微柱凝集法与凝聚胺法交叉配血结果分析

杨庆贤，陈江林，王 琨

(重庆市云阳县人民医院输血科 404500)



·案例分析·

微柱凝集法与凝聚胺法交叉配血结果分析

杨庆贤，陈江林，王 琨

(重庆市云阳县人民医院输血科 404500)

微柱凝集法； 凝聚胺法； 交叉配血

交叉配血是判断能否输血的重要依据，通过将献血者的红细胞和血清分别与受血者的血清和红细胞融合，观察有无凝集反应[1-2]。交叉配血有多种方法，如抗人球蛋白法、木瓜蛋白酶法、微柱凝集法和凝聚胺法。随着微柱凝集法在国内的广泛应用，本院特将此方法与凝聚胺法进行交叉配血[3-4]。为了分析两种方法的特点，本研究回顾性分析本院2013年6～12月需要输血的100例患者的临床资料，对所有患者分别采用微柱凝集法与凝聚胺法同型交叉配血，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 回顾性分析本院2013年6～12月需要输血的100例患者的临床资料，其中男54例，女46例；年龄22～64岁，平均34.3岁；有妊娠史者20例，输血史者30例。对所有患者分别采用微柱凝集法与凝聚胺法同型交叉配血，血清标本均在24 h以内检测。

1.2 仪器与试剂 微柱凝集法：交叉配血卡(美国强生有限公司)，博唯优专用离心机、博唯优专用孵育器(美国强生有限公司)；凝聚胺法：重悬液、底离子介质液、凝聚胺液(合肥天一生物技术研究所)。

1.3 方法

1.3.1 标本检测 对送检血标本实施微柱凝集法和凝聚胺法的交叉配血试验，当出现不匹配标本时，可用相同的血标本用上述两种方法重复试验1次。

1.3.2 凝聚胺法 (1)把献血者和供血者提供的血标本用生理盐水调和成红细胞悬液，以3%～5%为准，两种血标本每份1.0 mL，准备两根试管并标明主、次侧，将献血者红细胞悬液1滴和受血者血清2滴加入主侧管中，之后将受血者红细胞悬液1滴和献血者血清(浆)2滴加入次侧管中。(2)主、次侧试管分别加入6滴低离子介质液，混匀后静置1 min。(3)主、次侧试管分别加入2滴聚凝胺液，混匀后静置15 s。(4)以3 000 r/min的速度离心15 s，弃上清液，之后轻晃试管查看有无凝聚，如果未出现凝聚现象，需重做。(5)在主、次侧试管中加重悬液2滴，轻摇试管观察凝聚是否散开。结果判断：如果不是特异性聚集，在加入重悬液后红细胞凝块会在1 min内分散，则证明匹配，此非特异性聚集是由凝聚胺引起。相反，试验后仍然是不同强度的凝块，则证明为不匹配，特异性凝集由抗体和血型抗原引起。

1.3.3 微柱凝集法 (1)把献血者和供血者提供的血标本用生理盐水调和成红细胞悬液，以3%～5%为准，两种血标本每份1.0 mL。(2)将患者姓名标注在配血卡上，并标明主、次侧，首先将BLSS液50 μL加入主、次侧试管中。之后在主侧试管中加入献血者3%～5%的红细胞悬液10 μL和受血者血浆50 μL，在次侧试管中加入受血者3%～5%的红细胞悬液10 μL和献血者血清(浆)50 μL。(3)在37 ℃的环境下孵育10 min。(4)以1 500 r/min的速度离心2 min，以900 r/min的速度离心3 min后观察结果。结果判断：若配血相合，有大量的红细胞滞留在凝胶管底部，则表示为阴性；若配血不相符，在试管上部或中间只有些许红细胞，并没有滞留在凝胶管底部，则证明为阳性。

1.4 统计学处理 采用SPSS17.0统计学软件进行数据处理与统计学分析，计数资料资料以百分率表示，组间比较采用χ2检验；以α=0.05为检验水准，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 两种交叉配血结果比较 在供血者与患者ABO血型及Rh(D)血型血液标本相同的情况下进行交叉配血试验，微柱凝集法有5例阳性标本，5例标本经抗体筛查证实后得知其中所产生的不规则抗体属于供血者，其操作时间约30 min；凝聚胺法有0例阳性标本，其操作时间约10 min。见表1。

