不同月龄断奶应激对马驹血清指标和体增重的影响

肖海霞，托乎提·阿及德，石国庆，张 莉，李 海

(1.石河子大学 动物科技学院，石河子 832000；2.新疆农垦科学院，石河子 832000；3.中国农业科学院北京畜牧兽医研究所，北京 100193；4.新疆畜牧科学院畜牧研究所，乌鲁木齐 830000；5.昭苏县畜牧兽医局，昭苏 835600)

不同月龄断奶应激对马驹血清指标和体增重的影响

肖海霞1，4，托乎提·阿及德4，石国庆1，2*，张 莉3*，李 海5

(1.石河子大学 动物科技学院，石河子 832000；2.新疆农垦科学院，石河子 832000；3.中国农业科学院北京畜牧兽医研究所，北京 100193；4.新疆畜牧科学院畜牧研究所，乌鲁木齐 830000；5.昭苏县畜牧兽医局，昭苏 835600)

旨在研究不同月龄断奶应激对马驹血清指标和体增重的影响，以确定马驹断奶的最佳时间。选用15匹英纯血马驹和它们的母马，根据马驹的月龄分成3组，每组5匹；采用突然断奶法将马驹与母马分离，测定马驹断奶前、断奶当天和断奶后10个血清指标并称重，应用R语言进行数据分析。结果表明：断奶当天所有马驹葡萄糖(GLU)都显著高于断奶前后(P<0.05)，断奶当天8月龄断奶马驹的葡萄糖(GLU)含量最高，6月龄断奶马驹最低(P<0.05)；从断奶当天到断奶后的日增重值变化可知6月龄断奶马驹日增重值最高(0.78±0.05 kg)，8月龄马驹日增重值最低(0.13±0.52 kg)。综上表明，采用突然断奶法，相比7、8月龄断奶，6月龄断奶马驹应激程度较小，体重增加较快。

断奶应激；断奶月龄；马驹；血清指标；体增重

断奶期是动物一生中最重要的时期之一，断奶应激对动物的福利有着直接的影响。仔猪提前断奶可以提高母猪生产力，也可以切断母猪疾病对仔猪的感染，但断奶日龄直接影响着仔猪断奶后的生产性能[1-2]。乳牛饲养中的犊牛也有和仔猪早期断奶类似的问题，而且犊牛断奶过早瘤胃功能得不到足够的发育，就会导致其健康严重受损甚至死亡[3]。因此减少断奶应激，可以提高饲料利用率，加快幼畜生长速度，提高幼畜抵御疾病能力和降低疫病感染风险，同时也可减少幼畜异常行为的发生，降低幼畜死亡率和促进幼畜在适宜的环境中健康生长，这对最大限度地发挥家畜的生产性能、提升畜牧生产的质量和能力，提高动物福利水平有着重要意义。马驹是马产业发展的基石。断奶是马驹从依赖母马到独立生存的重要转折时期，同时也是影响马驹生长最主要的应激源。断奶应激大不仅仅影响到马驹的生长发育，还会降低马驹的福利，从而影响马产业的发展。家畜机体的血液指标是家畜生理和健康状况的一种“指示剂”[4-5]，当机体状态发生变化时血液指标也会变化。当前，断奶对动物血液指标影响的研究主要以仔猪为主[6-8]，有关不同月龄对断奶应激马驹血清指标和体增重的研究鲜有报道。为了减少断奶应激对马驹的影响，提高马驹的断奶福利和满足马驹的特殊育种需求，本试验设计3种不同断奶月龄，通过对断奶前后相关血清指标和体增重的分析确定其最佳的断奶月龄，为生产实践提供理论参考。

1 材料与方法

1.1 试验时间和地点

试验于2013年11月18日—12月10日在新疆伊犁哈萨克自治州昭苏县新疆伊犁马研究繁育中心进行。

1.2 试验动物和分组

随机选择健康状况良好的15匹英纯血马驹和它们的母马，根据马驹的断奶月龄分成3组，每组5匹，其中：试验Ⅰ组为6月龄马驹组，试验Ⅱ组为7月龄马驹组，试验Ⅲ组为8月龄马驹组。

1.3 断奶方法及饲养管理

1.3.1 断奶方法 断奶前马驹与母马一起单厩饲喂；断奶时采用突然断奶的方法：将母马和马驹先驱赶到对应马圈里，然后将马驹推至圈外统一赶到200 m2的马驹圈内，马驹和母马完全隔离。

