的表达率和平均荧光强度及Hs-CRP水平明显高于对照组和早产非感染组,差异均有显著性。亚临床感染组孕妇外周血清及脐血TLR4的MFI与Hs-CRP成正相关。结论：TLR4联合Hs-CRP可作为早期预测感染性早产的指标。

亚临床绒毛膜羊膜炎 TOLL受体4 高敏C反应蛋白

早产是引起围产儿发生率和死亡率升高的最主要原因。若能早期预测早产的发生，对尽早采用干预措施，预防早产，改善母婴预后有重要意义。本实验对早产亚临床型急性绒毛膜羊膜炎孕妇外周血及脐血CDl4+单核细胞上TLR4分子的表达率和平均荧光强度以及Hs-CRP进行了研究分析。

1 资料与方法

1.1 研究对象 选择2012年1月～2013年12月住院分娩的单胎孕妇共152例，按胎盘胎膜组织病理学检查结果,分为早产亚临床感染组(54例),早产无感染组(38例)。早产组平均（27.3±3.4）岁，平均孕周（33.6±1.88）周。无其它产科并发症及合并症。同时收集孕足月分娩者(60例)作为正常对照组。对照组平均（26.7±2.3）岁，平均孕周（38.8±1.29）周。对3组进行检测:①采用流式细胞术检测早产临产孕妇和正常对照组孕妇外周血和产后脐血中CDl4+单核细胞上TLR4分子的表达率和平均荧光强度；②采用胶乳增强免疫比浊法,测定早产临产孕妇和正常对照组孕妇外周血清及脐血中Hs-CRP水平。

1.2 诊断标准 早产的诊断依照《妇产科学》(第八版)诊断标准确诊。组织学绒毛膜羊膜炎的诊断标准[1]:每高倍视野有5～10个中性粒细胞浸润即为炎症。临床绒毛膜羊膜炎[2]:临床症状:①产前或产时每隔4h体温连续2次≥37.5℃(腋温),排除其他感染存在;②母体心率相隔4h连续2次＞100次/min,排除有心脏病史;③持续胎心率基线抬高 (＞160次/min)而无其他原因;④阴道分泌物脓性或味臭;⑤子宫压痛。实验室指标:①白细胞计数(WBC)＞12.5× 109/L,中性＞80%;②血沉(ESR)＞65mm/h;③胎盘、羊水或脐血细菌培养阳性;④胎膜或胎盘病理学检查为炎性表现。以上出现其中任何两项或以上者诊断为临床绒毛膜羊膜炎,仅出现实验室指标异常,诊断为亚临床绒毛膜羊膜炎。

1.3 研究方法 取早产组和对照组孕妇外周静脉血及产后脐血5ml两管放入4℃冰箱保存，12h内采用流式细胞仪测定外周血以及产后脐血中单核细胞中TLR4+和CD14+细胞表达百分率和平均免疫强度。取早产组和对照组外周静脉血及产后脐血5ml两管立即经3000r/min离心10min，留取血清后用免疫透射比浊法测定Hs-CRP含量。

1.4 统计学方法 用SPSS17.0统计分析软件包统计，数据以均值±标准差（±s）表示，使用方差分析的方法，统计P值，P＜0.05为差异有统计学意义。亚临床感染组患者外周血单核细胞TLR4的MFI与Hs-CRP相关系数r计算采用Pearson分析。

2 结果

2.1 两组孕妇分娩方式的比较 研究组阴道分娩58例（占63.04%）。对照组阴道分娩37例 (占61.67%)，两组之间无显著性差异（P＞0.05）。见表1。

表1 研究组与对照组分娩方式的比较

2.2 各组患者外周血、脐血Hs-CRP的水平比较早产亚临床感染组入院时外周血Hs-CRP及产后脐血Hs-CRP明显高于早产非感染组（P＜0.05)。而早产非感染组入院时外周血Hs-CRP及产后脐血Hs-CRP高于正常对照组（P＜0.05)。见表2。

表2 各组患者外周血、脐血Hs-CRP的水平比较(±s)

表2 各组患者外周血、脐血Hs-CRP的水平比较(±s)

组别 n早产亚临床感染组 54早产非感染组 38正常对照组 60 P值入院时外周血Hs-CRP脐血Hs-CRP 5.02±2.30 10.24±1.52 3.84±2.25 8.97±2.11 2.67±1.52 8.15±1.74＜0.05 ＜0.05

2.3 各组患者外周血、脐血TLR4+/CD14+（%）和MFI的水平比较 早产亚临床感染组入院时外周血及产后脐血中TLR4+/CD14+（%）和MFI明显高于早产非感染组（P＜0.05)。而早产非感染组入院时外周血及产后脐血中TLR4+/CD14+（%）和MFI高于正常对照组（P＜0.05)。早产亚临床感染组患者外周血及脐血中单个核细胞TLR4的MFI与Hs-CRP均成正相关(r1=0.608，P＜0.01；r2=0.634，P＜0.01)。见表3。

表3 各组患者外周血、脐血TLR4+/CD14+（%）和MFI的水平比较(±s)

表3 各组患者外周血、脐血TLR4+/CD14+（%）和MFI的水平比较(±s)

