开胃合剂中挥发油的提取工艺研究

钱 芳 施 炜

（江苏省中医院药学部，南京 210029）

开胃合剂由佩兰、川石斛、陈皮、石菖蒲、益智仁、冬瓜子、甘草等组成，具有醒脾开胃助食之功效，临床用于病后、体弱、胃气不振，表现为饮食无味，食欲呆滞，食量减少，以致神疲乏力等症，以及功能性消化不良的患者。方中佩兰、石菖蒲、益智仁、陈皮均含有挥发油类成分，由于这类成分具有较强的挥发性，在提取及制剂工艺过程中易损失，为保证复方药效，应最大程度保留开胃合剂中的挥发油成分。本试验采用水蒸气蒸馏法提取方中挥发油，以总挥发油得量为指标，用单因素试验和正交试验对挥发油的提取方法进行考察，优选出最佳提取工艺，为规范制剂质量标准提供科学依据。

1 仪器与试药

挥发油提取器（上海医用分析仪器厂）；电热套（上海羌强仪器设备有限公司）； XY1000C精密电子天平（常州市幸运设备有限公司）。所用中药饮片均购自江苏省药材公司，并由本室专家鉴定。

2 方法与结果

2.1 实验方法 挥发油提取参照2010版《中华人民共和国药典》一部附录XD挥发油测定法进行[1]。按处方量比例称取佩兰、石菖蒲、益智仁、陈皮310 g，置玻璃烧瓶中，加入定量的水，连接挥发油测定器，然后连接回流冷凝管。置电热套中加热至沸，调温并保持微沸，读取挥发油量。

2.2 实验内容

2.2.1 单因素实验

2.2.1.1 加水量的考察 按处方量比例称取佩兰、石菖蒲、益智仁、陈皮310 g，共称取5份，用水蒸汽蒸馏法提取挥发油，分别加4倍量、6倍量、8倍量、10倍量和12倍量水，浸泡1 h，水蒸汽蒸馏6 h，考察挥发油提取量。结果分别为2.24 mL、2.26 mL、2.35 mL、2.37 mL、2.36 mL。总挥发油提取量在加水量为10倍量时最高，故选择加水量为10倍量。

2.2.1.2 提取时间的考察 按处方量比例称取佩兰、石菖蒲、益智仁、陈皮310 g，共称取5份，加10倍量水，浸泡1h，分别水蒸汽蒸馏2 h、4 h、6 h、8 h、10 h，考察挥发油提取量。结果分别为2.02 mL、2.32 mL、2.36 mL、2.33 mL、2.29 mL。挥发油提取量在提取6 h时最高，故选择提取时间为6 h。

2.2.1.3 浸泡时间的考察 按处方量比例称取佩兰、石菖蒲、益智仁、陈皮310 g，共称取5份，加10倍量水，浸泡0 h、1 h、2 h、3 h、4 h，水蒸汽蒸馏6 h，考察挥发油提取量。结果分别为2.32 mL、2.37 mL、2.38 mL、2.34 mL、2.35 mL。在浸泡时间为2 h时，挥发油提取量最高，故选择浸泡2 h。

2.2.2 正交试验

2.2.2.1 因素水平安排 在单因素实验的基础上，结合生产实际，以挥发油提取量为考察指标，采用水蒸汽蒸馏法，选择对挥发油提取率影响较大的浸泡时间、加水量（倍）、提取时间作为考察因素，设计采用L9（34）正交设计进行实验。因素水平安排见表1。

表1 因素水平表

2.2.2.2提取方法 处方量比例称取佩兰、石菖蒲、益智仁、陈皮310 g，共称取9份，按正交设计要求加入溶剂，浸泡，提取，记录挥发油的提取总量。

2.2.2.3 正交试验结果 见表2

表2 水煎提取正交试验结果

2.2.2.4 方差分析 由方差分析表和正交试验结果可以看出，因素C对试验结果有显著影响，因素A、B对试验结果没有显著影响，各因素影响次序为C＞B＞A；各因素不同水平的影响次序为A2＞A1＞A3，B3＞B2＞B1，C3＞C2＞C1，因此最佳提取工艺为A2B3C3，即加12倍量水，浸泡2 h，提取6 h。见表3。

表3 方差分析表

2.2.3 验证试验 称取与正交试验等量饮片三份，按优选的提取工艺提取。结果见表4。

表4 验证试验结果表

3 讨论

佩兰挥发油具有祛痰、抑菌、抗炎、增强免疫力等作用[2]。佩兰挥发油是佩兰的主要药用成分，多用于湿浊中阻，脘痞呕恶，口中甜腻，口臭，多涎，暑湿表症，头胀胸闷等治疗[3]。石菖蒲挥发性成分较为复杂，已知成分达60余种，主要结构类型为苯丙素类（简单苯丙素 木脂素及香豆素类） 和萜类（单萜倍半萜 二萜及三萜类） 化合物[4]。石菖蒲挥发油对消化系统可促进消化，调节胃肠运动作用[5]。益智仁含有多种萜类、黄酮类、氨基酸、微量元素及挥发油等成分[6]，其中挥发油占1%~2%，有温脾、暖肾、涩精，治冷气腹痛、夜多小便等功效[7]。陈皮主要成分为橙皮苷、新橙皮苷、对羟福林、黄酮化合物、挥发油等。广陈皮挥发油的主要成分为D-柠檬烯、β-月桂烯等萜烯烃类，对某些革兰氏阳性菌、真菌有较好的抑制作用[8]。故在进行制剂工艺研究时，对佩兰、石菖蒲、益智仁、陈皮中的挥发油成分单独进行提取，以保留更多的有效成分。

目前用于中草药挥发油成分提取的方法有许多，包括水蒸气蒸馏法、溶剂回流法、微波法、超临界流体萃取法，其中水蒸气蒸馏法具有成本低、操作简便、效率较高等优点，在中药的生产中应用广泛[9]，是提取挥发油的传统方法，为《中国药典》2010年版收录方法。水蒸气蒸馏法采用特制的挥发油提取装置直接加热蒸馏或者通入水蒸气，使挥发油随导入的蒸气一同馏出。此法设备简单、成本低廉、操作简便，产量大。因此，本研究采用了此经典方法。

由正交试验结果可知，因素C对试验结果有显著影响，因素A、B对试验结果没有显著影响。最佳提取工艺为A2B3C3，即加12倍量水，浸泡2 h，提取6 h。验证试验结果表明，优选工艺合理可行。

[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典一部[S].北京：中国医药科技出版社，2010：附录63.

[2]魏道志，宁书菊，林文雄，等.佩兰的研究进展[J].时珍国医国药，2007，18（7）：1782.

[3]国家药典委员会.中国药典[S].北京：中国医药科技出版社，2010：201．

[4]董小平，邓放.石菖蒲质量标准研究进展[J].成都中医药大学学报，2011，24（1）：60-63．

[5]王睿，费洪新，李晓明，等.石菖蒲的化学成分及药理作用研究进展[J].中华中医药学刊，2013，31（7）：1606-1610.

[6]徐俊驹，谭宁华，曾广智，等.益智仁化学成分的研究[J].中国中药杂志，2009，34（8）：990-992．

[7]李兴华，胡昌江，李文兵，等.益智仁止泻作用初步研究[J].时珍国医国药，2009，20（10）：2498-2499.

[8]高蓓.广陈皮黄酮类化合物和挥发油成分及其活性研究[D].武汉：华中农业大学食品科技学院博士学位论文，2011．

[9]温悦.挥发油提取方法研究概况[J].中国药业，2010，19（12）：84-85.