1.3.2 饲养管理 断奶前马驹主要以母乳为主。从断奶当天开始的一周内每匹马驹每天饲喂混合饲料0.5 kg，每天2次(09：30和17：00)；苜蓿每天饲喂1.2 kg，每天3次(08：30、20：30和24：00)；干草每天饲喂1.2 kg，每天2次(12：30和16：00)。断奶一周后每匹马驹每天饲喂混合饲料1 kg，每天2次(09：30和17：00)；苜蓿每天饲喂1.2 kg，每天4次(08：30、18：00、20：00和22：30)；干草每天饲喂1.2 kg，每天4次(10：30、12：30、16：00和24：00)。供给充足饮水及自由采食定量分配的饲料、苜蓿和干草。试验所用饲粮参考轻型马饲养标准[9]，同时结合马场饲养经验制定。饲粮组成详见表1。

表1 基础饲粮组

Table 1 Composition of basal diet %

1.4 样品采集与处理

1.4.1 采血时间 马驹血样分别于断奶前第10 天(简称断奶前)、断奶当天和断奶后第12 天(简称断奶后)晨饲2 h后采集。

1.4.2 采血和处理方法 由颈静脉采血10 mL，倾斜放置4 ℃冰箱，静置一夜析出血清后，以3 000 r·min-1离心20 min，收集血清于-20 ℃低温冰箱保存备用，取3～5 mL送北京华英生物技术研究所检测。

1.5 血清指标测定

血清生化和激素指标测定方法(表2)是按照北京华英生物技术研究所提供的试剂盒操作进行，均由北京华英生物技术研究所提供。

表2 血清生化和激素指标测定方法

Table 2 The detection methods of serum indices and hormone

血清指标Serumindex方法Methods总蛋白Totalprotein(TP)双缩脉法白蛋白Albuminprotein(ALB)溴甲酚绿法球蛋白Globulinprotein(GLB)总蛋白⁃白蛋白尿素氮Bloodureanitrogen(BUN)两点动力法葡萄糖Glucose(GLU)葡萄糖氧化酶法肌酸激酶Creatinekinase(CK)采用连续监测法(N⁃乙酰半胱氨酸法)游离脂肪酸Freefattyacid(FFA)改良比色法β⁃羟丁酸β⁃hydroxybutyrat(β⁃HB)酶法皮质醇Cortisol(COR)放射免疫测定去氢表雄酮Dehydroepiandrosterone(DHEA)放射免疫测定

1.6 体重称量时间和方法

1.6.1 称量时间 马驹分别于断奶前(2013年11月18日)、断奶当天(11月28日)和断奶后(12月10日)清晨空腹称量体重。

1.6.2 称量方法 使用地磅秤称量。

1.7 统计分析

用Excel软件进行数据整理，应用R2.14.2语言统计软件进行线性回归和方差分析，采用Duncan多重比较法进行比较，以P<0.05为差异显著的判定标准，试验结果以“平均值±标准误”表示。

2 结 果

2.1 不同时期所有马驹血清生化和激素指标变化

应用R2.14.2语言的Duncan多重比较法比较发现(表3)：所有马驹的葡萄糖(GLU)，β-羟丁酸(β-HB)和游离脂肪酸(FFA)在不同时期都发生了显著的变化，其中：断奶当天GLU和FFA含量最高(6.38±0.20 和0.40±0.01 mmol·L-1)，并且都与断奶前后差异显著(P<0.05)。断奶后的β-HB含量显著低于断奶前和断奶当天(P<0.05)。

表3 所有马驹不同时期血清指标的变化

Table 3 The changes of serum indices of all foals on different phase

血清指标Serumindex断奶前Pre⁃weaningday断奶当天Weaningday断奶后Post⁃weaningday标准误SEMPGLU/(mmol·L-1)5．70±0．17b6．38±0．20a5．59±0．12b0．110．004TP/(g·L-1)54．82±1．1256．28±0．8456．72±1．160．600．417ALB/(g·L-1)24．42±0．4624．72±0．5124．70±0．480．270．893GLB/(g·L-1)30．39±0．7631．57±0．5932．02±0．860．430．293β⁃HB/(mmol·L-1)0．26±0．01a0．25±0．01a0．22±0．01b0．000．002BUN/(mmol·L-1)4．52±0．904．25±0．354．01±0．170．160．435CK/(U·L-1)93．70±6．1285．99±5．2092．94±6．263．340．599FFA/(μmol·L-1)0．32±0．02b0．40±0．01a0．29±0．01b0．110．000COR/(ng·L-1)50．33±1．5854．21±1．5849．66±1．550．940．104DHEA⁃S/(μg·dL-1)27．27±1．1433．21±6．0427．42±3．902．400．530