正常对照组（n=60）外周血TLR4+/ CD14+（%） 43.25±12.07 36.41±10.87 20.27±11.06外周血TLR4的MFI 46.90±12.04 39.03±11.6427.57±10.48脐血TLR4+/ CD14+（%） 45.14±12.34 35.07±11.36 24.59±10.27脐血TLR4的MFI 50.12±9.50 42.30±10.13 31.06±8.53组别 早产亚临床感染组（n=54）早产非感染组（n=38）

3 讨论

有文献报道40%以上的早产与感染有关[3]。Edmondson N等[4]发现有很大比例的早产孕妇临床上没有特殊症状，但胎盘组织学检查提示有急性绒毛膜羊膜炎的存在。而这种亚临床型的急性绒毛膜羊膜炎又称为组织学绒毛膜羊膜炎，在早产的发生上起了很大作用。早产最常见的致病因子是脂多糖,它是革兰氏阴性细菌外膜的主要成分，TLR4是脂多糖跨膜信号的特异性受体,LPS以LPS-LBP-CD14复合物的形式活化TLR4信号的传导，释放大量炎性介质，放大炎症反应导致早产。TLR4在感染性早产患者外周血单个核细胞中高表达，提示TLR4可能在感染性早产的发病机制中起重要作用[5]。本文显示早产亚临床绒毛膜羊膜炎的孕妇外周血和脐血中CDl4+单核细胞上TLR4分子的表达率和平均荧光强度明显高于早产非感染组和对照组。

高敏C反应蛋白是炎症反应中最敏感的指标。而超敏CRP能反映人体较低水平的炎症状态及变化。本组资料中早产亚临床绒毛膜羊膜炎孕妇的Hs-CRP明显高于早产非感染者。脐血Hs-CRP更能直接反映胎儿宫内是否有潜在感染。本研究中同组母血与脐血Hs-CRP无差异(P＞0.05)，故临床上可以通过检测孕妇的 Hs-CRP来预测胎儿的Hs-CRP，从而实行无损伤检测。

同时本研究显示外周血及脐血中单核细胞TLR4的MFI与Hs-CRP水平呈正相关。超敏CRP是一种较敏感的炎症非特异性标志物，单靠一种指标来预测早产的特异性较低。早产并非一种原因引起，现在越来越提倡指标的联合应用，以提高指标的预测价值，TLR4联合超敏CRP检测将为早产的预测和预防开辟一条新途径。

1 陈忠年.妇产科病理学[M].上海:上海医科大学出版社，1996：341.

2 王德智，石一复.中国妇产科专家经验文集[M].沈阳：沈阳出版社，1994：78.

3 Lamont RF，Sawant SR．Infection in the prediction and antibiotics in the prevention of spontaneous preterm labour and preterm birth．Minerva Ginecol．2005，57(4)：423～433.

4 Edmondson N，Bocking A.The prevalence of chronic deciduitisin cases of preterm labour without clinical chorioamnionitis．Pediatr Dev Pathol,2009（1）：16～21.

5 董生凤,罗艳,王豫黔.Toll样受体4在感染性早产患者外周血单个核细胞的表达及意义[J].中国妇幼保健,2010(8)：1088～1091.

TLR4 and Hs-CRP value to the diagnosis of premature birth subclinical chorionic amniotic membrane inflammation

The Third People's Hospital of Hefei,Hefei 230022,Anhui
GUANG Jin,XIE Sui

Objective:This study measured the expression of Hs-CRP and Toll-like receptor 4 in peripheral blood,cord blood serum of subclinical chorionic amniotic membrane inflammation of Premature Labor.To explore the relationship of Hs-CRP,Toll-like receptor 4 with subclinical chorionic amniotic membrane inflammation of Premature Labor,evaluate the feasibility of TLR4 and Hs-CRP expression in subclinical chorionic amniotic membrane inflammation of Premature Labor.Methods:To detect CD14+mononuclear cells on the expression of TLR4 molecular ratio and the average fluorescence intensity in peripheral blood,cord blood serum of premature pregnant and normal control group in application of flow cytometry;All pregnant women in the hospital to collect peripheral blood,with latex enhanced immune turbidimetric method to detect the contents of the Hs-CRP,to return umbilical cord blood to detect the contents of the Hs-CRP after giving birth.Results:CD14+of TLR4 molecules expression rate and mean fluorescence intensity(MFI)and the Hs-CRP levels in maternal serum and cord blood mononuclear cells of subclinical chorionic amniotic membrane inflammation of Premature Labor are significantly higher than the control group and preterm infection group.TLR4 MFI correlates positively with the level of Hs-CRP of peripheral blood and cord blood serum in subclinically infected group.Conclusion:TLR4 and Hs-CRP can be used as a useful marker for detection of premature labor with early intrauterine infection．

Subclinical chorionic amniotic membrane inflammation;Toll-like receptor 4;High sensitive C-reactive protein

R714.21

A

1671－8054（2015）01-0056-02

/（编审：徐元宏 施仲赋）

合肥市第三人民医院 安徽 230022

2014-11-07收稿，2014-12-26修回