表1 100例微柱凝集法与凝聚胺法交叉配血结果比较

2.2 5例阳性标本处理方案及结果分析 5例阳性标本均在ABO、Rh(D)同型的基础上行交叉配血试验，因此，微柱凝集法阳性标本需复查患者血型，检查患者输血史及移植史，排除血型错误的原因。试验结果证实均为供血者不规则抗体导致交叉配血试验阳性。经直接、间接抗人球蛋白试验，在排除同种抗体和自身免疫性溶血性贫血等疾病后，可进行输血治疗，否则重新经交叉配血试验后输血。5例阳性标本均采取重新交叉配血试验后输血治疗，7 d后直接、间接抗人球蛋白试验均为阴性。

3 讨 论

交叉配血从血型鉴定的基础上分析，为了进一步证实受血者和献血者之间是否存在血型不合的抗原-抗体反应，可通过交叉配血试验进行证实，从而保证受血者的输血安全[5-6]。因患者的生命安全与输血有着直接联系，所以即使患者和献血者属于同一血型，也应进行交叉配血。交叉配血还是确定是否输血的重要依据，如主测和次测均未产生凝集现象，可实施输血。如果受血者的血清和献血者红细胞在主测发生凝集，应禁止输血；如主侧不凝集，受血者红细胞和献血人血清在次侧出现凝集现象，必要时可少量或慢速输血[7]。交叉配血试验有多种方法，如胶体介质配血法、酶技术配血法、聚凝胺法、盐水法等，本文研究中采用的微柱凝集法和凝聚胺法。

微柱凝胶试验耗时较长，需要约30 min，需要孵育器和特殊离心机，从而不适合用于处理急诊标本。微柱凝集法的敏感性高，能检测出不规则抗体，有更准确的结果。

凝聚胺法降低溶液的离子强度需利用低离子介质，从而减少红细胞周围的阳离子云，促进红细胞相应抗原与血清中的抗体融合，之后加入凝聚胺溶液来中和红细胞表面的负电荷，形成可逆的非特异性聚集并直接凝集红细胞。此方法简单快捷，试剂便宜，配血时间只需10 min，且不需要特殊仪器设备，广泛应用于基层医院或急诊抢救患者。

本文研究中，在供血者与患者ABO血型及Rh(D)血型血液标本相同的情况下进行交叉配血试验，微柱凝集法有5例阳性标本，经抗体筛查证实后得知，5例标本已经产生了针对供血者的不规则抗体，其操作时间约30 min；凝聚胺法有0例阳性标本，其操作时间约10 min。微柱凝集法出现不匹配的原因有恶性肿瘤、免疫性溶血性贫血，骨髓增生异常综合征、红细胞浓度过渡等。

综上所述，微柱凝集法的敏感性高于凝聚胺法，能提高不完全抗体检出率，结果更准确，但耗时较长，不适合用于急诊配血。凝聚胺法快速、简便，假阳性较少，适合用于急诊配血。

[1]钟月华，罗铁军，黄华华，等．微柱凝胶法与凝聚胺法在交叉配血中的比较研究[J]．广西医科大学学报，2010，27(2)：296-297．

[2]刘永霞．凝聚胺法与微柱凝胶法在临床配血中的应用比较[J]．现代中西医结合杂志，2012，21(3)：266-267．

[3]危艳顺，姚明．凝聚胺法、微柱凝胶法两种配血方法学评价[J]．临床和实验医学杂志，2013，12(8)：623-624．

[4]周红波．微柱凝胶法、凝聚胺法和盐水法在交叉配血中的应用[J]．实验与检验医学，2014，32(1)：92．

[5]晏红，兰玉梅．凝聚胺法及微柱凝胶法同型交叉配血的结果分析[J]．医药前沿，2013，3(12)：117-118．

[6]王远杰．凝聚胺法联合微柱凝集试验在临床输血中的应用[J]．西部医学，2009，21(11)：1976-1977．

[7]曾玉梅．血型鉴定与交叉配血中微柱凝胶法与凝聚胺法的比较应用[J]．健康必读，2012，20(3)：83-84．

10.3969/j.issn.1672-9455.2015.07.066

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1672-9455(2015)07-1024-02

2014-09-22

2014-12-22)