同行数据相同小写字母表示差异不显著(P>0.05)，不同字母表示差异显著(P<0.05)。下表同

In the same row，the same lowercase mean no significant difference(P>0.05)，the different lowercase mean significant difference(P<0.05).The same as below

2.2 不同断奶月龄马驹的血清生化和激素指标的变化

由表4可知：断奶前后不同月龄马驹在GLU、ALB、BUN和FFA水平上差异显著(P=0.02、0.03、0.01和0.004，P<0.05)。断奶当天8月龄断奶马驹的GLU和ALB含量最高，6月龄最低，而6月龄和8月龄断奶马驹的GLU和ALB含量差异显著(P<0.05)。断奶前和断奶当天6月龄断奶马驹的BUN浓度显著高于7月龄和8月龄断奶马驹(P<0.05)。

2.3 不同月龄马驹血清生化和激素指标变化

由表5可知：不同月龄马驹在ALB和BUN水平上差异显著(P=0.000和0.001，P<0.05)。其中8月龄断奶马驹的ALB含量最高，6月龄断奶马驹的ALB含量最低，3组之间差异显著(P<0.05)。6月龄断奶马驹的BUN浓度显著高于7月龄和8月龄的断奶马驹(5.15±0.37，P<0.05)；而7月龄和8月龄的断奶马驹BUN含量差异不显著(P>0.05)。

表5 不同月龄马驹所有时期血清指标的变化

Table 5 The changes of serum indices of different-age foals on different phase

血清指标Serumindex6月龄6⁃month7月龄7⁃month8月龄8⁃month标准误SEMPGLU/(mmol·L-1)5．65±0．145．96±0．166．01±0．240．110．420TP/(g·L-1)54．09±1．1056．55±1．2056．72±0．710．600．173ALB/(g·L-1)23．13±0．41c24．58±0．36b25．76±0．33a0．270．000GLB/(g·L-1)30．96±0．8931．96±0．8931．33±0．430．430．553β⁃HB/(mmol·L-1)0．24±0．010．24±0．010．25±0．0410．000．653BUN/(mmol·L-1)5．15±0．37a3．98±0．19b3．86±0．11b0．160．001CK/(U·L-1)83．54±8．8795．58±5．2391．69±3．673．340．370FFA/(μmol·L-1)0．35±0．030．33±0．020．34±0．010．110．819COR/(ng·L-1)51．83±2．2350．72±1．6251．76±1．330．940．871DHEA⁃S/(μg·dL-1)28．10±2．7833．72±6．1225．79±2．412．400．366

2.4 不同断奶月龄马驹在不同时期的血清生化和激素指标变化

由表6可知：8月龄断奶马驹断奶当天的GLU含量最高(6.76±0.39 mmol·L-1)，并且与断奶前后差异显著(P<0.05)。6月龄断奶马驹断奶前和断奶当天的BUN含量与断奶后差异显著(P<0.05)。6月龄和7月龄断奶马驹断奶当天的FFA含量显著高于断奶前后，而8月龄断奶当天与断奶后差异显著(P<0.05)。

2.5 断奶前后不同组马驹体重变化

对3个不同月龄组马驹断奶前后的体重变化分析发现(表7)：断奶前、断奶当天和断奶后6月龄马驹体重都显著低于7月龄和8月龄断奶马驹这3个时期的体重(P<0.05)，这符合马匹的生长发育曲线[9]。从断奶前～断奶当天和从断奶当天～断奶后的日增重变化来看3个年龄组日增重差异不显著(P>0.05)；从断奶前～断奶当天的日增重值变化可以发现6月龄断奶马驹比7和8月龄断奶马驹日增重较低，符合马匹的生长发育曲线；但是从断奶当天～断奶后的日增重中发现6月龄断奶马驹日增重值最高(0.78±0.05 kg)，而8月龄断奶马驹日增重值最低(0.13±0.52 kg)，说明断奶对不同年龄的马驹体增重是有影响的。

3 讨 论

应激是机体对外界和内部各种异常刺激所产生的非特异性应答的总和[10]；断奶是影响马驹的生理、健康和营养福利的应激原。应激条件下会影响马驹的生产性能、行为及血液生理生化指标，对马驹机体造成危害，损害马驹的动物福利，降低经济效益。因此，在畜牧生产实践中应尽量减少应激特别是严重应激的影响。

血液是机体实现体液调节的途径，也是运输营养物质和代谢物的载体，机体健康状态的改变可以直接影响血液成分的变化，因此家畜的各项血液指标是家畜机体生理功能及代谢过程的内在反映，也是评价动物健康状况的重要参数[11]。常用于评价家畜应激状态的血液指标：葡萄糖[12-13]、总蛋白和球蛋白[13-14]、β-羟丁酸[13]、尿素氮[15]、肌酸激酶[7-8]、游离脂肪酸[16-17]、皮质醇[12，18]和去氢表雄酮[19]等。

3.1 血液葡萄糖(GLU)指标变化

血液中GLU 浓度是动物机体内能量平衡的重要指标。血液葡萄糖(GLU)的来源主要是饲料中的糖类被消化进入血液，通过神经和激素调节维持恒定的血糖浓度，以保证肌体对葡萄糖的需要量[20]。应激改变了家畜体内和物质代谢相关的激素水平，导致家畜机体代谢功能的改变。当家畜发生应激时，通过胰高血糖素和儿茶酚胺促进糖原降解提供葡萄糖供能，因此血液GLU升高[21-22]。孙凤莉[23]报道饲喂代乳品组的47日龄断奶羔羊的GLU含量均略高于对照组(P>0.05)。H.R.Crookshank等[24]报道犊牛葡萄糖含量在断奶后变化不显著。突然断奶的瘤牛犊牛的葡萄糖含量在断奶前后差异不显著[25-26]。N.A.Campell等[13]认为葡萄糖浓度变化可以作为应激变化的标志物。

表7 断奶前后3个组马驹体重的变化

Table 7 Body weight change of three groups on weaning day and post-weaning day kg

本试验发现断奶当天，所有马驹的GLU含量都显著高于断奶前后(P<0.05)，这与E.M.Lynch[27]对犊牛的断奶应激研究结果一致，说明断奶会导致所有马驹产生断奶应激。断奶当天8月龄断奶马驹的GLU含量最高，而6月龄断奶马驹最低(P<0.05)，说明断奶当天8月龄断奶马驹在GLU水平上所反映的断奶应激最高，6月龄断奶马驹最低。

3.2 血液蛋白质和尿素氮指标的变化

血液的总蛋白、白蛋白和球蛋白浓度是衡量血液蛋白质营养的重要指标之一。血液总蛋白是由白蛋白和球蛋白组成的，总蛋白含量高，有利于提高免疫力和代谢水平，促进动物健康生长，而球蛋白水平高则机体抵抗力较强。家畜在应激时，体内皮质醇分泌增多使蛋白分解代谢加快，从而使血液蛋白含量降低[28]。断奶应激导致内分泌代谢紊乱，引起体内蛋白质代谢机制发生较大调整，使得血液中的非蛋白氮升高，从而降低机体对蛋白质的合成与利用[29]。仔猪断奶后由于营养物质无法迅速补充会导致血液总蛋白、白蛋白和球蛋白含量显著下降[6，30]。冷静等[31]研究结果表明，不同日龄断奶仔猪断奶后7 d内的TP、ALB和GLB均会迅速降低。方光新等[29]对40和60日龄的巴音布鲁克羊实施早期断奶发现各试验组TP和GLB 浓度均低于对照组，但是差异不显著(P>0.05)。许莲萍等[32]报道阿勒泰羔羊在断奶前的总蛋白含量明显高于断奶后的总蛋白含量且差异显著(P<0.05)。高艳霞等[33]对12头55日龄的犊牛进行断奶发现断奶当天血清总蛋白含量急剧降低，到第14天和断奶前相差不大(P>0.05)。

本研究发现6和7月龄断奶马驹在断奶当天和断奶后的总蛋TP、ALB、GLB比断奶前略高，与前人[5，11，14，29]研究结果相反；断奶当天，8月龄断奶马驹血清中的TP和GLB含量最低，ALB含量最高。断奶当天和断奶后的TP水平比断奶前有下降的趋势，这与前人研究结果一致，从而说明相比6和7月龄马驹，8月龄马驹对断奶应激的反应最大。

血清尿素氮(BUN)是衡量家畜体内蛋白质代谢和氨基酸平衡的重要指标之一。通常较低的BUN含量表明氨基酸平衡较好，机体蛋白合成率较高[34]。本试验发现断奶前和断奶当天6月龄断奶马驹的BUN浓度显著高于7和8月龄断奶马驹，说明6月龄马驹由于自身的身体发育情况，蛋白质的合成率较低对植物蛋白消化吸收能力差，摄入的蛋白减少，使得体内蛋白质代谢发生变化，加快了组织蛋白的分解，因此血液中的非蛋白氮升高。

3.3 游离脂肪酸(FFA)指标变化

脂肪组织是血浆中游离脂肪酸的唯一来源，因此，一般用血浆中游离脂肪酸的含量来衡量脂肪动员的程度[35]。在应激、饥饿、或长时间运动等生理条件下，脂肪组织中脂肪的动员都会加强，此时，血浆中游离脂肪酸的浓度就会大幅度升高[36]。与程发祥[36]研究结果一致，本试验中断奶当天，6和7月龄断奶马驹的FFA含量显著高于断奶前后，而8月龄断奶当天与断奶后差异显著(P<0.05)。从而说明在FFA水平上所反映对断奶应激反应程度，6和7月龄断奶马驹高于8月龄断奶马驹。

3.4 断奶前后不同组马驹体重变化

断奶会引起各种家畜的体重降低[37-39]。翟少钦等[40]发现早期断奶仔猪生长缓慢，体增重显著下降(P<0.05)。本研究发现断奶前、断奶当天和断奶后6月龄马驹体重都显著低于7和8月龄断奶马驹的体重(P<0.05)，这是由于6月龄断奶马驹自身发育情况低于7和8月龄断奶马驹，符合马匹的正常生长发育曲线[9]。从断奶前～断奶当天和从断奶当天～断奶后的日增重增加值对比发现，从断奶当天～断奶后的日增重都低于从断奶前～断奶当天的日增重，说明断奶影响了不同年龄马驹的生长发育；而从断奶当天～断奶后的日增重值显示6月龄马驹日增重值最高，8月龄马驹日增重值最低说明断奶后3个不同年龄组的生长发育状况是6月龄断奶马驹最高，8月龄断奶马驹最低，从而表明相比7、8月龄断奶马驹，6月龄断奶马驹所表现的断奶应激程度较小，体重增加较快。

4 结 论

采用突然断奶法时，相比7、8月龄断奶马驹，6月龄断奶马驹应激程度较小，6月龄可作为马驹适宜的断奶时间，有利于马驹的后期生长发育和提高养殖效益。同时为了研究应激对马驹生产和动物福利的影响，还需要对其它应激条件和其他早期断奶月龄进行进一步深入研究。

致谢 本研究得到新疆伊犁马研究繁育中心居马洪主任、周健、于伟浩、王呈超、徐文慧、江阿努尔和努尔兰以及石河子大学博士研究生毋状元的大力支持，在此表示衷心地感谢！

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(编辑 程金华)

Effects of Weaning Stress on Blood Serum Indices and Body Growth at Different Ages Foals

XIAO Hai-xia1，4，TUOHUTI·Aji-de4，SHI Guo-qing1，2*，ZHANG Li3*，LI Hai5

(1.CollegeofAnimalScience&TechnologyShiheziUniversity，Shihezi832002，China；2.XinjiangAcademyofAgriclturalandReclamationScience，Shihezi83000，China；3.InstituteofAnimalScience，ChineseAcademyofAgriculturalSciences，Beijing100193，China；4.XinjiangAcademyofAnimalSciences，Urumqi83000，China；5.BureauofAnimalHusbandryandVeterinaryofZhaosuCounty，Zhaosu835600，China)

In this study，the effects of weaning stress on blood serum index and body growth at different ages foals were investigated to get the best weaned time.A total of 15 Thoroughbred mare-foal pairs were divided into 3 groups(each group，n=5) according to the weaning age.Foals and mares were separated by using the abrupt-weaned method，the changes of 10 blood serum biochemical indices and body weight of foals were measured on pre-weaning day，weaning day and post-weaning day.The results showed as follows：The concentrations of GLU in all foals on weaning day more significantly increased than those on pre-weaning day and post-weaning day(P<0.05).On weaning day，the concentration of GLU for 8-month foals was the highest and that of 6-month foals was the least(P<0.05).The daily weight gain of 6-month foals was the highest(0.78±0.05 kg) and that of 8-month foals was the least(0.13±0.52 kg) from weaning day to post-weaning day.Results of the present study indicated that 6-month foals had less weaning stress and rapid weight gain compared with 7-month and 8-month foals by using the abrupt-weaned method.

weaning stress；weaning age；foal；blood serum index；body growth

10.11843/j.issn.0366-6964.2015.11.013

2015-03-05

国家公益性行业(农业)科研专项(201003075)；农业部财政项目(农财2009)；自治区重大专项项目(201230116-8)；自治区高新项目(201411106)

肖海霞(1975-)，女，湖南人，副研究员，博士，主要从事动物遗传育种与繁殖研究，E-mail：xhxqzp@163.com

*通信作者：石国庆，研究员，博士，E-mail：nkkxyxms@163.com；张 莉，副研究员，博士，E-mail：zhangli@263.net

S821.4+5

A

0366-6964(2015)11-2010-10